环带小薄孔菌发酵液的化学成分研究
摘要：环带小薄孔菌（Antrodiella zonata）发酵液经浓缩、乙酸乙酯萃取后得到浸膏,再用硅胶、RP-18、Sephadex LH-20等材料以及MPLC、HPLC等仪器进行分离纯化,最终利用理化方法和波谱分析进行结构鉴定,从中分离并鉴定了8个化合物,它们分别为薄孔菌素（antrodiellone）（1）、22E-7α-methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8（14）,22-dien-3β-ol（2）、3β,5α-dihydroxy-6β-methoxyergosta-7,22-diene（3）、6-bromo-1H-indole-3-carboxylic acid ethyl ester（4）、6-bromo-1H-indole-3-carboxylic acid（5）、对羟基苯乙醇（6）、5-羟乙基糠醛（7）、环-（亮-缬）二肽（8）。其中1为新化合物,其余化合物均首次从该种真菌中分离得到。滇重楼的psbA-trnH条形码分子鉴定研究
摘要：为探讨滇重楼药材鉴定新方法,本研究通过对重楼样品提取基因组DNA,PCR扩增叶绿体psbA-trnH序列并进行双向测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,采用MEGA5.0软件进行序列比对,计算种内和种间遗传距离（K2P）,构建邻接数（neighbor-joining tree）进行结果分析。研究表明,叶绿体psbA-trnH片段在滇重楼种内变异较小,平均K2P遗传距离为0.007,而滇重楼与其它重楼种间平均K2P遗传距离为0.025,滇重楼种间最大K2P遗传距离明显小于滇重楼与重楼属其它种内的最小K2P遗传距离。中药材DNA条形码鉴定系统比对和NJ树鉴定结果均表明psb A-trn H序列可区分滇重楼及其同属物种,且具有较好的稳定性和准确性,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。重组海蚯蚓纤溶酶的克隆、表达及活性鉴定
摘要：纤溶酶在溶栓治疗中起重要作用,能够溶解血凝块的主要成分纤维蛋白。采用RACE方法从海蚯蚓消化道组织中扩增出海蚯蚓纤溶酶编码序列,构建该基因原核表达载体,并进一步构建工程菌表达融合蛋白,经Ni^2＋树脂柱纯化后通过平板法检测该融合蛋白纤维蛋白酶原激活活性。结果获得海蚯蚓纤溶酶的c DNA序列和氨基酸序列,并成功构建重组表达载体pET-21a-AFE,表达纯化出融合蛋白,该融合蛋白能够激活纤维蛋白酶原而溶解纤维蛋白。总之,本研究获得了海蚯蚓纤溶酶的c DNA序列和氨基酸序列,并初步证明其具有纤维蛋白酶原激活活性,为临床新型溶栓药物的开发提供实验基础。海南不同产区铁皮石斛活性成分的比较研究
摘要：海南是铁皮石斛主产区之一,为研究不同产地铁皮石斛的差异性,本文比较了海南八个产区铁皮石斛的醇提物及水提物的成分,抗氧化性和降血糖活性,并进一步研究该化学成分与对应活性的相关性。结果显示：海南琼中、三亚、保亭地区铁皮石斛提取物在清除DPPH自由基和总还原力模型中表现出较高的抗氧化性,儋州产区铁皮石斛水提物表现出最高的α-淀粉酶抑制活性。相关性研究表明酸性糖、总多酚、总黄酮含量与上述抗氧化模型有一定的线性关系,醇提物中总多酚表现出相对最高的相关性（r=0.904,P〈0.01;r=0.861;P〈0.01）。本研究为铁皮石斛在保健食品、药品领域中的开发提供一定的借鉴。微波处理对米糠蛋白结构及功能性的影响
摘要：本研究对微波处理下米糠蛋白的结构及功能性变化进行研究,结果表明：随着微波强度增大,α-螺旋和β-转角结构含量先降低后增加,无规卷曲结构含量呈相反变化,而β-折叠结构含量总体降低;反式-扭曲-反式和扭曲-扭曲-扭曲模式含量先增大后降低,扭曲-扭曲-反式振动模式含量先减少后增加。微波处理对酪氨酸的分布状态影响较弱,而色氨酸低微波功率处理下呈＂暴露态＂,高微波功率处理下呈＂包埋态＂。微波处理后米糠蛋白的溶解性、乳化性、起泡性均有所增大,但在高功率呈降低趋势。刺囊酸对于氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮祖细胞损伤的保护作用及机制
