摘要:目的建立同时测定小鼠肝脏中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)和S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的高效液相色谱法(HPLC)。方法小鼠肝脏称重,用手持匀浆器快速乳化肝脏,再加4倍体积的0.6 mol/L高氯酸超声,离心取上清液过膜,以50 mmol/L Na H2PO4缓冲液、10 mmol/L庚烷磺酸钠和20%(V/V)甲醇为流动相,选用Venusil MP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱进行色谱分离,流速1.0 ml/min,柱温30℃,UV检测波长254 nm。结果 SAM和SAH在检测范围内浓度与峰面积线性关系良好(r〉0.9990);平均回收率92.20%-101.38%,相对标准偏差(RSD)2.88%-6.78%。SAM和SAH平均日内精密度为4.14%和3.71%,平均日间精密度为7.51%和9.54%。小鼠肝脏中SAM和SAH的含量分别为3.14-6.09 mg/L(31.44-60.98 nmol/g肝湿重)和1.29-3.10 mg/L(13.38-32.17 nmol/g肝湿重)。结论 HPLC适用于小鼠肝脏中SAM和SAH的含量检测,方法简便,结果可靠。
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