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实用医学 2017年第03期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

难治性原发免疫性血小板减少症的治疗进展337-339

摘要：原发免疫性血小板减少症（primary immune thromboeytopenia, ITP），既往命名为特发性血小板减少性紫癜，是临床上常见的一种获得性血液系统疾病，以血小板减少及出血为主要临床表现，以骨髓中血小板生成减少、自身抗体产生、网状系统血小板清除三种发病机制致病。根据2016年国际ITP工作组制定的难治性ITP明确定义为对脾切除无效，或脾切除后复发,呈现重型或高风险仍需治疗。有高达30％的ITP患者在接受激素及脾切除治疗后出现难治性，即使部分病例初治有反应，也容易复发。

围产期抑郁的影响及危险因素研究进展340-342

摘要：抑郁是妊娠期间和产后常见的并发症，妊娠期间抑郁的发生率约为18．4％，产后3个月内抑郁的发生率约为19．2％。要诊断为围产期抑郁，必须存在超过以下5种以上的症状：失眠或睡眠过度、易激惹或反应迟缓、容易疲劳、食欲改变、无意义感或罪恶感、注意力下降、有自杀想法。除此之外，还必须存在情绪抑郁和（或）兴趣／快乐丧失。同时，以上症状要存在至少2个星期。

实用医学杂志基础研究

阿霉素对肾上腺皮质癌细胞系SW-13克隆特性的影响343-346

摘要：目的：研究阿霉素在体干预对肾上腺皮质癌系SW-13克隆特性的影响。方法：通过建立阿霉素干预裸鼠连续传代SW-13细胞系皮下移植瘤模型，将空白组及实验组细胞进行单细胞克隆行成试验，观察单个细胞生长曲线，并计算克隆形成率及3种克隆（全克隆、部分克隆和旁克隆）的百分比，并进行Hoechst33342试验检测细胞的耐药性。结果：SW-13细胞系经过阿霉素干预裸鼠连续传代移植瘤模型后，克隆形成率较空白对照组增加（P〈0．05）；全克隆的百分比高于空白对照组（P〈0．05）；经Hoeehst33342试验发现经阿霉素干预肾上腺皮质癌细胞荧光减弱。结论：阿霉素在体干预提高肾上腺皮质癌细胞系SW-13的克隆形成能力及全克隆形成能力，并提高其耐药性。

FCER2基因rs28364072位点多态性与哮喘的相关性346-349

摘要：目的：探讨中国汉族人群FCER2基因rs28364072位点多态性与哮喘的相关性。方法：对120例中国汉族哮喘患者（哮喘组）及116名汉族健康者（对照组），应用聚合酶链（PCR）反应、DNA测序、哮喘控制测试（ACT）评分、肺功能测定等方法。结果：不同种族人群FCER2基因rs28364072位点基因型分布及等位基因频率的比较差异有统计学意义。在我国汉族哮喘及健康者中，均存在TT、TC和CC三种基因型。在哮喘组与对照组中，各基因型分布频率及等位基因频率比较差异均有统计学意义。相对TT基因型而言，CC基因型、CC＋TC均能显著增加哮喘发生的危险性。相对T而言，突变C能显著增加哮喘发生的危险性。在哮喘组TT与CC基因型的ACT评分、血嗜酸性粒细胞百分比（EOS％）比较差异有统计学意义。结论：我国汉族人群存在着FCER2基因rs28364072位点多态性，且其多态性与哮喘患病相关。

自噬减少组蛋白介导的肾小管上皮细胞凋亡350-353

摘要：目的：探讨自噬对组蛋白介导的人肾小管上皮细胞（HK-2）凋亡的效应。方法：以不同浓度组蛋白刺激HK-2，应用流式细胞仪和免疫印迹方法检测HK-2凋亡和自噬相关蛋白LC3II、Beclinl的表达情况，初步了解组蛋白对HK-2凋亡和自噬的影响。以自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）预处理后，观察组蛋白诱导的HK-2凋亡和caspase-3活化的情况，进一步明确自噬通路对凋亡的作用。结果：组蛋白25、50、100μg／mL组HK-2凋亡率和LC3II、Beclinl表达水平均显著升高（P〈0．05），并且组蛋白诱导HK-2凋亡具有浓度依赖效应。自噬抑制剂3-MA显著增强HK-2凋亡和caspase-3活化（P〈0．05）。结论：自噬能够减轻组蛋白介导的HK-2凋亡，提示活化自噬通路在急性肾损伤中具有潜在的应用价值。

