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摘要:目的探讨甲醛暴露工人DNA修复基因XRCC1多态性与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法选择某密度板厂的151名甲醛暴露工人(暴露组)和某推土机厂的112名非甲醛暴露工人(对照组)为研究对象。用气相色谱法检测作业环境的甲醛浓度,应用彗星实验测定研究对象外周血淋巴细胞DNA损伤,以Olive尾距和彗星尾长反映DNA损伤水平,用PCR-RFLP方法分析XRCC1基因的多态性;用多元协方差分析调整工人的年龄、工龄、职业甲醛暴露及吸烟与饮烟情况,比较XRCC1基因不同基因型个体的Olive尾距和彗星尾长。结果使用多元协方差分析校正甲醛暴露工人的年龄、工龄、甲醛暴露水平和吸烟与饮酒情况后,携带Arg^280His位点变异基因型个体的Olive尾距和彗星尾长(几何均值分别为4.30和13.42)均显著高于野生型基因型的个体(几何均值分别为3.38和11.71),差异均有显著性(Olive尾距:P〈0.05,彗星尾长:P〈0.01);未发现XRCC1基因其他3个位点的多态性与甲醛暴露工人Olive尾距和彗星尾长有显著关联。结论XRCC1基因Arg^280His位点的多态性影响甲醛暴露工人的DNA损伤水平。
摘要:目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT—PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各组细胞E—cadherin基因mRNA表达差异;荧光细胞免疫化学技术检测E—cadherin、CyclinD1及CyclinE蛋白水平。结果反式-BPDE诱导恶变细胞组出现E—cadherin基因在mRNA和蛋白水平表达缺失,而经叶绿酸抗转化组该基因表达正常。CyclinD1、CyclinE蛋白在正常对照组中表达阴性,而在反式-BPDE恶性转化组中上述两种蛋白呈现高表达,通过叶绿酸干预抗转化组中其表达明显下调。结论叶绿酸抗反式-BPDE致细胞恶变作用与其避免抑癌基因E—cadherin的表达缺失有关。叶绿酸在拮抗反式-BPDE致癌中具有影响细胞周期素CyclinD1和CyclinE表达作用。
摘要:甲基对硫磷(methyl—parathion)属高毒性农药,大鼠急性经口LD50为14~28mg/kg急性经皮LD50为67mg/kg,在农业上应用十分广泛。该农药中毒在临床上较为常见,对于急性重度患者,只用洗胃、输液和解毒剂等常规治疗效果往往不佳,目前常采用血液灌流的方法进行治疗,血液灌流是血液藉助体外循环,引入装有固体吸附剂的容器中,以吸附清除血中毒物的方法。本文对全血中甲基对硫磷的测定方法及灌流吸附毒物清除效率进行了定量研究,建立了一种简便、快速、准确的血中甲基对硫磷的萃取及气相色谱-火焰光度(GC-FPD)测定方法,并测定了中毒血样经实验室灌流吸附的定量清除率。
摘要:目的检测二氯乙酸和三氯乙酸对大鼠p53基因的DNA损伤作用,证实其遗传毒性并探讨其致癌作用的分子机制。方法将二氯乙酸、三氯乙酸腹腔注射染毒SD大鼠,提取肝组织DNA,应用依赖随机化末端连接物PCR技术检测其对大鼠p53基因外显子7的DNA损伤作用。结果在DCA染毒组检测出2条杂交条带,表明DCA可引起大鼠肝组织p53基因外显子7的损伤,有2个位点。未检测到TCA对大鼠p53基因的损伤作用。结论二氯乙酸的致癌作用可能与损伤p53基因有关,RDPCR技术检测靶组织p53基因的损伤作用与大鼠致癌试验的结果有很好的一致性。
摘要:随着城市化规模不断扩大,人口剧增,中国年产垃圾已高达1.5亿吨,每年还要以10%的速度递增,全国城乡都面临着垃圾污染环境问题,特别是有机垃圾是蚊蝇和鼠害孳生场所,传播疾病、危害健康,同时也严重影响市容生活环境。垃圾处理方式主要采用卫生填埋、高温堆肥、焚烧、厌氧消化4种处理方式,每种方式处理都有利弊。而城市生活垃圾厌氧发酵生物处理尚处于试验阶段,未能得到广泛应用。本研究目的探讨利用生物厌氧发酵技术加速有机垃圾分解,提供清洁能源和优质有机肥料,以推动废弃物资源化、减量化和无害化,改善生活环境质量。
