人阴道黏膜干细胞的筛选与培养

作者:翁慧男; 王沂峰; 刘风华

摘要:目的:探讨人阴道黏膜干细胞(vaginal mucosa stem cells,VMSCs)的分离、筛选与适合的体外培养方法。方法:用胰酶、胶原酶混合消化法获得阴道黏膜细胞。以丝裂酶素C处理的小鼠成纤维细胞作滋养层细胞。将20min内黏附于Ⅳ型胶原的阴道黏膜细胞定为VMSCs。对筛选的VMSCs与原代人阴道黏膜细胞分别用碘化丙啶(PI)一步荧光染色法,用流式细胞仪检测其细胞周期。分为4组体外培养原代VMSCs,第1组用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液;第2组滋养层细胞+DMEM/F12(3:1);第3组无滋养层细胞+上皮细胞完全培养液;第4组无滋养层细胞+DMEM/F12(3:1)。培养至12天,比较各组的CK19、CK10阳性细胞的比例、克隆形成率(clony forming efficiency,CFE)与凋亡前传代的次数。结果:筛选的VMSCs与原代人阴道黏膜细胞的Go/G.细胞比例、CK19、CK10细胞阳性比例均有统计学差异(P〈0.05)。用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液培养VMSCs12天的CFE与CK19阳性细胞比例最高,CK10阳性细胞比例最低,体外培养VMSCs能稳定传代15代以上。结论:Ⅳ型胶原快速黏附法可有效地筛选VMSCs。滋养层细胞+上皮细胞完全培养液为体外培养原代VMSCs的较佳方法。

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关键词:
  • 阴道黏膜
  • 干细胞
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期刊名称:现代妇产科进展

期刊级别:北大期刊

期刊人气:7766

杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国教育部
主办单位:山东大学;现代妇产科进展编辑委员会
出版地方:山东
快捷分类:医学
国际刊号:1004-7379
国内刊号:37-1211/R
邮发代号:24-104
创刊时间:1989
发行周期:月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
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综合影响因子:1.98