shRNA下调LSD1基因表达对人急性髓系白血病细胞凋亡与细胞周期的影响354-358

摘要：目的：观察慢病毒载体介导shRNA靶向沉默组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1）基因对人急性髓系白血病细胞凋亡与细胞周期的影响。方法：利用慢病毒载体构建人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞和急性单核细胞白血病SHI-1细胞LSD1基因干扰的稳定细胞系。设置空白对照组、空载体对照组和LSD1-shRNA干扰组，采用实时荧光定量PCR和Western blot方法分别检测LSD1的mRNA和蛋白表达水平；AnnexinV-PE／7-AAD染色后利用流式细胞术检测细胞凋亡；PI染色后检测细胞周期。结果：HL-60细胞和SHI-1细胞LSD1-shRNA干扰组LSD1 mRNA和蛋白表达水平相较于空白对照组及空载体对照组均显著下调（P〈0．01）。干扰LSD1后，HL-60细胞和SHI-1细胞凋亡率明显增加（P〈0．01），细胞周期阻滞于GdG，期（P〈0．01）。结论：shRNA下调LSD1表达使人急性髓系白血病细胞凋亡增加并发生细胞周期G0/G1期阻滞。

糖基化终产物通过其受体激活NADPH氧化酶及其下游通路诱导L细胞的凋亡358-362

摘要：目的：探讨糖基化终产物（AGEs）与其受体（RAGE）及其下游信号通路在肠道L细胞（GLUTag）凋亡中的作用。方法：首先将不同浓度的AGEs作用于GLUTag细胞24h后，RT-PCR及Western blot检测各组细胞RAGE mRNA及蛋白表达水平。然后将细胞分为BSA对照组、AGEs200μg／mL组、AGEs＋siRNA-RAGE组、AGEs＋apocynin组。采用AnnexinV-FITC／PI检测细胞凋亡率，荧光探针检测细胞内活性氧水平，Western blot检测NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox。磷酸化水平和Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果：AGEs干预后GLUTag细胞RAGE mRNA及蛋白表达水平呈剂量依赖性增加。AGEs单独处理组与BSA对照组相比，细胞凋亡率显著增加，NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox的表达增多，细胞内ROS水平升高，促凋亡蛋白Bax表达上调，抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调。AGEs＋apocynin组、AGEs＋siRNA-RAGE组与AGEs单独处理组相比，细胞凋亡率显著下降，NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox的表达减少，细胞内ROS水平下降，促凋亡蛋白Bax表达下调，抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调。结论：AGEs作用于GLUTag，可上调细胞RAGE受体表达，激活NADPH氧化酶，使细胞内ROS生成增多，进而通过p53／Bax途径诱导GLUTag凋亡。

姜黄素对swAPPHEK293细胞β样淀粉样蛋白生成的影响363-367

摘要：目的：在转染瑞典突变型淀粉样前体蛋白（APP）基因细胞（swAPP HEK293）中探讨姜黄素（Cureumin）对β样淀粉样蛋白（Aβ）生成的影响及初步机制。方法：以swAPP HEK293为细胞模型，首先以MTT的方法检测姜黄素在不同时间点（各个时间点）和浓度值（各个浓度值）时对细胞存活率的影响；选取无细胞毒性时的浓度值（5μmol／L）作用不同时间后，采用ELISA的方法检测其对Aβ的影响；选取抑制作用最强的浓度值和时间点进行后续试验，采用RT-PCR检测miR-153及APPmRNA的表达，采用Western blot检测APP蛋白的表达。结果：与对照组相比，姜黄素浓度≤5μmol／L组对细胞活性无毒性作用（P〉0．05），姜黄素明显抑制Aβ的生成，差异有统计学意义（P〈0．05），从而筛选姜黄素最佳作用浓度和时间为5μmol／L、24h；姜黄素5μmol／L对APPmRNA表达水平无明显影响（P〉0．05），而明显降低APP蛋白的表达（P〈0．05）；此外，姜黄素5μmol／L使细胞中miR-153的表达水平明显升高（P〈0．05）。结论：在swAPP HEK293细胞中，姜黄素可能通过上调miR-153的表达及降低APP蛋白的表达进而抑制Aβ的生成。

