含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1-E7AS的构建及鉴定
作者：邬素芳; 易诚青; 陈刚; 李辅军; 李静; 卢运萍; 廖国宁; 马丁
摘要：目的:构建含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1-E7AS并鉴定,探讨腺相关病毒介导的反义E7基因技术用于治疗早期宫颈癌的可能性.方法:使用RT-PCR法扩增全长HPV16型E7基因,利用基因重组法将目的片段反向插入腺相关病毒骨架质粒pUF1并酶切鉴定.结果:RT-PCR法扩增全长315bp的HPV16型E7基因,装入pGEM-Teasy载体进行测序,经NCBI数据库blast检索为100%的符合,经基因重组获得含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1-E7AS,AccⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定pUF1-E7AS.结论:含HPV16型反义E7基因的腺相关病毒骨架质粒pUF1-E7AS可成功构建.
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关键词：
- 宫颈肿瘤
- 乳头状瘤病毒
- 人
- 基因疗法
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