摘要：血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）是一种具有分化为内皮细胞能力的前体细胞,对于维持血管内皮完整性和血管生成具有极其重要的作用。高血脂状态下的氧化型低密度脂蛋白（ox LDL）增加严重影响EPCs的作用与功能,这也是高血脂诱发动脉粥样硬化（AS）的机制之一。在此之前的体内研究表明,从皂荚中提取的刺囊酸（echinocystic acid,EA）有较好的抗粥样硬化作用,但具体机制尚未得到阐述。鉴于EPCs在AS发病过程中的重要性,本论文研究了EA对于EPCs的保护作用。本研究采用ox LDL造成体外培养分化的EPCs数量和功能损伤,给药组经不同剂量的EA处理,通过TUNEL、Transwell小室等手段观察凋亡、粘附、迁移、一氧化氮（NO）释放等数量与功能指标。通过设置药理抑制组和Western blot考察了EA对于PI3K/Akt/e NOS通路的作用。结果显示ox LDL明显增加EPCs的凋亡,TUNEL阳性率为35.2%,为正常组的5.5倍;ox LDL还抑制了EPCs的粘附（200倍视野下从正常的24个减少到14个）,使细胞迁移率从11%降至6.6%、NO的合成从18.37μM降到7.97μM;ox LDL抑制e NOS的表达和Akt及e NOS的磷酸化,抑制率均在50%以上。高剂量的EA显著改善了上述结果,TUNEL阳性率为14.7%、EPCs的粘附恢复为20个、细胞迁移率为10.2%、NO的合成为19.28μM,EA虽然对e NOS的表达没有影响,但却显著激活了e NOS（p-e NOS/e NOS为1.33,模型组为0.82）,并将ox LDL抑制的Akt磷酸化恢复至正常的76%。另外,PI3K抑制剂能部分抵消EA的作用。结果表明刺囊酸对于ox LDL诱导的EPCs的损伤具有保护作用,机制为直接增加Akt和e NOS的磷酸化。白皮杉醇苷在大鼠体内外的葡萄糖醛酸结合代谢研究
摘要：白皮杉醇苷（PG）是藏边大黄中一种天然抗氧化剂,前期研究发现其极易发生代谢。本文主要研究PG在大鼠体内外的葡萄糖醛酸结合代谢特征。SD大鼠经尾静脉注射给予PG（20 mg/kg）,采集给药后胆汁样品,采用LC-MS对主要代谢产物进行结构推测。在此基础上,研究大鼠肝微粒体体外温孵体系中PG的葡萄糖醛酸结合代谢,并测定酶促反应动力学参数。实验结果显示SD大鼠经尾静脉注射给予PG,可在胆汁中快速检测到多种PG及其衍生物的葡萄糖醛酸结合代谢产物。在大鼠肝微粒体体外温孵体系中,PG代谢生成两个与体内一致的单葡萄糖醛酸结合代谢物,其葡萄糖醛酸结合代谢的最大反应速率（Vmax）、米氏常数（Km）和肝内清除率CLint（Vmax/Km）分别为10.11 nmol/（min·mg）、0.36 mmol/L和0.028 m L/（min·mg）。PG经静脉途径进入大鼠体内可经肝脏被快速地广泛代谢,葡萄糖醛酸结合代谢是其体内消除的主要途径之一。大鼠肝脏的葡萄糖醛酸转移酶对PG有较强的亲和力,可催化PG发生快速的葡萄糖醛酸结合代谢。白木香内生真菌Botryosphae riarhodina A13固体发酵产物的分离鉴定
摘要：运用硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱、HPLC和薄层制备等色谱技术及重结晶从白木香内生真菌Botryosphaeria rhodina A13的固体发酵产物中分离纯化了10个化学成分,通过化合物波谱数据及理化性质鉴定它们的结构分别为豆甾-4-烯-3-酮（1）、豆甾-5-烯-3β-醇-7-酮（2）、豆甾-4-烯-3,6-二酮（3）、（22E,24S）-5α,6α-环氧基-24-甲基胆甾-8（14）,22-二烯-3β,7α-二醇（4）、5,4＇-二羟-7-甲氧基黄酮（5）、香草酸（6）、对甲氧基苯甲酸（7）、尿嘧啶（8）、2-甲氧基对苯二酚（9）、2-甲基-3,5-羟基色酮（10）。其中化合物1～10均为首次从该属真菌中分离得到,化合物4具有细胞毒活性。山豆根和苦参生物碱类成分UPLC/Q-TOF MS^E比较研究
