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实用医学 2017年第13期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

急性早幼粒细胞白血病的治疗进展2073-2075

摘要：急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）是一种具有特殊细胞遗传学特征的造血系统恶性肿瘤，有特殊的分子生物学与临床特征。特异性染色体t（15；17）（q22；q11-12）间的易位成为该种疾病的细胞遗传学特征。这样就形成了白血病基因（PML）和维甲酸受体基因（RARA）的融合，PML-RARA融合基因不但阻断了早幼粒白血病细胞的分化成熟，这种基因还是全反式维甲酸（ATRA）与砷剂靶向治疗APL的靶点。

非酒精性脂肪性肝病治疗进展2075-2078

摘要：非酒精性脂肪肝病（nonaleoholic fatty liver disease．NAFLD）全球发病率逐年增加，是慢性肝脏疾病的最常见原因，西方国家总人口的20％～30％患有NAFLD，我国的上海、广州和香港等发达地区成人NAFLD患病率也高达15％左右。NAFLD包括单纯性非酒精性脂肪肝（1qon—alcoholicfattyliver，NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（nonalco—holic steatohepatitis，NASH）和酒精性肝硬化。

实用医学杂志基础研究

类泛素缀和酶9在肝纤维化中的作用及机制2079-2082

摘要：目的研究类泛素缀和酶9（UBC9）在肝星状细胞的激活及肝纤维化中的作用机制。方法通过蛋白印记法（Western blot）检测UBC9在不同浓度的转化生长因子-β1（TGF-β1）刺激下的肝星状细胞LX-2中的表达情况；构建UBC9质粒干扰片段（UBC9-shRNA），采用脂质体介导转染LX-2，同时设置无义序列组和空白对照组，实时荧光定量PCR检测转染后UBC9mRNA的表达；Western blot检测UBC9在蛋白水平的表达；Western blot检测下调UBC9对α-SMA、CollagenI及磷酸化的Smad3表达的影响。CCK8检测转染后细胞增殖能力。结果UBC9在TGF—β1因子刺激下的肝星状细胞LX-2表达增加，一定剂量下呈浓度依赖性。转染干扰片段UBC9-shRNA后，激活的LX-2细胞增殖减弱，α—SMA和CollagenI蛋白的表达减少，而且下调UBC9也能抑制磷酸化的Smad3的表达。结论下调UBC9可以通过抑制TGF-β1／Smad3信号通路进而影响肝星状细胞LX-2的激活，这些都提示UBC9在肝纤维化过程具有重要作用，为肝纤维化治疗提供一些新的理论依据。

姜黄素对人食管癌耐药细胞Eca-109／VCR生长和凋亡的影响2083-2087

摘要：目的研究姜黄素（Cur）对人食管癌耐药细胞Eca-109／VCR的体内外生长和凋亡的影响。方法CCK-8法测定Cur对Eca-109／VCR细胞的抑制作用。FCM检测Eca-109／VCR细胞凋亡率。建立Eca-109／VCR裸鼠皮下移植瘤模型，观察Cur对移植瘤的抑制作用。比较各组瘤组织病理形态学改变、细胞凋亡及血清中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达。结果Cur呈浓度、时间依赖性抑制Eca-109／VCR细胞增殖。Cur可诱导Eca-109／VCR细胞凋亡。Cur显著抑制移植瘤的生长，Cur组内可见大量坏死灶。Cur诱导移植瘤细胞凋亡和升高Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达，随着Cur浓度的增高而增加。结论Cur能显著抑制食管癌耐药细胞的体内外生长，其作用可能与上调Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9表达，诱导耐药癌细胞凋亡有关。

乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义2088-2092

摘要：目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）x蛋白（HBx）对autotaxin（ATX）表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3．1（＋）．HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3．ATX，共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx的HepG2.HBx细胞，Westernblot检测HBx对ATX蛋白表达的影响。结果共转染检测显示，pcDNA3．1（＋）-HBx和pGL3-ATX共转染组的荧光素酶活性是空载体pcDNA3-1（＋）和pGL3-ATX共转染组的1．47倍（P〈0．000）。Westem blot检测显示，HepG2．HBx细胞ATX蛋白表达显著升高，为HepG2细胞的1．75倍（P〈0．05）。结论HBx可激活ATX基因启动子，上调ATX的表达，提示HBV感染可增强ATX／溶血磷脂酸的信号转导。

