摘要:目的:探讨miR-21在化疗性卵巢早衰大鼠模型中的治疗潜能及其可能机制。方法:体外构建miR-21慢病毒载体(LV-miR-21)。将大鼠随机分为空白对照组、模型组、空载组及miR-21组,通过腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立化疗所致卵巢早衰大鼠模型。建模后往miR-21组大鼠双侧卵巢注射LV-miR-21,注射后第1、15、30、45、60天分批处死大鼠。阴道脱落细胞涂片检测大鼠动情周期;化学发光法与免疫放射法测定性激素水平;进行卵巢称重、计数各级卵泡数;TUNEL法测定卵巢组织颗粒细胞凋亡率;qRT-PCR、Western blot法检测miR-21靶基因PTEN、PDCD的mRNA及蛋白水平。结果:体外成功构建miR-21慢病毒载体。实验结束时,miR-21组有64%(16/25)大鼠恢复规律动情周期。注射后第15、30、45、60天,miR-21组的E2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率均高于模型组和空载组(P=0.000),FSH水平以及PTEN、PDCD4的mRNA、蛋白表达较相应时间点的模型组和空载组显著下降(P=0.000)。注射后第30、45、60天,miR-21组的卵巢重量显著高于模型组和空载组,但仍低于空白对照组;注射后第45、60天,miR-21组各级卵泡数均多于模型组和空载组(P=0.000);结论:miR-21在化疗诱导卵巢早衰大鼠模型中具有治疗潜能,其具体作用机制可能与下调靶基因PTEN、PDCD4有关。
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