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实用医学 2017年第16期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

老年胃食管反流病的治疗进展2609-2612

摘要：胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease,GERD）是指胃内容物反流进入食管而引起一系列相关的症状,典型的症状有反酸、烧心,在传统的内镜检查有或者没有食管黏膜的损伤。

基质金属蛋白酶、金属蛋白酶抑制剂基因多态性及单核苷酸多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性2612-2615

摘要：慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）主要病理生理特征是慢性气道炎症和气道重塑。其致病机制是基质金属蛋白酶（MMPs、ADAMs）与金属蛋白酶抑制剂（TIMPs,α-2M）的失衡,目前研究以MMPs/TIMPs失衡为主。

实用医学杂志基础研究

PM2.5暴露对肺癌细胞A549自噬和凋亡的影响2616-2619

摘要：目的研究PM2.5暴露对人肺癌细胞A549的自噬影响探讨自噬与凋亡的关联效应。方法 100μg/mL PM2.5分别处理A549细胞0、2、4、12、24 h,采用免疫荧光观察处理PM2.5 24 h对细胞自噬的影响,免疫印迹法检测PM2.5对肺癌细胞自噬和凋亡重要基因的表达的影响,运用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）处理细胞进一步明确自噬通路对细胞凋亡的作用。结果细胞自噬标志物LC3-Ⅱ蛋白表达均明显著增强,LC3-Ⅱ/LC3-I比值升高,而凋亡蛋白Bax逐渐下调（均P〈0.05）;免疫荧光显示,PM2.5组细胞的绿色荧光增强;但运用细胞自噬抑制剂（3-MA）会抑制LC3Ⅱ/LC3I的转化,促进Bax的表达。结论PM2.5可诱导肺癌细胞保护性自噬的发生,抑制自噬能够促进PM2.5对肺癌细胞的凋亡诱导。

请选用规范医学名词2619-2619

摘要：自1985年正式成立了全国自然科学名词审定委员会后,先后公布了多批医学名词,但不少作者在来稿中仍采用已淘汰的旧名。请作者在投稿时注意选用正名。

RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因预测2620-2625

摘要：目的探讨RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因。方法利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立多批次RYBP基因稳定沉默的HL60细胞株及空载体对照组（NC）;通过二代测序技术对不同批次干扰的上述3对细胞进行mRNA测序及miRNA测序,利用KEGG等生物信息学分析方法 ,预测靶基因。结果成功构建RYBP稳定沉默的HL60细胞株。二代测序筛选出明显差异的mRNA及miRNA（P〈0.05）。Pathway显著性富集分析发现表达下调的基因与氨基酸合成,癌症转录调节紊乱,氨基酸代谢等相关的KEGG pathway有关,详见后述;沉默RYBP后,SPI1与hsa-miR-214-3p均表达降低（P〈0.05）。结论RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因可能为：BBC3、BAI1、SESN2、CCNG2、JAK3、STAT4、SPI1、BCL6、CD11b和hsa-miR-214-3p。

miR-96-5p上调抑制肺腺癌细胞A549的增殖2625-2628

摘要：目的探讨miR-96-5p上调对A549增殖的影响。方法 miR-96-5p干扰和高表达载体、shR-NA-mTOR分别转染二甲双胍干预和未干预的A549后,观察细胞增殖和p21、cyclin D1、p-4E-BP、p-S6K的表达,萤光素酶试验鉴定miR-96-5p的靶点mTOR。结果上调miR-96-5p可单独通过mTOR/p-4E-BP/p-S6K通路或协同二甲双胍抑制A549增殖。上调miR-96-5p可增加p21、降低cyclin D1表达,这可能与miR-96诱导的G1期阻滞有关。mTOR野生型3′UTR组萤光比值显著低于空白对照组和突变型组。结论miR-96-5p通过靶向mTOR抑制A549增殖。

超声微泡介导质粒转染对人肝癌HepG2细胞迁移、侵袭及克隆能力的影响2629-2633

摘要：目的探讨超声微泡造影剂介导miRNA质粒转染人肝癌HepG2细胞后迁移、侵袭及克隆能力的改变。方法在前期实验所筛选的最佳超声微泡转染条件下,转染目的基因反义miR-21/221、miR-199a进入人肝癌HepG2细胞,划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆能力。结果转染目的质粒后,细胞的迁移、侵袭能力及克隆能力与对照组比较均显著受到抑制（P〈0.05）,其中以miR-199a质粒组的抑制效果最佳（相对细胞迁移率31.05%;平均视野侵袭细胞数38.67±4.51;克隆数105.67±5.86）,与其它目的质粒组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论通过分析miRNAs对人肝癌HepG2细胞部分细胞功能的影响,为肝癌的基因治疗提供新的靶点及思路。