盐霉素及roTOR信号通路对前列腺癌DU145干细胞的影响2092-2096

摘要：目的探讨盐霉素对前列腺癌DU145干细胞的影响及其可能的机制，为盐霉素的临床应用提供理论依据。方法盐霉素处理DU145细胞，以ALDH为肿瘤干细胞标记物，用流式细胞仪检测处理后ALDH阳性的DU145干细胞的百分比。盐霉素处理DU145细胞后，用Western Blot法检测mTOR信号通路相关蛋白m—TOR、p-70s6k、p-p70s6、p-s6等的表达变化。盐霉素结合mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素处理DU145细胞．利用流式细仪检测ALDH阳性的DU145干细胞百分比。结果盐霉素显著性抑制ALDH阳性的DU145干细胞（抑制率为77．78％），是紫杉醇的2倍（抑制率为38．64％）。盐霉素抑制mTOR信号通路相关分子m—TOR、p-70s6k、p—p70s6、p-s6等蛋白的表达，具有时间依赖性和剂量依赖性。盐霉素结合雷帕霉素能够抑制ALDH阳性的DU145干细胞比例（抑制率为77．95％）。结论盐霉素可能通过抑制mTOR通路信号来发挥抑制肿瘤干细胞的作用。

Beclin1和LC3蛋白在非小细胞肺癌的表达和临床意义2097-2100

摘要：目的检测自噬相关蛋白Beclin1和LC3在非小细胞肺癌组织中的表达情况并探讨其临床意义。方法用免疫组化法检测66例肺癌组织、52例癌旁组织的Beclin1和LC3表达，并结合临床病理因素进行分析。结果肺癌组织中Beclin1和LC3蛋白阳性表达率均低于癌旁组织，差异有统计学意义（46．9％vs75％，53％VS80．7％，P〈0．05），随着TNM分期升高、组织分化程度降低，Beclin1和LC3蛋白表达均下调，随着肿瘤增大，Beclin1表达也下调，差异有统计学意义（P〈0．05），Beclin1和LC3蛋白表达呈正相关（r=0．31，P〈0．05）。结论自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达下调可能参与了非小细胞肺癌的发生及发展。

1，25（OH）2D3抑制肝星状细胞激活和调控Th细胞分化治疗肝纤维化2100-2104

摘要：目的明确1，25．二羟基维生素D，[1，25-dihydroxyvitamin D3，1，25（OH）2D3]对肝纤维化的治疗作用及其作用机制。方法病理学检查和肝功能血生化检查评估肝纤维化程度；免疫组化检测α-SMA、TGF—β和collagenI表达观察肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSC）激活水平；流式细胞实验、ELISA、RT—PCR等衡量1，25（OH）2D3对CD4^＋T细胞亚群分化的影响。结果与肝纤维化模型组相比，1，25（OH）2D3治疗组肝细胞状态明显恢复。肝纤维化小鼠肝脏中collagenI、TGF—β和α-SMA表达明显增多（P〈0．05），1，25（OH）2D3治疗后表达明显下降（P〈0．05）。1，25（OH）2D3治疗后Th1细胞和Th17细胞比例降低（P〈0．05）、Th2细胞比例增加（P〈0．05）。1，25（OH）2D3治疗组小鼠的IFN-γ、IL-17A和IL-22因子浓度水平较肝纤维化小鼠明显降低，IL-4浓度升高（P〈0．01）；RORγt和T—bet表达量降低，GATA3表达升高（P〈0．01）。结论1，25（OH）2D3通过降低肝星状细胞激活水平以及调控肝纤维化中T11细胞的分化减轻肝纤维化。

实用医学杂志实验研究

益气血法对超排卵小鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2、Bax、Caspase3表达的影响2105-2108