摘要:目的通过观察人支气管上皮细胞(BEAS-2B)株释放IL-8、IL-1β、SICAM-1等的变化,探讨PM2.5有机提取物(EOM)对气道上皮细胞的炎性损伤作用;并研究BEAS-2B损伤后释放的炎症因子诱导T淋巴细胞表达CD25,从而可能参与类似于过敏性哮喘的变态反应过程。方法BEAS-2B暴露于3.75、7.5、15μg/mlPM2.5有机提取物,双抗夹心ELISA法检测培养上清液中IL-8、IL-1β、SICAM-1的变化;将BEAS-2B细胞损伤后释放的炎症因子作用于人外周血淋巴细胞,流式细胞仪检测淋巴细胞CD25阳性表达率。结果阴性对照组有少量IL-8、IL-1β、SICAM-1表达,且随着时间延长略有增加;与阴性对照组相比,随着PM2.5有机提取物染毒剂量的增加和作用时间的延长,IL-8、IL-1β、SICAM-1的表达也增高,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论BEAS-2B细胞暴露于PM2.5有机提取物后,释放与气道炎症反应及气道高变应性相关的IL-8、IL-1β、SICAM-1等炎性因子;BEAS-2B细胞损伤后释放的IL-1β等炎性因子能够促进T淋巴细胞表达CD25分子,从而可能参与类似于过敏性哮喘的变态反应过程。
摘要:目的探讨沙尘暴细颗粒物(PM2.5)对大鼠肺、心、肝组织的氧化损伤作用。方法采用气管直接注入染毒法,灌注24h后处死大鼠,测定肺、心、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量及脂质过氧化作用(LPO)水平。结果(1)沙尘暴和正常天气PM2.5均可引起肺、肝脏SOD酶活性的降低,而心脏SOD酶活性无显著性变化。(2)沙尘暴和正常天气PM2.5均可引起肺脏GSH含量降低,使肝脏中GSH含量呈现先升高后降低的非线性变化特征,而心脏GSH含量无显著性变化。(3)沙尘暴和正常天气PM2.5均可引起肺、心、肝脏的LPO水平升高。(4)正常天气PM2.5比沙尘暴PM2.5对各测量指标的影响较大,但统计学上均无显著性差异,但由于沙尘暴PM2.5浓度远高于正常天气PM2.5所以沙尘暴PM2.5产生的效应较大。结论沙尘暴和正常天气PM2.5对大鼠肺、心、肝组织均有不同程度的氧化损伤作用,沙尘暴PM2.5的急剧增高使其毒性作用更为严重。
摘要:目的探讨白细胞介素-1受体拮抗剂基因(IL-1RA)+2018位点突变与中国西南地区汉族人群矽肺易感性的相关性。方法分别选择75名矽肺患者和137名矽尘接触者为研究对象,采集外周静脉血,应用实时荧光定量PCR特异性扩增检测其IL-1RA基因+2018位点突变。结果矽肺组等位基因IL-1RA+2018C的分布频率(28.0%)高于矽尘接触组(15.0%),有统计学差异(P〈0.01);其中工期矽肺患者等位基因C的分布频率(31.8%)显著高于矽尘接触组(P〈0.01),而Ⅱ期和Ⅲ期矽肺患者等位基因C的分布频率(22.6%)虽高于矽尘接触组,但无统计学差异(P〈0.01)。校正了混杂因素后,Logistic回归分析发现,IL-1RA+2018C的携带者发生矽肺的风险大大增高(P〈0.01)。结论IL-1RA基因+2018位点T→C的突变在中国西南地区汉族矽肺发病的遗传因素中起重要作用;IL-1RA可作为研究矽肺易感性的一个候选基因。
