摘要：目的：研究冻存后的小鼠成熟卵母细胞复苏后培养不同时间对ICSI结果的影响，观察Ca^2＋载体霉素联合嘌呤霉素对ICSI受精失败的卵母细胞补救激活的有效性。方法：采用慢冻-快融程序化冷冻方法冻融小鼠成熟卵母细胞，复苏后卵母细胞分别培养不同时间（1h、2h、3h、4h、5h）后行ICSI，比较其受精和胚胎发育情况。冻融后受精失败的卵母细胞分为两组（A组：辅助激活，B组：不采取辅助激活），另外获取ICSI受精失败的新鲜卵母细胞（C组）采用和A组同样方法辅助激活，观察3组激活效果。结果：复苏的卵母细胞ICSI前培养3～4h后正常受精率、囊胚形成率明显高于培养1h、2h和5h实验组；A组激活率与B组相比，有明显差异（30．4％VS,6．7％，P〈0．05）；A组激活率和2PN2PB比例明显低于C组（30．4％VS,75．6％，P〈0．05；21．4％VS,47．1％，P〈0．05）；A、C两组之间1PN2PB比例相比无统计学差异。结论：复苏的成熟卵母细胞ICSI前培养3～4h后有助于卵母细胞结构的恢复，提高正常受精率和后期发育潜能。辅助激活在一定程度上可以挽救ICSI受精失败的卵母细胞；由于冻融损伤，复苏后ICSI受精失败的卵母细胞被辅助激活的能力明显下降。