摘要：目的观察经后增殖方对超排卵小鼠卵巢凋亡相关基因及其蛋白表达的调节作用，探讨中药益气血法对超排卵小鼠卵巢颗粒细胞凋亡及卵泡质量的影响。方法建立超排卵小鼠模型，30只小鼠随机分为空白组、模型组、中药治疗组。采用实时荧光定量PCR（real—time quantitative PCR，qPCR）和免疫印迹法（Westernblot）分别检测Bcl-2、Bax、Caspase3基因和蛋白的表达水平。结果中药治疗组Bax、Cas—pase3mRNA的表达水平与模型组比较（0．895掰1．779，0．674vs252．066，均P〈0．05），差异均有统计学意义；中药治疗组Bel-2、Bax、Caspase3mRNA的表达水平与空白组比较（1.11vs1．26，0．89vs0．79，0．67vs0．96），差异均无统计学意义（P〉0．05）；中药治疗组Bcl．2、Bax、Caspase3蛋白的表达水平与模型组比较（0．62vs0．41，0．79vs1．06，0．49vs0．89），差异均有统计学意义（P〈0．05），与空白组比较（0．62vs0．64，0．79vs0．73，0．49vs0．50）差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论经后增殖方能促进Bel-2蛋白的表达，抑制Bax、caspase3基因及蛋白的表达，抑制超排卵小鼠卵巢颗粒细胞凋亡至接近自然排卵小鼠的水平，提高超排卵小鼠卵泡质量。

富半胱氨酸蛋白61在肝卵圆细胞增殖和分化中的作用及意义2109-2112

摘要：目的分析肝卵圆细胞（HOCs）在2-乙酰氨基芴＋2／3肝切除（2-AAF／PHx）大鼠肝损伤模型中的增殖、分化情况，并且对富半胱氨酸蛋白61（Cyr61）在HOCs增殖、分化中的作用及机制进行初步研究。方法构建2-AAF／PHx大鼠肝损伤模型，采用免疫组织化学染色、Western blot检测等方法对大鼠肝脏组织中HOCs增殖、分化情况和Cyr61的表达水平进行检测分析；并且，采用Western blot检测等方法研究分析HOCs株WB-F344被诱导分化的过程中，Cyr61和B-连环蛋白（B-catenin）表达水平的变化。结果2-AAF／PHx大鼠模型肝脏组织中Cyr61的表达在HOCs活化增殖的过程中明显升高，HOCs分化为正常肝细胞或胆管细胞后又恢复正常水平；体外实验中，Cyr61和B—catenin蛋白表达水平在WB—F344细胞向肝细胞分化过程中明显增高。结论Cyr61可以促进HOCs的增殖和分化，并且可能和B—catenin信号通路的激活密切相关。

奥曲肽通过抑制内质网应激减轻肝纤维化大鼠肝损伤2113-2116

摘要：目的观察奥曲肽（OCT）对肝纤维化（HF）大鼠血清AST、ALT及肝组织Bcl-2、Bax、GRP78、CHOP表达的影响，探讨OCT是否通过抑制内质网应激（ERS）反应减轻大鼠肝损伤。方法将40只SD大鼠随机分为空白（Con）组、模型（Mod）组和低、高剂量OCT治疗（OCT—L、OCT-H）组。除Con组外均采用每周2次皮下注射40％CCl4 3mL／kg诱导大鼠HF，期间OCT—L、OCT—H组每12小时分别给予OCT1、10ug／kg皮下注射。给药8周后处死大鼠，检测大鼠血清AST、ALT含量；HE和Masson染色观察肝组织的病理学改变，Ishak评分系统分析各组肝组织炎症活动度及纤维化程度；Western blot检测肝组织Bcl-2、Bax、GRP78、CHOP蛋白表达。结果与Con组相比，Mod组和OCT治疗组大鼠肝脏病理变化程度、炎症活动度、纤维化程度、血清AST和ALT含量以及Bax、GRP78、CHOP蛋白表达量均显著升高（P〈0．01），Bcl-2蛋白表达量均明显降低（P〈0．01）。与Mod组比较，OCT治疗组大鼠肝脏病理变化程度、炎症活动度、纤维化程度、血清AST和ALT含量以及Bax、GRP78、CHOP蛋白表达量显著下降（P〈0．05），Bcl-2蛋白表达量上升（P〈0．05），但两OCT治疗组数据差异无统计学意义（P〉0．05）。结论OCT可以减轻HF大鼠肝损伤程度，其机制可能与减轻了肝组织的ERS反应有关。