KMT5A对肝细胞癌迁移侵袭的影响及分子机制研究2634-2638

摘要：目的探讨赖氨酸甲基转移酶5A（lysine methyltransferase 5A,KMT5A）对肝细胞癌（hepato-cellular carcinoma,HCC）迁移及侵袭的影响及潜在分子调控机制。方法免疫组化染色检测60例HCC及癌旁组织中KMT5A的表达情况。siRNA沉默SMMC-7721细胞内KMT5A的表达后分别采用划痕愈合试验及Transwell小室研究细胞迁移及侵袭能力的变化,蛋白质免疫印迹检测细胞内MMP-2蛋白的表达变化。采用miR-186模拟物转染SMMC-7721细胞,qRT-PCR检测过表达miR-186后细胞内KMT5AmRNA的表达变化。结果 HCC组织内高表达的KMT5A蛋白（P=0.038）与肿瘤直径增大（〉5 cm,P=0.047）及较晚的TNM分期（Ⅲ＋Ⅳ期,P=0.035）相关;沉默KMT5A表达能通过下调MMP-2表达水平而显著抑制肝癌细胞迁移（P=0.031）及侵袭（P=0.010）能力。过表达miR-186能够显著降低肝癌细胞内KMT5A mRNA的表达水平（P=0.007）。结论肝癌中异常高表达的KMT5A与肝癌不良临床病理特征相关。沉默SMMC-7721细胞内KMT5A表达能够显著抑制肝癌细胞迁移和侵袭。

实用医学杂志实验研究

大鼠心肾联合移植模型的建立2639-2642

摘要：目的探讨大鼠心肾联合移植模型手术方法。方法心肾联合移植组雄性近交系Lewis大鼠做为肾移植的供、受者,原位灌注取左肾及心脏,肾动脉重建用套袖吻合法,肾静脉用内撑法间断吻合,左肾原位移植后将供体心脏主动脉和肺动脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉端侧吻合,受体右肾立即切除,以Lewis大鼠右肾切除为对照组。结果心肾热缺血时间10 s,供体取肾时间（30.0±3.0）min,供心摘取时间（6.0±1.8）min,冷缺血时间肾脏（40±3.2）min、心脏（70±4.1）min,受体手术时间（95±5.4）min,实施移植手术21例。手术成功率为80.9%,术后30 d肾功能及心率与对照组比较差异无统计学意义。结论建立大鼠心肾联合移植模型稳定可靠,可作为心肾联合移植的理想模型,可应用于多脏器移植免疫的基础研究。

普罗布考减轻氧糖剥夺/复氧小鼠睾丸支持细胞损伤2642-2645

摘要：目的探讨普罗布考对睾丸支持细胞氧糖剥夺/复氧（OGD/R）损伤的影响及机制。方法以原代小鼠支持细胞氧糖剥夺2 h复氧3 h为模型。普罗布考浓度分别为5、10、20μmol/L,复氧同时给药至培养结束。用试剂盒检测细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平,用试剂盒检测细胞内丙二醛（malondialdehyde,MDA）、铁离子、谷胱甘肽（glutathione,GSH）的含量和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione-dependent peroxidase,GPXs）的活性。结果 Ferroptosis抑制剂可以抑制细胞死亡（P〈0.01）;普罗布考可降低细胞死亡率（P〈0.01）,且呈时间与剂量依赖性;普罗布考可以降低细胞内ROS、MDA和铁含量并提高GSH含量和GPXs活性（P〈0.05）。结论普罗布考可能通过抑制脂质过氧化介导的ferroptosis发挥对支持细胞损伤的保护作用。

内质网应激预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后听皮层损伤的保护作用2646-2649

摘要：目的探讨2-脱氧葡萄糖诱导内质网应激（ERS）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后听力损伤的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、ERS预处理组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,脑缺血60 min,再灌注24 h。行神经功能评分,测定脑梗死体积,检测听性脑干反应,HE染色法观察听皮层神经元病理变化,末端标记法观察神经细胞凋亡状况。免疫组化法测定GRP78、Caspase-12蛋白表达。结果与Sham组比较,I/R组神经功能缺失评分升高,脑梗死体积增加,ABR反应阈值明显增加,HE染色正常组织结构消失,凋亡指数显著增加,GRP78、Caspase-12蛋白表达明显上升。与I/R组比较,ERS预处理组各项指标均有不同程度的改善。结论 ERS预处理可以减轻缺血再灌注损伤及细胞凋亡,减轻听力损伤。

