抗人胱抑素C单克隆抗体制备及免疫检测体系建立

作者:余易展; 羊婷婷; 刘培; 王念超; 卢彦; 黄亚红; 沈萍萍

摘要:目的获得人胱抑素C(cystatin C,CysC)重组蛋白,制备亲和力高、特异性强的单克隆抗体,建立检测人血清中CysC的竞争ELISA检测体系。方法根据美国国立生物技术信息中心(NCBI)CysC基因序列优化合成CysC基因片段,并在大肠杆菌中表达得到CysC重组蛋白,免疫Balb/c小鼠后,通过杂交瘤细胞融合技术筛选获得阳性杂交瘤细胞株,制备腹水型单抗并进行纯化,通过间接ELISA法检测抗体的亲和力等性质,建立竞争ELISA检测体系,并对52个血清样本进行检测。结果获得了4株稳定分泌CysC单克隆抗体的细胞株,将抗体Ab3作为检测抗体并进行辣根过氧化物酶标记,其亲和力为4.26×10^6L/mol,检测线性范围为0.011-1.924μg/mL,检测限为4.598 ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.145μg/mL。建立的竞争ELISA血清检测体系能准确检测52个血清样本。结论获得了亲和力、特异性较高的单克隆抗体,建立了可靠的竞争ELISA血清检测体系,为CysC快速免疫检测试剂盒的研制奠定了基础。

分类:
  • 期刊
  • >
  • 自然科学与工程技术
  • >
  • 医药卫生科技
  • >
  • 预防医学与卫生学
收录:
  • CA 化学文摘(美)
  • CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
  • JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
  • Pж(AJ) 文摘杂志(俄)
  • 万方收录(中)
  • 上海图书馆馆藏
  • 北大期刊(中国人文社会科学期刊)
  • 国家图书馆馆藏
  • 知网收录(中)
  • 统计源期刊(中国科技论文优秀期刊)
  • 维普收录(中)
关键词:
  • 人胱抑素c
  • 单克隆抗体
  • 竞争elisa

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

期刊名称:卫生研究

期刊级别:北大期刊

期刊人气:4002

杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国卫生部
主办单位:中国疾病预防控制中心
出版地方:北京
快捷分类:医学
国际刊号:1000-8020
国内刊号:11-2158/R
邮发代号:82-720
创刊时间:1972
发行周期:双月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:0.76
综合影响因子:1.26