实用医学杂志临床研究

喉癌与HPV、EBV感染阳性表达的相关性2117-2122

摘要：目的探讨喉癌与HPV、EBV阳性表达的关系。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术（Hybri Max）和实时荧光定量PCR技术对101例喉癌石蜡包埋组织标本进行37种HPV亚型检测和EBV定量检测，以43例声带息肉标本为对照。结果喉癌组HPV阳性率13．86％，对照组HPV阳性率9．3％，HPV在喉癌组和对照组的阳性表达差异无统计学意义（P〉0．05）；喉癌组EBV阳性率63．37％，对照组EBV阳性率13．95％，EBV在喉癌组和对照组的阳性表达差异具有统计学意义（P〈0．05）；通过不同分化程度喉癌组织中EBV阳性率的比较，EBV在高分化型与中分化型喉癌组织中阳性表达差异无统计学意义（P〉0．05），EBV在高分化型与低分化型、中分化型与低分化型喉癌组织中阳性表达差异具有统计学意义（P〈0．05）；不同性别、年龄、病程的喉癌患者中EBV阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论喉癌的发病与EBV感染密切相关。与HPV可能有关，HPV高危亚型感染在诱发喉癌的过程中有一定作用；喉癌患者的性别、年龄、病程长短与EBV感染无明显关系。本研究将为喉癌的病毒学致病机制及临床上防治喉癌提供一定的依据。

灯盏花通过促进eNOS／NO合成减轻缺血再灌注引起的大鼠肠道黏膜屏障损伤2122-2125

摘要：目的探讨灯盏花在肠缺血再灌注（I／R）早期小肠黏膜屏障受损中的作用及其机制。方法44只SD大鼠随机分为假手术组、肠I／R损伤（IIR）组、灯盏花处理（EB＋IIR）组、L—NAME处理（LN＋IIR）组。EB＋IIR纽在术前7d腹腔注射灯盏花注射液20mg／（kg·d），LN＋IIR组在术前30min尾静脉给予L—NAME（100mg／kg）或等量生理盐水。夹闭肠系膜前动脉45min后再灌注4h。处死大鼠取标本，HE染色观察肠组织病理改变，ELISA检测肠黏膜SIgA和血浆内毒素水平，同时检测肠组织iNOS、eNOS和总NO表达水平。结果肠I／R导致明显小肠机械屏障和免疫屏障受损，表现为肠黏膜SIgA含量下调，血浆内毒素水平提高，eNOS含量减少，iNOS／NO合成增加；灯盏花预处理可促进eNOS／NO合成，下调iNOS水平，减轻肠道损伤，提高肠黏膜SIgA含量并减轻血浆内毒素水平；当应用L—NAMEHCI后，灯盏花的保护作用被取消。结论灯盏花注射液预处理通过促进eNOS／NO合成减轻I／R引起的小肠损伤。

三维超声对单绒毛膜单羊膜囊双胎脐带缠绕的诊断价值2126-2129

摘要：目的探讨三维超声对单绒毛膜单羊膜囊双胎脐带缠绕的诊断价值。方法对2013年11月至2016年3月进行产前超声检查的65例单绒毛膜单羊膜囊双胎孕妇，按产前超声筛查规范要求进行结构筛查，采用连续追踪法对两个胎儿的脐带进行观察，对可疑脐带缠绕者进行脐带三维成像，记录孕周、胎儿有无结构畸形，追踪至胎儿出生或被引产，将超声发现、妊娠结局等进行回顾性分析。结果4例单绒毛膜单羊膜囊双胎孕妇在超声检查中被发现两个胎儿之间存在脐带缠绕，三维超声能够清晰显示脐带缠绕的情况。4例孕妇的8个胎儿中的3个胎死宫内，存活的5个胎儿中的3个合并不同程度的结构畸形。结论单绒毛膜单羊膜囊双胎两个胎儿的脐带相互缠绕对胎儿宫内安危造成很大威胁，借助三维超声细致检查有助于及时发现并给予严密监护，为，临床产科处理提供参考意见。

