摘要：目的：构建靶向骨桥蛋白（OPN）的shRNA表达载体，通过RNA干扰（RNAi）下调OPN在卵巢癌细胞HO-8910PM中的表达，观察对卵巢癌细胞侵袭能力的影响，探索卵巢癌基因治疗新途径。方法：将人OPN两条shRNA表达序列克隆到pSilencer3．1-H1neo质粒的黏性末端，并对重组质粒进行酶切及序列鉴定。将构建好的重组质粒转染入对数生长期高转移性人卵巢癌细胞株HO．8910PM，Western blot法分析转染后卵巢癌细胞OPN蛋白表达情况，Transwell小室检测细胞的侵袭、迁移情况。结果：OPN—shRNA表达载体克隆构建成功，插入片段测序结果与合成的shRNA结果一致。Westem blot结果显示，卵巢癌细胞HO-8910PM转染OPN．shRNA表达载体后，OPN蛋白表达显著降低（P〈0．05），卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力亦显著降低（P〈0．05）。结论：靶向OPN的shR．NA表达载体构建成功，可抑制高转移性卵巢癌细胞株OPN表达，并降低细胞侵袭、迁移能力，为研究降低卵巢癌OPN表达对发挥抗肿瘤效应打下基础。