摘要：使用UPLC/Q-TOF MS^E对山豆根和苦参的生物碱类成分进行详细的比较研究。色谱柱：Acquity UPLC BEH C18（2.1 mm×150 mm,1.7μm）;流动相：乙腈-5 mmol/L甲酸铵水溶液;流速为0.5 m L/min;检测器：四极杆串联飞行时间质谱（Q-TOF）,正离子检测模式。根据离子流色谱图中色谱峰的分子量及其二级质谱碎片离子的裂解规律,结合参考文献进行结构推定;利用主成分分析及正交偏最小二乘法进行聚类分析。结果从山豆根总生物碱中鉴定12个主要成分,从苦参生物碱中鉴定了11个主要成分,其中有10个是相同的结构,但相同成分在两种药材中的含量差异很大;聚类分析表明山豆根和苦参具有显著的差异。本研究表明山豆根和苦参的主要生物碱成分虽然结构相同,但含量差异很大,二者临床疗效差异,可能由于生物碱含量的差异,或生物碱以外的其他成分所引起。鸡血藤中黄酮类化合物与环氧合酶-2对接研究
摘要：探索黄酮类化合物抗环氧合酶-2的分子机理,筛选鸡血藤中选择性抗环氧合酶-2的黄酮类化合物。本研究应用Autodock 4.2软件对环氧合酶和环氧合酶抑制剂进行分子对接研究,建立阳性抑制剂结合自由能与抑制活性关系模型,并筛选鸡血藤中选择性抗环氧合酶-2的黄酮类化合物。阳性抑制剂与环氧合酶的对接模型R2分别为0.96997和0.84171,建立了预测能力较好的对接模型,可用于指导环氧合酶抑制剂的筛选。筛选结果表明,3＇,4＇,7-三羟基黄酮、儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素具有较强的环氧合酶-2选择性抑制活性,可作为母体用于新型抗炎药物设计。野马追的化学成分及其解热作用研究
摘要：从野马追（Eupatorium lindleyanum DC.）中分离得到6个化合物,通过波谱数据分析,分别鉴定为：香草酸（1）、正二十八烷酸（2）、β-谷甾醇（3）、胡萝卜苷（4）、蒙花苷（5）、5,8,4＇-三羟基-7,3＇-二甲氧基黄酮（6）,其中化合物2、5和6为首次从该植物中分离得到。采用UPLC/Q-TOF-MS法,分析野马追乙醇提取物的化学成分,并考察野马追对LPS诱导的大鼠发热模型的解热作用及其机制。腹腔注射脂多糖（100μg/kg）法建立大鼠发热模型,记录灌胃给药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、7、8 h大鼠的体温变化,绘制体温曲线;测定8 h大鼠肝组织髓过氧化酶活性和血清中肿瘤坏死因子-α和白介素-6含量。研究发现模型组大鼠体温呈明显三相热变化趋势,在造模后4 h出现升温峰值（1.97℃）,8 h后体温恢复正常;野马追醇提物显著地降低了大鼠体温峰值;同时有效地抑制了肝组织中髓过氧化酶活性,降低了血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-6含量。五倍子有效组分的分离纯化及抗弧菌活性分析
摘要：中药五倍子是一种具有高药用价值的漆树科植物的寄生虫瘿。本研究利用高速逆流色谱技术分离得到五倍子的7种组分,分离溶剂体系为：乙酸乙酯-乙醇-水（5∶1∶5,v/v/v）。利用微量热仪测定五倍子各分离组分对弧菌G1-1的抑制曲线,通过细菌生长速率常数和药物浓度之间的关系拟合公式,计算出各组分对菌株G1-1的最低抑菌浓度。结果表明,五倍子各分离组分均对菌株G1-1具有一定抑制作用,其中组分P5对弧菌G1-1的抑制效果最佳,最低抑菌浓度为0.10 mg/m L。该研究建立了一种分离制备中药材有效组分和筛选评价其生物活性的方法,为中药有效组分应用于防控水产动物细菌性疾病提供理论依据及参考。亳芍总生物碱提取及抑菌活性的研究
摘要：为了探讨亳芍总生物碱提取条件及其抑菌活性,在前期研究基础上,通过单因素和正交实验对亳芍总生物碱的提取条件进行了研究。采用滤纸片法对亳芍总生物碱提取物对大肠杆菌、金色葡萄球菌酵母菌及黑曲霉菌的体外抑菌活性进行初步测定。结果表明,亳芍总生物碱最佳提取条件为：乙醇浓度为60%,提取时间为3 h,提取温度为60℃,料液比为1∶20。此条件下,测得亳芍总生物碱的含量为0.58‰,提取的总生物碱对大肠杆菌、金色葡萄球菌及酵母菌、黑曲霉菌均有抑制作用,但抑菌效果不同,抑菌作用顺序为：金色葡萄球〉酵母菌〉黑曲霉菌菌〉大肠杆菌。ICP-OES法测定两种喉毛花植物中21种矿质元素