摘要:目的应用基因工程技术克隆人肿瘤坏死因子相关凋亡配体分子胞外区(TRAIL)114~281片段的cDNA,构建其原核表达载体,建立原核表达体系。方法采用RT-PCR方法从外周血单个核细胞的总RNA中扩增TRAIL分子的cDNA,克隆入T载体,阳性克隆经过RT-PCR、酶切和测序鉴定。将阳性克隆中TRAIL再亚克隆至原核表达载体pET28a,构建的表达载体用RT-PCR和酶切来验证,IPTG诱导表达。融合表达蛋白复性后,再用层析纯化表达产物。结果电泳显示RT-PCR产物约500bp,与预期值一致。TA克隆RT-PCR和酶切鉴定时的片段大小也为500bp。阳性克隆测序结果与GeneBank报道一致。构建的原核表达载体经RT-PCR和酶切鉴定后用IPTG诱导后,得到大量的融合表达蛋白,此蛋白是以包涵体形式存在的,对表达的蛋白复性和纯化后,电泳显示得到一条约20kD的蛋白条带。结论成功地构建了人肿瘤坏死因子相关凋亡配体分子原核表达载体。
摘要:目的观察不同砷化合物对体外培养的牛主动脉血管内皮细胞(BAEC)的细胞毒性。方法培养的BAEC分别暴露于亚砷酸钠(NaAsO2,iAs^Ⅲ0~50μmol/L)、砷酸钠(Na2HAsO4,iAs^Ⅴ,0~10mmol/L)和甲基亚胂酸(CH3AsO,MMA^Ⅲ,0~2μmol/L)24h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生存率;诱导性偶联质谱分光光度(ICP-MS)法测定细胞内总砷(tAs)含量。结果不同剂量范围内的iAs^Ⅲ、iAs^Ⅴ和MMA^Ⅲ均能够显著降低BAEC的细胞生存率(P〈0.01),且具有剂量.效应关系;iAs^Ⅲ、iAs^Ⅴ和MMA^Ⅲ暴露24h的BAEC细胞的50%生存率(IC50)经计算分别为24.1μmol/L、155.9μmol/L和1.7μmol/L,对BAEC的细胞毒性从大到小依次为:MMA^Ⅲ〉iAs^Ⅲ〉iAs^Ⅴ;相同暴露剂量和时间下,BAEC对MMA^Ⅲ暴露的砷摄取速度明显高于iAs^Ⅲ暴露(P〈0.01)。结论无机砷甲基化的活性中间产物MMA^Ⅲ对BAEC的细胞毒性要明显强于无机砷化合物。
摘要:目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)对糖尿病(DM)大鼠早期肾损伤的影响并探讨其作用机理。方法采用四氧嘧啶耱尿病大鼠模型,灌胃给以GSPE6周后,测定各组大鼠的肾功能指标,肾组织和血清的抗氧化指标及一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性。结果GSPE组大鼠的24h尿蛋白、血清尿素氮、血肌酐、肌酐清除率和肾指数低于DM组,肾组织SOD活性高于DM组,MDA含量低于DM对照组(P〈0.05)。GSPE低剂量组大鼠的肾脏NO含量、血清及肾脏NOS活性低于DM对照组(P〈0.05)。结论GSPE对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制与提高DM大鼠肾脏的抗氧化能力,降低肾脏和血清NO含量、NOS活性有关。
摘要:近年来研究开发出了许多新型纳米铜材料,由于纳米材料的特殊理化性质,预示其毒性规律与常规粒径铜可能有所差异。为此我们观察了纳米铜材料染毒后小鼠一般情况和血清生化指标的变化。
摘要:目的研究建立糖尿病心肌病动物模型的科学、实用的方法。方法应用链脲佐菌素对SD大鼠进行一次性腹腔注射,通过观察大鼠的一般状况、进食量、进水量、尿量、体重的变化,监测血糖、尿糖、心肌酶含量、胰岛素水平、心肌超微结构、心脏大血管内膜情况及心电图情况来评估糖尿病心肌病的发病情况。结果腹腔注射STZ3周后,模型组大鼠出现病态表现,进食量、饮水量、尿量增加,体重下降。血糖值、尿糖值及肌酸激酶、乳酸脱氢酶值均较对照组大鼠升高。胰岛素水平较对照组明显降低,心肌超微结构符合糖尿病心肌病表现,心脏大血管未见纤维斑块和粥样斑块。结论对SD大鼠进行一次性腹腔注射链脲佐菌素(55mg/kg),大鼠于注射后第3周可出现稳定的糖尿病心肌病状态。这是一种可靠且实用性强的糖尿病心肌病动物模型的制备方法。