雷公藤多苷含药血清对强直性脊柱炎病理性骨化相关炎症因子和miR-21的影响367-370

摘要：目的：探讨雷公藤多苷含药血清对强直性脊柱炎（AS）病理性骨化相关炎症因子及miR-21的影响。方法：将本题组前期培养分离的As滑膜成纤维细胞用1 ng／mL IL-1刺激24h后，加入不同浓度的空白血清（5％，10％，15％）或雷公藤多苷合药血清（5％，10％，15％）培养48h，Westem Blot检测PGE-2、IL-17、IL-22、IL-23、CCL19、CCL21的水平，RT-PCR检测成骨相关因子BMP-2以及miR-21的表达。结果：雷公藤多苷含药血清在干预后48h，显著抑制了炎症因子的表达，并同时抑制了BMP-2和miR-21的表达，且这一抑制呈浓度梯度改变。结论：雷公藤多苷含药血清可以抑制AS病理性骨化相关炎症因子，BMP-2和miR-21的表达，为其治疗AS病理性骨化提供了理论基础。

实用医学杂志实验研究

CUEDC2在糖尿病肾病小鼠肾脏中表达及其与24h尿白蛋白、血肌酐的相关性371-374

摘要：目的：研究CUEDC2在糖尿病肾病小鼠肾脏中的表达、定位及与肾功能相关性。方法：选用db／db小鼠为实验组，db／m小鼠为对照组，相同饲养条件下，24周时取组织样本；采用PAS，HE及Masson染色观察肾脏病理改变；Western Blot，免疫组织化学法，RealtimePCR检测肾组织CUEDC2的表达、定位；由本院检验科测定血肌酐、24h尿白蛋白。结果：CUEDC2蛋白表达定位于肾小管上皮细胞中。24周时，db／db小鼠出现肾小球硬化，肾间质增宽、炎症细胞浸润；较同期db／m小鼠，系膜基质明显扩张，肾小球及肾小管间质胶原染色增多，肾组织CUEDC2蛋白及mRNA均下调（P〈0．05）。db／db小鼠肾脏中CUEDC2含量分别与24h尿白蛋白与血肌酐呈明显负相关（P〈0．05）。结论：CUEDC2在糖尿病小鼠肾脏中下调，并与尿白蛋白、血肌酐含量呈负相关。

实用医学杂志临床研究

腹腔镜术中PRVC呼吸模式的应用研究375-378

摘要：目的：通过在气腹过程中对PC、VC和PRVC3种呼吸模式进行呼吸力学的监测并、对比、研究，来探讨PRVC呼吸模式临床使用的意义及价值。方法：腹腔镜胆囊切除术患者90例，随机分为压力控制、容量控制、压力调节容量控制通气3组，每组30例。分别在患者气腹前、气腹后5、10、15、20min等5个时项段记录：食管压力、气道平均压、气道压峰值、动脉二氧化碳分压、呼气末CO2浓度或分压、潮气量、平均动脉压、心率。结果：VC模式的PES在气腹后明显高于PC和PRVC模式。PC和VC模式气腹后10min开始PaCO2和ETCO2明显升高（P〈0．05）；PC不仅会使PaCO2和ETCO2升高，而且气腹后TV明显低于其他两组（P〈0．05）。PC和VC组气腹后通过使PaCO2和ETCO2上升，使MAP、HR显著升高（P〈0．05）。气腹后PRVC组MAP、HR显著低于PC、VC组（P〈0．05）。结论：PRVC模式可有效降低气腹引起的PAWM、PAP、PES升高，避免PaCO2和ETC02在手术期的异常升高，保证围手术期患者的生命体征平稳。

