全反式维A酸增强双自杀基因系统对乳腺癌旁观者效应的观察
摘要：目的：观察全反式维A酸（ATRA）对腺病毒为载体的双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的增强作用及与Cx43表达的关系。方法：MTT法观察ATRA对双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的影响;RT-PCR和FCM法检测ATRA作用前后乳腺癌MCF-7细胞内连接蛋白Cx43基因和蛋白的表达情况。结果：以不同比例混合MCF-7和MCF-7/CDTK细胞在前药作用下细胞存活率ATRA组较对照组明显降低（P〈0.05）。RT-PCR和FCM分析结果表明,经ATRA处理的MCF-7细胞,其Cx43基因和蛋白的表达明显提高。结论：乳腺癌MCF-7细胞中,ATRA具有明显增强CD/TK双自杀基因系统旁观者效应的作用,细胞内Cx43的表达增强可能是旁观者效应增强的机制之一。MYCN-siRNA和神经生长因子联合诱导神经母细胞瘤细胞分化凋亡的实验研究
摘要：目的：探讨应用MYCN-siRNA和神经生长因子（NGF）联合诱导神经母细胞瘤细胞分化凋亡的分子机制。方法：实验分组包括MYCN-siRNA与NGF联合诱导组、NGF诱导组、siRNA诱导组和空白对照组。观察各实验组神经母细胞瘤细胞的形态学变化及细胞的增殖变化,通过Real-TimePCR检测MYCN-mRNA和NSE的表达、Western Blot检测MYCN基因沉默后MYCN蛋白的表达情况。结果：神经母细胞瘤MYCN基因沉默后,RT-PCR检测IMR-32细胞MYCN-mRNA表达的抑制率达到89%;Western Blot检测IMR-32转染MYCN-siRNA后的第3天MYCN蛋白的表达率达到最低,表达率下降至26.6%。在NGF和MYCN-siRNA的共同作用下,神经母细胞瘤细胞出现了较明显的细胞形态学分化,细胞的增殖能力明显下降,IMR-32细胞NSE的表达明显下降。结论：MYCN-siRNA和NGF联合诱导神经母细胞瘤细胞,可使MYCN-mRNA的表达和NSE的表达均明显下降,并促进神经母细胞瘤细胞分化凋亡。流行性腮腺炎合并脑膜脑炎失语1例
摘要：患者女,25岁,学生。主因腮腺肿大伴发热3d,意识障碍4h,呕吐1次于2011年8月21日21：30入院。患者入院前3d出现双侧腮腺肿大疼痛,伴发热,体温最高39℃,热峰数次,无头痛、头晕、恶心、呕吐症状,当地诊所诊断：流行性腮腺炎，国内首对同一父母来源HLA相同的人胚胎干细胞系的建立
摘要：目的：建立国内首对同父母来源的人胚胎干细胞（human embryonic stem cell,hESC）系,为干细胞的定向诱导分化提供内参对照模型。方法：利用体外受精后第3天不适宜进行胚胎移植的低质量胚胎,采用机械切割法分离囊胚内细胞团（ICM）,接种到丝裂霉素C处理的小鼠饲养层上,对建立的hESC进行多能性潜能检测。结果：成功建立一对具有多能特性的hESC系,体外长期培养维持正常核型,STR显示较高的亲缘性,HLA配型完全相同。结论：本研究建立了国内首对同一父母来源的HLA完全相同的hESC,其遗传背景一致,这为细胞的定向诱导分化体系筛选提供一个很好的内参对照,同时也为干细胞的移植排斥反应、培养扩增等研究提供很好的对比参照模型。血友病A患者脑外伤的诊治体会
摘要：血友病A（hemophilia,HA）是血浆中凝血因子VⅢ（抗血友病球蛋白AHG）的活性部分VⅢ：C减少或缺失所致,合并脑外伤者病情更危重。我院1995年来共收治9例HA合并脑外伤患者,现将其诊治体会总结如下。5-Aza-CdR对CEM细胞生长抑制的实验研究
摘要：目的：观察不同剂量5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR）在体外作用48h对人急性淋巴细胞白血病CEM细胞生长的影响。方法：用MTS法及流式细胞仪分析5-Aza-CdR对CEM细胞的生长抑制情况。结果：1.0、2.5、5.0μmol/L的5-Aza-CdR处理CEM细胞48h,对CEM细胞的抑制率分别为1.6%、5.6%、7.5%,5.0μmol/L有明显抑制作用（P〈0.01）;5-Aza-CdR可使CEM细胞凋亡率增加,且作用呈浓度依赖性,1.0、2.5、5.0μmol/L组细诱导胞早期凋亡率分别为4.8%、8.2%、13.8%。结论：5-Aza-CdR能抑制CEM细胞生长,并且可诱导其凋亡。沙棘干乳剂治疗小儿厌食症临床疗效观察
