改良分子信标-双重实时荧光PCR快速检测SARS病毒

作者:扈庆华; 刘小立; 庄志雄; 石晓路; 何雅青; 刘建军; 王冰; 刘涛; 张永有; 李庆阁; 赵锦; 何建凡; 杨洪; 房师松; 张丹; 周俊安

摘要:目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒的方法,用于SARS的早期诊断和动物溯源.方法利用改良分子信标技术、装甲RNA和双片段双色荧光技术,根据GenBank公布的SARS病毒聚合酶基因1b的阅读开放框架结构的保守序列,自行设计一对引物和探针,以部分临床标本的酶联吸附实验结果和传统细胞培养方法作为对照,建立分子信标检测SARS病毒的方法.对368份临床标本(咽漱液、血液、粪便、尿液)、52份细胞培养液和50份动物标本进行荧光PCR扩增.结果分子信标检测SARS病毒的方法灵敏度为10~100个拷贝/ml,与流感病毒等呼吸道病毒无交叉反应.分子信标检测368份临床标本,20份阳性.其中确诊病例阳性率为21.27%(10/47),确诊病例的咽漱液阳性率为43.48%,还分别从粪便和血清中检测到SARS病毒.52份细胞培养液,29份阳性,阳性率为55.77%.50份动物标本,23份阳性,阳性率为46%.结论改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒方法灵敏度高、特异性强,可用于SARS的临床早期诊断和动物溯源.

分类:
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关键词:
  • sars病毒
  • 改良分子信标
  • 双重实时荧光pcr早期诊断
  • 动物溯源

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期刊名称:卫生研究

期刊级别:北大期刊

期刊人气:3859

杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国卫生部
主办单位:中国疾病预防控制中心
出版地方:北京
快捷分类:医学
国际刊号:1000-8020
国内刊号:11-2158/R
邮发代号:82-720
创刊时间:1972
发行周期:双月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:0.76
综合影响因子:1.26