石菖蒲对慢性应激小鼠记忆的影响及其机制2650-2652

摘要：目的建立慢性应激小鼠模型,观察石菖蒲对慢性应激小鼠记忆的调节作用,并初步探讨其作用机制。方法以慢性束缚方法制备慢性应激KM小鼠模型,石菖蒲提取物4.5 g（/kg·d）灌胃给药28 d,观察KM小鼠一般状态和体重变化,Morris水迷宫测试其空间学习记忆能力,并检测小鼠血清糖皮质激素水平。结果与空白对照组比较,慢性应激组小鼠体重明显减轻。水迷宫测试结果显示,模型小鼠逃避潜伏期明显延长,平台穿越次数明显下降,同时血清糖皮质激素水平明显升高。石菖蒲干预后,小鼠的平均潜伏期和测试平台穿越次数均有明显改善,其血清糖皮质激素水平也显著下降。结论石菖蒲具有改善慢性应激小鼠记忆的作用,其机制与降低血清糖皮质激素水平有关。

蒲黄总黄酮含药血清对巨噬细胞自体吞噬及Akt/mTOR信号通路的影响2653-2657

摘要：目的研究蒲黄总黄酮（TYTF）含药血清对巨噬细胞自体吞噬的作用及其对Akt/mTOR信号通路的影响。方法采用高、中、低剂量TYTF水溶液灌胃干预SD大鼠,制备含药血清,采用MMT法观察含药血清对细胞增殖的影响,选择浓度为20%的含药血清与巨噬细胞共培养,透射电镜下观察巨噬细胞自噬体的变化,检测白介素-10（IL-10）和干扰素γ（IFN-γ）及自噬相关基因Akt和mTOR mRNA和蛋白的表达。结果 TYTF含药血清在10%~40%的浓度范围内的OD值与正常对照组的OD值比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。在透射电镜下观察,TYTF各剂量组中的自噬体的表达均明显增加,而正常对照组自噬体表达不典型。TYTF各剂量组含药血清Beclin1蛋白表达均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而p-Akt及p-mTOR蛋白表达显著低于正常对照组（P〈0.05）,Akt及mTOR蛋白表达与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。TYTF各剂量组含药血清Beclin1 mRNA表达均显著高于正常对照组（P〈0.05）,而Akt及mTOR mRNA表达显著低于正常对照组（P〈0.05）。TYTF各剂量组含药血清IL-10的表达显著高于正常对照组（P〈0.05）,而IFN-γ的表达显著低于正常对照组（P〈0.05）。结论 TYTF含药血清具有抗动脉粥样硬化的作用,可能抑制Akt/mTOR信号通路的激活,从而诱导巨噬细胞的自噬活动,减少斑块内巨噬细胞的浸润,并通过抑制炎症反应因子的分泌,抑制炎症反应活动,进而达到促进动脉粥样硬化易损斑块稳定性的目的 。

钙结合蛋白S100A9在类风湿关节炎患者血清中的表达及意义2658-2661

摘要：目的检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者血清中S100A9水平,探讨其在RA中的作用及与疾病活动度的关系。方法收集59例不同疾病活动度的RA患者及20例健康志愿者血清。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测RA患者及健康对照者血清中S100A9水平,分析其与临床及实验室指标相关性。结果 RA患者S100A9水平显著高于健康志愿者（P=0.041 9）。按DAS28评分分为轻、中和重度活动组RA,重度活动组RA S100A9水平显著高于中度（P=0.039 2）、轻度活动组RA患者（P=0.001 3）。相关性分析显示RA患者S100A9水平与DAS28、RF水平、关节肿胀及压痛数呈正相关（P〈0.01）。结论 RA患者血清S100A9水平显著增高,与疾病活动度密切相关。血清S100A9水平可以作为评估RA疾病活动度标记物之一。