摘要：儿童厌食症是儿科常见病、多发病,以儿童较长时间食欲下降、食量减少为主要表现。较长时间的厌食导致儿童营养不良、免疫力下降,影响正常的体格和智力发育。我院对符合诊断标准的病例共120例随机分为治疗组60例和对照组60例,治疗组给予沙棘干乳剂,Raf-1蛋白突变体的原核表达、纯化及活性鉴定
摘要：目的：将Raf-1蛋白259位丝氨酸（Ser,S）突变成天冬氨酸（Asp,D）,构建突变型GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,表达和纯化融合蛋白及鉴定其生物学活性。方法：以pGEX-4T-1-Raf-1220-268为模板,运用PCR定点突变技术扩增出Raf-1220-268S259D基因序列,插入原核表达载体pGEX-6P-1,表达和纯化重组蛋白,GST沉降实验鉴定蛋白的生物学活性。结果：重组质粒测序结果正确,获得模拟磷酸化GST-Raf-1220-268蛋白。GST沉降实验检测到目的蛋白和14-3-3蛋白具有体外特异性结合活性。结论：成功构建GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,并表达及纯化了有生物学活性的融合蛋白,为进一步针对Raf-1的研究提供实验依据。HMGA2shRNA真核表达载体转染胃癌MKN45细胞株的沉默作用
摘要：目的：将HMGA2shRNA真核表达载体转染至胃癌细胞MKN45,检测其HMGA2mRNA及蛋白的表达。方法：实验分3组：空白组（未转染的胃癌细胞）、实验组（转染HMGA2shRNA组）、阴性对照组（转染错义序列组）,RT-PCR和Western blot分别检测HMGA2在mRNA及蛋白水平的变化。结果：与空白组和阴性对照组相比,实验组HMGA2mRNA的表达明显下降,差异具有统计学意义（均P〈0.05）;HMGA2蛋白表达的变化与基因的变化相一致,实验组的蛋白表达明显受抑制,差异具有统计学意义（均P〈0.05）。结论：HMGA2的特异性shRNA表达载体抑制了HMGA2的表达,HMGA2shRNA转染有望用于胃癌的基因治疗,为进一步研究其更多功能打下基础。大鼠自体肝移植模型的改良——附216例分析
摘要：目的：探讨大鼠自体原位肝移植改良模型的建立技巧。方法：回顾性分析同一操作者学习和建立216例大鼠自体肝移植模型的过程,总结手术技巧,手术改良方法。按学习时间先后分为预实验组（Y组）30例,模型改良组（G组）36例,模型稳定组（W组）150例,观察手术成功率、手术时间、无肝期时间、手术后8h存活率及手术后并发症;W组随机选取20例大鼠8h后处死留取肺肾组织标本,光镜观察肺肾损伤发生情况。结果：Y组手术成功率为73.3%（22/30）,8h存活率20%（6/30）,G组手术成功率为83.3%（30/36）,8h存活率63.9%（23/36）,W组手术成功率为98%（147/150）,8h存活率83.3%（128/150）,死亡原因主要为出血、门静脉狭窄和低温等等。20例W组肺损伤发生率35%（7/20）,肾损伤发生率45%（9/20）。结论：熟练的手术技巧、缩短无肝期时间、减少损伤和出血,注意保温是模型成功的关键;改良模型能满足麻醉基础研究中有关器官保护研究的需要。白介素-4在兔急性肺栓塞并肺损伤的保护机制
摘要：目的：探讨白介素-4（IL-4）在兔急性肺栓塞（APTE）后肺损伤的保护机制。方法：选取健康新西兰兔36只,造模后随机分为3组,每组12只,随机分为生理盐水（NS）模型对照组、外源性IL-4低剂量干预组、高剂量干预组,用ELISA方法检测血清TNF-α、IL-8水平,术毕行动脉血气分析。结果：（1）外源性IL-4干预组较生理盐水模型对照组TNF-α、IL-1β水平下降;（2）高剂量外源性IL-4干预组,TNF-α、IL-1β水平明显下降,P〈0.05,具有统计学意义。结论：外源性IL-4通过对APTE后促炎性因子的水平下调,从而进一步降低了肺损伤。甲状腺激素抵抗综合征1例
摘要：患者女,10岁。因颈部肿大、怕热、多汗、心烦易怒8个月,以＂甲亢＂收住入院。患者平素体健,生长发育及智力均正常,家族中无甲状腺疾病史。查体：身高134cm,体重27kg,体温36.8℃,脉搏95次/min,呼吸20次/min,血压90/60mmHg。超微超顺磁性氧化铁对兔动脉粥样硬化斑块的MRI研究