摘要：本文采用ICP-OES法,测定分析了长梗喉毛花和镰萼喉毛花中的21种矿质元素。所采用方法线性关系良好,r≥0.9990,各元素的检出限均低于0.0036 mg/L,建立了测定喉毛花中多种矿质元素含量的分析方法。结果表明,两种喉毛花中Ca、Mg、Fe三种元素的含量均较高。在检出的人体所需常量和微量元素中,除Se元素外,其他常量、微量元素在长梗喉毛花中含量均高于在镰萼喉毛花中的含量。Pb、As两种重金属元素在镰萼喉毛花中的均含量高于在长梗喉毛花中的含量,Cu则反之。河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量比较
摘要：测定河南和山西连翘叶中总木脂素、连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷含量。采用分光光度法测定连翘叶中总木脂素含量,结果显示山西连翘叶高于河南连翘叶总木脂素含量。采用高效液相色谱法（HPLC）测定连翘叶中连翘酯苷A、连翘酯苷B和连翘苷的含量。连翘酯苷A平均回收率为99.6%,RSD为1.23%;连翘酯苷B平均回收率为101.3%,RSD为1.74%;连翘苷平均回收率为102.3%,RSD为2.58%;连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量较高,并且不同产地连翘叶中连翘苷含量差异较大;另外对于富含连翘酯苷和连翘苷的连翘叶能否代替果实或者与果实合并用药有待于进一步研究。近红外漫反射光谱法快速测定当归中阿魏酸及亚油酸
摘要：以反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定的当归中阿魏酸及亚油酸含量作为参考值,利用TQ Analyst 8.0软件的偏最小二乘法（PLS）建立了快速、准确测定当归中阿魏酸及亚油酸含量的定量模型。结果表明,阿魏酸校正集的相关系数（R）为0.9721,校正均方差（RMSEC）为0.5942,预测均方差（RMSEP）为0.6747。亚油酸校正集的相关系数为0.9673,校正均方差为0.4573,预测均方差为1.0682。验证集中阿魏酸及亚油酸的平均预测回收率分别为101.98%和102.03%。该方法操作简单、快速,所建模型预测结果准确、可靠,可用于中药当归中阿魏酸及亚油酸的含量测定。聚酰胺色谱结合高速逆流色谱分离制备萹蓄黄酮类化合物
摘要：采用聚酰胺色谱结合高速逆流色谱法分离纯化了萹蓄中3种黄酮类化合物,建立了快速分离制备萹蓄中3种黄酮类化合物的方法。通过聚酰胺柱色谱富集黄酮类成分,再经过高速逆流色谱分离,以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸（体积比为4∶1∶5∶0.1）组成的二相系统作为固定相与流动相,在主机转速为850 rpm,流速为2.0m L/min,检测波长为254 nm的条件下制备样品。从150 mg富集黄酮成分的馏分中,一次性分离制备得到纯度为94.86%的杨梅树皮苷（myricitrin）7.5 mg,94.28%的黄芪苷（astragalin）13.8 mg,91.86%的合欢草素1（desmanthin-1）20.6 mg。所得馏分经高效液相色谱法（HPLC）检测纯度,并经MS和NMR鉴定化合物的结构。该方法简便、快速,所得产物纯度高,适合于黄酮类化合物的制备分离。慈竹竹叶抗氧化活性成分的提取工艺研究
摘要：慈竹资源丰富,慈竹叶提取物为天然无毒的植物抗氧化剂。为有效地开发和利用慈竹叶资源,研究了慈竹叶抗氧化活性成分的提取工艺。通过单因素试验考察了提取溶剂乙醇浓度、样品粒度、提取方式、提取时间、料液比、提取温度、提取次数7个因素对慈竹竹叶抗氧化活性成分得率的影响。基于单因素试验结果,进一步运用L9（34）正交设计试验优化慈竹竹叶抗氧化活性成分的提取条件,并确定最佳提取工艺：20～28目竹叶粉末,70℃下,料液比为1∶10（g/m L）,以60%乙醇静置提取1.5 h。验证试验确定此工艺稳定可行,可从1 g竹叶粉末中提取得到7.44 mg抗氧化活性成分。含量测定结果表明1 g竹叶粉末中含有总酚4.73 mg,总黄酮5.52mg。