视神经脊髓炎谱系疾病患者循环滤泡辅助性T细胞和滤泡调节性T细胞的变化379-383

摘要：目的：探讨循环滤泡辅助性T细胞（cTfh）、循环滤泡调节性T细胞（cTfr）以及cTm／cTfr比值在视神经脊髓炎谱系疾病（NMOSD）病程中的变化及意义。方法：流式细胞术检测15例复发期、16例缓解期NMOSD患者及18例健康对照者的cTfh、cTfr及外周血B细胞比率；酶联免疫吸附试验检测3组受试者血浆IL-21以及患者血浆抗水通道蛋白4抗体（AQP4-Ab）水平。结果：与缓解期患者和健康人相比，复发期患者cTm和B细胞比率、cTfh／cTfr比值以及IL-21水平均升高，cTfr比率降低；而缓解期患者与健康人的上述指标相比差异无统计学意义。复发期和缓解期患者AQP4-Ab无明显差异。患者的cTm比率与B细胞比率、血浆IL-21水平呈正相关，而cTh比率与IL-21水平之间呈负相关。患者cTfh／cTfr比值与B细胞比率和IL-21之间亦呈正相关，但AQP4-Ab水平与cTm比率、B细胞比率、cTfh／cTfr比值以及IL-21没有相关性。结论：NMOSD患者cTfh和cTfr比率的变化以及cTfh／cTfr比值失衡可能促进机体内体液免疫应答异常活化，从而参与NMOSD的发病。

uPA在子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮细胞中的表达及其与侵袭性的关系384-387

摘要：目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）在子宫内膜异位症（EMS）患者在位内膜腺上皮细胞中的表达和该因子与其侵袭性的关系。方法：通过原代细胞培养EMS患者和正常内膜各9例在位内膜腺上皮细胞并鉴定，分别经由Western blot和RT-PCR检测该因子的表达。通过侵袭小室验证uPA与腺上皮细胞侵袭性和迁移性的关系。结果：（1）uPA蛋白及mRNA在EMS患者在位内膜腺上皮细胞中的表达比正常内膜中明显增强，其差异具有统计学意义（均P〈0．05）；（2）EMS患者在位内膜腺上皮细胞的侵袭性较正常细胞明显增强，其差异具有统计学意义（均P〈0．05）。结论：uPA在EMs患者在位内膜腺上皮细胞中的表达明显增加，且与其侵袭性及迁移能力明显相关，揭示uPA与该病的发生密切相关。

脾脏VTQ值与乙肝肝纤维化分期388-390

摘要：目的：探讨脾脏VTQ值无创评估乙型肝炎患者肝纤维化分期的可行性。方法：应用声脉冲辐射力成像（ARFI）技术对56例乙型肝炎受试者进行脾脏VTQ值测量，并行肝组织活检，按肝纤维化分期进行分组，采用组间比较、Pearson相关分析、受试者工作特征曲线（ROC曲线）进行分析。结果：脾脏VTQ值与肝纤维化分期呈正相关性，相关系数为0．83（P〈0．05）；脾脏VTQ值在肝纤维化S0期与S1期之间差异无统计学意义（P〉0．05），其余各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）；诊断S4期的ROC曲线下面积为0．95，截断值为2．79m／s，特异度、灵敏度分别为81．8％、91．7％。结论：应用ARFI技术测得的脾脏VTQ值在无创诊断乙型肝炎肝纤维化分期有较好的应用价值。

林氏颈椎定点旋转斜扳法所致咔哒声时的推扳力研究391-394

摘要：目的：测量林氏颈椎定点旋转斜扳法所致咔哒声时的推扳力的大小，为林氏手法的传承、教学、推广、基础研究提供量化依据。方法：使用多点薄膜压力测试系统，记录林氏颈椎定点旋转扳法及传统颈椎旋转手法操作中产生咔哒声时的拇指推扳力大小。结果：两种手法左旋时利手拇指推扳力和右旋时非利手拇指最大推扳力比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。同侧林氏颈椎定点旋转斜扳法所用的最大推扳力小于传统颈椎旋转手法，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：无论是传统颈椎旋转手法还是林氏颈椎定点旋转斜扳法利手拇指最大推扳力都大于非利手；两种手法比较提示，林氏颈椎定点旋转斜扳法更符合人体生物力学特点、更低耗能、更安全。