摘要：目的：利用超微超顺磁性氧化铁（USPIO）对兔动脉粥样硬化斑块进行磁共振成像,分析其磁共振表现特点及其价值。方法：实验组以球囊导管损伤腹主动脉内膜＋高脂饮食的方法建立兔动脉粥样硬化模型12只,对照组3只行假手术和普通饲料喂饲。12周后对所有动物行USPIO增强前后的腹主动脉磁共振扫描,连续跟踪扫描6d（每隔24h1次）,在T2WI序列上观察血管壁信号变化情况,比较管壁信号噪声比（SNR）,并将磁共振结果与病理学相对照。结果：USPIO增强后显示实验组在T2WI序列上腹主动脉管壁信号逐渐降低,在第4天SNR值达到最低点,较增强前信号差异有统计学意义（P〈0.05）,而对照组腹主动脉在增强前后管壁信号无变化。病理证实所有动物模型兔腹主动脉都发生动脉粥样硬化病变,注射USPIO后处死的实验组兔普鲁士蓝染色为阳性,电镜显示USPIO颗粒存在于巨噬细胞胞浆的细胞器内。对照组兔腹主动脉病理检查为阴性。结论：USPIO颗粒可以被兔动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞特异性吞噬并引起相应的磁共振信号改变,USPIO磁共振成像有望在体观测动脉粥样硬化斑块内的炎症反应。本刊对文后参考文献著录格式的要求
摘要：论文中引用他人的资料均应提供出处,提供的参考文献应为作者亲自阅读过的,不提倡间接引用,以最近3～5年内文献为主,论著类论文不少于10条,综述不少于20条,务必注意准确性和完整性。本刊对参考文献采用顺序编码制著录,依其在文内出现的先后顺序用阿拉伯数字标出。著录格式遵照GB/T7714-2005《文后参考文献著录规则》。不同液体血液稀释对大鼠颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶和血脑屏障的影响
摘要：目的：不同液体的血液稀释对大鼠急性颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）和血脑屏障的影响。方法：成年雄性SD大鼠128只,随机分为假手术组（A）、模型组（B）、晶体血液稀释组（C）、万汶血液稀释组（D）各32只,采用feeney自由落体颅脑外伤模型（每组分为2、6、24、48h亚组,每个亚组8只）,采用干湿重法测定脑水含量,通过ELISA法检测血清NSE的浓度,伊文氏蓝（EB）法测定血脑屏障通透性。结果：D组脑组织含水量在24h时与B和C组相比明显降低（P〈0.05）,在2、6、48h时与B组相比明显降低（P〈0.05）;血清中NSE浓度在6、24h与B组相比明显降低（P〈0.05）,在24、48h与C组比较明显降低（P〈0.05）;脑组织中EB含量在2、6、24、48h与B组相比明显降低（P〈0.05）,在6h与C组比较明显降低（P〈0.05）。结论：万汶血液稀释可改善血脑屏障的通透性,进一步降低血清NSE的浓度,减轻颅脑外伤后脑水肿。请选用规范医学名词
高渗盐水抑制肿瘤坏死因子-α表达与减轻脑水肿的相关性
摘要：目的：探讨10%高渗盐水减轻缺血再灌注损伤大鼠脑水肿与抑制小胶质细胞分泌TNF-α是否相关。方法：取72只雄性清洁级SD大鼠,随机分为假手术组、梗死组、10%高渗盐水（Hypertonic saline HS）组,MCAO法建立脑缺血再灌注动物模型,于再灌注开始时分别给予生理盐水或10%HS。相应时间点处死大鼠,检测脑含水量;治疗12h组分别用Western Blot、RT-RCR法检测TNF-α蛋白与mRNA的表达量;治疗24h组用免疫荧光双标法检测缺血灶周围TNF-α与小胶质细胞的表达。用SPSS13.0软件对数据进行统计分析。结果：与假手术组相比,脑梗死组脑含水量显著增加,12h亚组TNF-α蛋白以及mRNA表达亦显著增加（P〈0.05）,而10%HS组脑含水量较脑梗死组减少,TNF-α蛋白以及mRNA表达亦显著下降（P〈0.05）;免疫荧光双标结果显示,与假手术组相比,脑梗死组24h亚组TNF-α表达升高,而10%HS组较梗死组TNF-α表达下降,各组TNF-α与小胶质细胞不同程度共定位表达。结论：10%HS可以通过抑制小胶质细胞释放TNF-α减轻缺血再灌注损伤所致脑水肿。《实用医学杂志》编辑部作者校对稿校对注意事项
摘要：为进一步提高期刊的编校质量和效率,我刊自2012年第1期起停止邮寄纸质版校对稿,改为使用E-mail将PDF格式校对稿发送至第一作者或通信作者在我刊投稿系统中所登记的E-mail邮箱中。
