摘要:目的:构建内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide synthase traffic inducer,NOSTRIN)基因的真核表达载体,通过质粒转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)获得高表达NOSTRIN基因的细胞克隆.方法:构建真核表达载体pcDNA3.1-NOSTRIN,采用脂质体介导将重组质粒导入体外培养的HUVEC,Western blot 检测转染细胞和未转染细胞中NOSTRIN蛋白质的表达.结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-NOSTRIN,并用脂质体介导的方法获得了高稳定表达NOSTRIN的细胞克隆;Western blot 显示转染前后的细胞均有58kD的蛋白质表达,转染后表达量明显增高.结论:重组质粒pcDNA3.1-NOSTRIN经转染能在HUVEC细胞中高效表达,为进一步研究NOSTRIN对HUVEC的生物学影响奠定了基础.
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