不同添加时间、疗程及剂量益生菌根除幽门螺杆菌的临床疗效395-398

摘要：目的：探讨不同添加时间、疗程及剂量益生菌在根除幽门螺杆菌（helicobacter pylori，Hp）治疗中的临床疗效。方法：280例Hp阳性的患者随机分为5个治疗组：A组：兰索拉唑片30mg＋克拉霉素片500mg＋阿莫西林胶囊1000mg，每日2次，疗程14d；B组：双歧杆菌乳杆菌三联活菌片（2000mg，每日3次）服用14d后，给予A组治疗方案治疗14d，总疗程28d；C1组：A组治疗方案基础上加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片（2000mg，每日2次），疗程14d；C2组：A组治疗方案基础上加用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片（2000mg，每日3次），疗程14d；D组：C2组方案根除治疗后，继续用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片（2000mg，每日3次）14d，总疗程28d。疗程结束4周后复查13C尿素呼气试验评估根除疗效。治疗期间记录患者的不良反应发生情况。结果：252例（90．0％）患者按方案完成治疗，A、B、C1、C2、D组治疗完成率分别为78．6％（44／56）、92．9％（52／56）、87．5％（49／56）、96．4％（54／56）和94．6％（53／56），B、C2及D组显著高于A组（P〈0．05），而C2略高于B及D组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。A、B、C1、C2及D组按意向治疗（ITT）根除率分别为62．5％、80．4％、69．6％、85．7％和87．5％，B、C2及D组显著高于A组（χ2=4．375，P=0．036；χ2=7．864，P=0．005；χ2=9．333，P=0．002），且C2组高于C1组（χ2=4．171，P=0．041），而D组稍高于B组及C2组，但差异无统计学意义（P〉0．05）；按方案治疗（PP）五组根除率分别为79．5％、86．5％、79．6％、88．9％和92．5％，各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。不良反应包括恶心、腹胀、味觉异常（口苦、口腔异味）、厌食及便秘等。A、B、C1、C2及D组不良反应的发生率分别为67．9％（38／56）、26．8％（15／56）、35．7％（20／56）、21．4％（12／56）及17．

糖尿病足的创面修复156例399-401

摘要：目的：探讨糖尿病患者足部溃疡创面修复。方法：总结156例糖尿病足创面，在全面正规的内科治疗的基础上，针对创面特征、血供特点、组织坏死程度，采用分期“蚕食性”清创方法，结合负压吸引、新型敷料、植皮及皮瓣修复治疗。结果：156例中2例死亡，4例失访，余150例痊愈，治疗周期平均56d。结论：糖尿病足溃疡创面的修复要兼顾全身治疗和局部处理，创面宜分期、渐进性清创，逐步改善创面微环境，创面覆盖宜采用皮片移植，慎用皮瓣转移。

血液净化治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者的疗效402-404

摘要：目的：探讨不同血液净化方式治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者的疗效及安全性。方法：选取诊断明确的原发性肾病综合征伴有利尿剂抵抗患者40例，采用完全随机化分为普通血液透析（HD）组和连续性血液净化（CVVH）组，每组20例。均给予调脂、抗凝及糖皮质激素等基础治疗，观察时间为4周。观察两组患者治疗前后生化指标（24h尿蛋白定量、血浆白蛋白、血清尿素氮和血清肌酐）的变化及水肿的缓解情况。结果：血液净化治疗后，患者尿量均明显增加，24h尿蛋白定量下降的同时血浆白蛋白均显著提升，血尿素氮及肌酐水平均明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。与HD组比较，治疗2周后CVVH组患者尿量增加更明显（P〈0．05），24h尿蛋白定量下降及血浆白蛋白提升更显著（P〈0．05），血尿素氮及肌酐水平两组之间无差异（P〉0．05）。治疗4周后两组患者尿量及肾功能差异无统计学意义（P〉0．05），CVVH组24h尿蛋白定量下降及血浆白蛋白提升比HD组更显著，差异均有统计学意义（P〈0．05）。两组患者均无严重并发症发生。结论：血液净化治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者是安全、有效的，连续性血液净化治疗能更有效缓解利尿剂抵抗肾病综合征患者的严重顽固性水肿，促进肾功能恢复，改善肾病预后。