红外热疗预防深二度烧伤创面铜绿假单胞菌感染的疗效2661-2665

摘要：目的观察红外热疗对于预防深二度烧伤创面铜绿假单胞菌感染的临床疗效。方法选取2015年1月至2016年10月笔者单位烧伤科收治的43例以深二度创面为主的烧伤住院患者,随机将患者分配至磺胺嘧啶银联合创面红外热疗组（简称试验组）及磺胺嘧啶银组（简称对照组）。在治疗前和治疗后第3、7、14、21、28天,行创面分泌物评分、铜绿假单胞菌培养、创面愈合率、创面愈合时间及创面总体评价等指标,同时观察不良反应,最后对数据进行统计分析。结果 （1）两组患者在年龄、性别、烧伤总面积等方面比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。（2）治疗第3、7、14天试验创面分泌物评分分别为（2.3±0.6、1.7±0.5、1.0±0.6）,明显低于常规治疗组（2.8±0.4、2.1±0.7、1.7±0.7）（均P〈0.05）;治疗前及治疗第21、28天,两组患者创面分泌物评分相近。（3）两组绿脓杆菌检出率在治疗第7、14、21天试验组铜绿假单胞菌阳性率分别为（8/22、6/22、0/22）,明显低于对照组（18/21、15/21、4/21）（均P〈0.05）。（4）治疗后第7、14、21天,试验组创面愈合率分别为[（39.2±11.1）%、（71.3±22.0）%、（94.6±7.3）%],高于对照组[（22.9±13.1）%、（54.8±19.9）%、（87.6±9.8）%],各组间比较差异有统计学意义（均P〈0.05）;试验组患者创面愈合时间[（21.1±6.5）d]明显短于对照组[（26.2±6.5）d,P〈0.05]。（5）治疗后第14和21天试验组治疗总体评价优于对照组（均P〈0.05）。结论创面红外热疗通过减少深二度烧伤创面分泌物,从而有效控制铜绿假单胞菌定植感染,进而有助于创面愈合,达到一定缩短愈合时间的作用。

血清外泌体miR-21在肺癌中的表达水平及其诊断效能2666-2669

摘要：目的探索外泌体miR-21在肺癌患者血清中的表达水平及诊断效能。方法收集南方医院肺癌患者94例,肺结核患者29例,健康对照26例。纯化鉴定血清外泌体,提取miRNA,进行RT-PCR,比较各组间miR-21表达水平。利用ROC曲线评价外泌体miR-21诊断效能。结果纯化样品具备已有报道的外泌体的典型特征。外泌体miR-21表达水平在肺癌、肺结核、健康对照3组间存在显著性差异;外泌体miR-21在肺癌组中显著升高,肺结核组显著降低。肺癌组中,早、晚期肺癌患者外泌体miR-21与健康对照间均存在显著性差异。外泌体miR-21的ROC曲线的曲线下面积为0.702,且具有较好的特异性。结论血清外泌体miR-21具有较高的诊断效能,有望作为诊断标志物,辅助肺癌临床诊断。

氯胺酮麻醉的改良性电抽搐治疗对抑郁症患者心血管系统及认知功能的影响2670-2673

摘要：目的对抑郁症患者进行多参数无抽搐电休克治疗（MECT）时,比较氯胺酮与异丙酚麻醉对患者心血管系统及认知功能的影响。方法将纳入研究的抑郁症患者随机分为观察组和对照组,每组各30例,进行MECT治疗时观察组接受氯胺酮麻醉,对照组则接受异丙酚麻醉。在MECT治疗前后对患者的平均动脉压（MAP）进行监测,并在治疗前及治疗8次末使用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评定患者的疗效,以及使用威斯康星卡片（WCST）评定患者的认知功能。结果两组患者在MECT治疗前后的MAP比较差异无统计学意义（P〉0.05）,两组患者的HAMD分值在治疗后均有所下降（P〈0.05）,在WCST总错误数与随机错误数方面差异无统计学意义（P〉0.05）,其中氯胺酮组在WCST完成分类数方面较异丙酚组好（P〈0.05）。结论在MECT中使用氯胺酮作为麻醉剂对患者的心血管系统影响较少,认知功能损害较轻,可推荐为MECT治疗抑郁症的麻醉药。

彩色多普勒超声及Ki-67表达对乳腺癌新辅助化疗疗效评价的应用价值2674-2677

摘要：目的探讨彩色多普勒超声与Ki-67在乳腺癌新辅助化疗（NAC）疗效评价中的应用价值。方法利用彩色多普勒超声观察122例NAC前后病灶的超声声像图变化,应用RECIST标准对化疗疗效进行评价,并观察化疗前后Ki-67的变化。结果乳腺癌病灶在化疗前后的大小及内部血流信号变化差异具有显著性（P〈0.05）。彩色多普勒超声检查评价NAC疗效的敏感度为89.3%,特异度为53.8%。Ki-67高表达组的NAC的临床有效率高于Ki-67低表达组。结论彩色多普勒超声在NAC疗效评价上具有较高的临床价值,Ki-67表达可预测NAC的疗效。