COPD患者肺泡及外周血单核源性巨噬细胞Cofilin的表达与其吞噬烟曲霉功能的相关性2129-2132

摘要：目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺泡及外周血单核源性巨噬细胞c06lin的表达与其吞噬烟曲霉功能的相关性。方法选取2015年7月至2016年5月南方医科大学珠江医院呼吸内科门诊20名COPD患者，其中观察组1（2011版GOLD中A和B组），观察组2（2011版GOLD中C和D组），健康对照组10人。3组行支气管肺泡灌洗术、采取外周血，分别提取AM和MDM，检测各组的AM和MDM对烟曲霉孢子的吞噬能力。运用实时荧光定量（qRT—PCR）和免疫蛋白印迹实验（Western blot）检测3组Cofilin蛋白的表达，比较其差异。结果3组人群MDM／AM吞噬烟曲霉孢子的菌落数分别为（17±3）个、（16±2）个、（42±3）个（F=73．446，P〈0．001），两观察组与健康组差异明显，而两观察组无明显差异。qRT—PCR和Western blot结果显示，两观察组中Cofilin蛋白表达明显高于健康组。结论COPD患者肺泡及外周血单核源性巨噬细胞吞噬烟曲霉功能降低可能与Cofilin蛋白升高有关。

高频彩超在诊断儿童腹内疝的价值2133-2136

摘要：目的总结分析儿童腹内疝超声影像特征及误诊病例回顾，探讨高频彩超在儿童腹内疝诊断中的价值。方法回顾性分析2012年1月至2015年12月经腹部高频彩超诊断为腹内疝，并科行手术治疗的患儿镯例（部分切除物行病理确诊），回顾性分析其术前超声图像特征，并比较腹平片及CT结果、术中所见及病理诊断。结果30例经手术确诊为腹内疝。结论高频彩超对儿童腹内疝有较高的诊断率，但多数在出现肠梗阻后诊断。

高龄二孩孕妇的产前诊断结果2136-2139

摘要：目的分析“全面二孩”政策下，高龄妊娠产前诊断胎儿染色体异常的发生率，为高龄人群提供适宜的产前诊断策略。方法统计2015年1月至2016年12月在我院医学遗传中心行介入性产前诊断10607例中3569例高龄孕妇的胎儿染色体核型分析结果，其中854例同时行染色体微阵列分析（ehromosomal mieroarray analysis，CMA）。对比不同年龄组（35～39岁及40岁以上）胎儿染色体异常的发生率及异常类型分析。结果10607例产前诊断中，高龄妊娠比例33．6％；二孩政策开放后，有产前诊断需求的高龄孕妇增加，由27.2％上升到37．9％，胎儿染色体异常的检出率分别为7．9％与10．8％，差异显著；常染色体非整倍体的检出率为5．2％与7．8％，2016年比2015年显著增高，但其它类型染色体异常无差异；3569例高龄妊娠中有854例同时行CMA，CMA阳性率分别为39．4％与26．7％，CMA是染色体核型分析的有利补充，对染色体微缺失与微重复检测有重要意义。结论2016年因高龄行产前诊断的孕妇增加，胎儿染色体异常的检出率增加；胎儿染色体异常与孕妇年龄密切相关。对高龄妊娠，孕前应遗传咨询、孕后需产前诊断排除胎儿染色体异常。

输尿管镜联合封堵器与斜卧截石联合体位微创经皮肾镜治疗输尿管上段嵌顿性结石比较2140-2143

摘要：目的比较输尿管镜联合封堵器与斜卧截石联合体位微创经皮肾镜治疗输尿管上段嵌顿性结石的临床治疗效果。方法回顾性分析2014年1月至2016年12月在我院住院行手术治疗的97例输尿管上段嵌顿性结石患者。随机分成两组：输尿管镜联合封堵器组，52例；微创经皮肾镜组，45例。两组间性别、年龄、结石大小无明显差异。结果微创经皮肾镜组和输尿管镜联合封堵器组的术中、术后各项指标分别为：手术时间（78．2±14．1）min vs．（53.3±12．4）min（P〈0．05），手术成功率为97．8％vs94．2％（P〉0．05），结石清除率为100％vs．91．8％（P〉0．05），并发症发生率为4.4％vs．3．9％（P〉0．05），住院时间（9．1±3．2）dvs．（5．5±1．4）d（P〈0．05）。所有患者均未出现感染性休克，无输尿管损伤、肠道损伤等并发症。结论输尿管镜联合封堵器和斜卧截石联合体位微创经皮肾镜均是治疗输尿管上段嵌顿性结石的安全、有效的手术方式。具体术式的选择须根据患者的病情特点和医生的手术经验等因素综合考虑。