摘要:目的克隆补锌糖尿病大鼠差异显示的新基因片段并检测其在各组织中的表达分布。方法对前期研究中分离到的与补锌有关的糖尿病大鼠差异显示的基因片段进行克隆、测序,同源性分析,对发现的2条新基因(2#差异显示片段及6#差异显示片段)设计特异性引物,进行RT-PCR检测,以观察新基因在各组大鼠肝脏中的表达变化,并检测新基因在不同组织中的表达情况。结果经克隆、测序、同源性分析.在GenBank中未找到与2#差异显示片段及6#差异显示片段高同源性的序列,确定2#及6#差异显示片段为新的基因片段;2#及6#新基因片段在糖尿病对照组、糖尿病补锌组的表达量均低于正常对照组.糖尿病补锌组的表达量高于糖尿病对照组(P〈0.05);2#新基因片段在大脑及胰腺中表达量较高,在肾脏中表达量较低,在心肌、骨骼肌、胸腺中无表达。6#新基因片段在心肌、骨骼肌、大脑、肾脏、胰腺中均有表达.但在胸腺中无表达;2#及6#新基因片段被GenBank收录,接收号分别为AY952968、AY952970。结论分离并克隆了2条与补锌有关的糖尿病大鼠差异显示的新基因片段,经RT-PCR检测其在各组大鼠肝脏及其它各组织中表达分布后,在GenBank上成功登录。
摘要:目的探讨硒、碘缺乏模型动物对F2代雌性、雄性生殖功能的影响。方法采用自制人工合成饲料,利用SD大鼠建立低硒、低碘及硒碘联合缺乏动物模型,确定动物模型建立成功后,利用该模型进行大鼠的三代繁殖试验及模型稳定性监测。观察F2代模型大鼠精子形态、血清睾酮、睾丸和附睾组织病理及透射电镜超微结构的改变;检测F2代模型孕鼠生育指标、胎仔骨骼及内脏发育指标,探讨硒、碘缺乏对F2代模型动物雌性、雄性生殖功能的影响。结果经各项指标检测,三代繁殖试验中动物模型稳定性良好。通过对雄性F2代模型动物大鼠的精子形态学指标、血清睾酮含量的检测及睾丸、附睾组织病理形态学、超微结构透射电镜观察,低硒、低碘及硒碘联合缺乏均可引起雄性F2代模型动物的生殖功能损伤。通过对雌性F2代模型动物妊娠鼠体重、胚胎发育及其F3代胎仔骨骼、内脏发育的检测,低硒、低碘及硒碘联合缺乏均可引起雌性F2代模型动物生殖功能损伤。结论低硒、低碘及硒碘联合缺乏均可引起F2代模型动物生殖功能损伤。
摘要:以中国南方湖泊中的淡水鱼及其生活环境为研究对象,采用ICP-OES法对主要经济鱼种体内的重金属含量进行了研究,具体研究对象选择了武汉市周边具有代表性的湖泊——南湖、东湖和野芷湖,对湖泊底积物、湖水和主要淡水鱼采用ICP.OES法分别测定锌、铜、铅、铬、镉等重金属元素的含量。分析结果表明:野芷湖和东湖湖水中铜和镉舍量分别为10.0μg/L和5.4μg/L,超过了国家规定的淡水养殖水域的水质标准。三个湖底泥中的镉含量分别为0.95mg/L、1.07mg/L、1.13mg/L,均超过无公害水产品产地环境要求。鱼类不同组织器官对各种重金属积累能力明显不同,主要分布于鳞片、鳃中,其食用部分各种重金属含量均低于人体卫生消费标准。
摘要:目的研究北京市场经常食用的四种淡水鱼的总汞和甲基汞的含量,评价普通人群汞暴露的风险。方法从市场购买4种人们经常食用的代表不同品种的淡水鱼:鲤鱼、草鱼、鳙鱼和黑鱼,取其肌肉、肝脏和鱼鳃,利用超声波辅助溶剂萃取-电感耦合等离子体质谱测定其总汞和甲基汞,样品加入6mol/LHCI超声2h,取部分上清直接稀释测定总汞,另一部分加CH,C12萃取并用水反萃测量甲基汞。通过测定标准参考物质DORM-2和DOLT-3用以评价方法的可靠性。结果按各种鱼肉中总汞和甲基汞平均含量最高值,可排出如下顺序:黑鱼〉鳙鱼〉草鱼〉鲤鱼,表明鱼体中汞的蓄积是与食物链密切相关的。其中甲基汞所占的百分比均值为80%,甲基汞的浓度与总汞的浓度是成正比的。研究了鳙鱼和黑鱼的肝脏和鳃的总汞和甲基汞含量及甲基汞所占的百分比,其中汞的含量是肌肉组织〉肝脏〉鳃.而甲基汞所占总汞的比例为:肌肉组织〉鳃〉肝脏,甲基汞主要蓄积在可食用的肌肉组织中。结论根据我国国家淡水鱼食品卫生标准.北京市场的四种淡水鱼的汞含量均低于国家标准,因此对于人们食用是安全的。
摘要:食品污染由于危害人体健康一直是监督检测的重点,食品中的化学性污染是影响食品安全的最主要原因。为了解北京市海淀区食品卫生质量状况,以加强对食品的生产、销售卫生的监督监测管理,现将2005年海淀区食品污染物监测情况总结如下。