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摘要:目的:探讨冬凌草乙素对U937细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的冬凌草乙素作用于体外培养的U937细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡;采用RT-PCR对细胞凋亡前后β-catenin的表达水平进行检测。结果:冬凌草乙素可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系。在冬凌草乙素抑制细胞增殖过程中β-catenin的表达水平显著下降。结论:冬凌草乙素能抑制U937细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低β-catenin的表达水平可能是其重要作用机制之一。这为冬凌草乙素抗白血病的进一步研究提供了有力的实验依据。
摘要:目的:以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及AngⅡ1型受体(AT1受体)拮抗剂氯沙坦作用于RIN-m细胞(来源于射线诱导的褐鼠胰岛素细胞瘤),观察RIN-m合成及分泌胰岛素功能及细胞凋亡的情况。为进一步在临床中研究血管紧张素受体拮抗剂对糖代谢的改善作用提供实验证据。方法:细胞的培养及干预:RIN-m细胞(40~50代)接种于3mL含5.6mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养液中。A组加入10μL生理盐水,B、C、D、E组加入终浓度分别为0.1、1、10及100nmol/L的AngⅡ,F组在加入100nmol/L的血管紧张素Ⅱ醋酸盐前10mim给予氯沙坦1μmol/L。各组处理后继续置于37℃、5%CO2的恒温培养箱中48h。RIN-m细胞行流式细胞仪(AnnexinV/FITC)及TUNEL检测凋亡。结果:两种凋亡检测结果大致相似,TUNNEL检测各组凋亡率分别为(7.50±1.18)%,(8.15±0.97)%,(12.67±1.35)%,(15.88±1.75)%,(20.66±0.80)%,(7.74±0.84)%;流式细胞仪检测各组凋亡率分别为(7.62±0.87)%,(8.74±1.31)%,(14.64±1.48)%,(16.47±0.88)%,(20.51±1.03)%,(7.63±0.79)%。AngⅡ干预组凋亡率高于空白对照组,并呈剂量-效应依赖关系,氯沙坦预处理+AngⅡ组与空白对照组比较差异无统计学意义(P=0.98)。结论:AngⅡ可能通过与胰岛β细胞表面AT1受体结合而诱导RIN-m细胞凋亡,氯沙坦可抑制AngⅡ的促凋亡作用。
摘要:患儿女,11个月,因左下肢烧伤5d合并全身表皮松解、剥脱、水疱、渗液、糜烂2d来我院就诊。住院时患儿一般状态差,精神萎靡,T39.0℃,P125次/min,R32次/min。查体:
摘要:目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照。方法:设计带有NcoⅠ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到E.coliBL21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验。结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30d。结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品。
摘要:目的:观察异戊烯焦磷酸刺激慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)体外培养后,其中的γδT细胞增殖及IFNγ分泌情况。方法:体外用异戊烯焦磷酸刺激PBMCs培养10d,计数培养前后细胞总数并采用流式细胞术检测γδT细胞含量;收集第1、4、7、10天上清,ELISA法测定上清中IFNγ的含量。结果:正常组和CHB患者组PBMCs总数都有明显增殖,增殖的细胞主要为γδT细胞,正常组和CHB组分别达(55.65±6.88)%和(54.08±4.28)%,均能有效分泌IFNγ,在第7天达分泌高峰,但患者组分泌峰值低于正常组。结论:异戊烯焦磷酸能有效诱导CHB患者外周血γδT细胞增殖,并且有效分泌IFNγ。
摘要:目的:探讨胃癌细胞中可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)的表达水平对P-糖蛋白(P-gP)表达的影响。方法:采用Western Blot分别检测sorcin高表达的sorcin转染SGC7901细胞(SGC7901-SOR)、亲代SGC7901细胞及转染sorcin反义寡核苷酸的SGC7901-SOR细胞中P-gP蛋白表达水平的变化;用MTT法研究P-gP拮抗剂维拉帕米(VRP)对SGC7901-SOR细胞药物敏感性的影响。结果:Western Blot结果显示sorcin高表达的SGC7901-SOR细胞中P-gP的表达水平较SGC7901细胞明显升高,而sorcin反义寡核苷酸抑制SGC7901-SOR细胞sorcin的表达后,其P-gP的表达水平也随之降低;MTT结果显示维拉帕米可部分逆转sorcin高表达的SGC7901-SOR细胞的耐药。结论:sorcin可能通过调节P-gp水平参与胃癌细胞耐药的形成。
摘要:目的:研究血清钙调神经磷酸酶(CaN)和正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白(RANTES)水平与兔动脉粥样硬化斑块易损性的关系。方法:30只雄性家兔随机分为:(1)空白对照组(Control组,10只),普通饲料喂养12周;(2)稳定斑块组(AS组,10只),高脂饮食(含胆固醇1%和猪油5%)喂养12周;(3)易损斑块组(VAP组,10只)高脂饮食喂养12周,于处死前24和48h分别给予两次药物触发。测定各组第0周、12周血脂,12周处死后检测兔血清CaN和RANTES水平,Masson染色法计算校正的斑块面积、易损指数及其与血清细胞因子的相关系数。结果:高脂喂养12周后AS组和VAP组的血脂、CaN水平较Control组明显升高(P〈0.01)。VAP组RANTES水平(97.48±12.22)ng/mL明显高于AS组(25.01±4.45)ng/mL和Control组(24.88±5.22)ng/mL(均P〈0.01)。与AS组比较,VAP组校正的斑块面积[(52.26±11.58)%vs(32.26±9.76)%]和易损指数(6.25±1.97vs3.24±1.12)差异均有显著性(P〈0.01);AS组和VAP组的RANTES水平与两个易损指标均明显正相关(P〈0.05);AS组CaN水平与两个易损指标均呈负相关(r=-0.62,-0.67;P〈0.05)。结论:RANTES可能是易损斑块预测和干预的重要指标。
摘要:目的:对术前雌犬以及术后尿失禁雌犬进行尿动力学检测,探索合适的尿动力学检测方法并分析检测结果。方法:9只无尿失禁的1岁龄雌性比格犬,术前行尿动力学检测,手术制作压力性尿失禁模型,术后4周再次行尿动力学检测,分析尿动力学结果。结果:术前犬最大尿道关闭压为(47.0±15.6)cmH2O,腹压漏尿点压为(131.9±24.1)cmH2O,尿道关闭面积为(659.6±208.7)cmH2O·mm,术后尿失禁犬的最大尿道关闭压为(28.6±11.9)cmH2O,腹压漏尿点压为(74.0±10.6)cmH2O,尿道关闭面积为(286.5±158.5)cmH2O·mm。结论:对雌犬进行尿动力学检测可行,最大尿道关闭压、腹压漏尿点压和尿道关闭面积的变化反映了压力性尿失禁犬尿控能力的减弱。
摘要:目的:探讨糖尿病模型大鼠是否出现认知功能障碍以及与海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的关系。方法:SD大鼠随机分为正常组及糖尿病组。糖尿病组运用链脲佐菌素(STZ,55mg/kg)腹腔注射建立STZ大鼠模型。两组通过Y型迷宫测试其学习记忆能力,并采用Westernblot免疫印迹检测两组大鼠海马NMDA受体NR2B亚基的蛋白表达水平。结果:(1)糖尿病组血糖较正常组血糖明显升高[(31.1±2.3)mmol/Lvs(4.8±0.6)mmol/L,P〈0.01],而糖尿病组大鼠体质量在12周后较正常组明显减轻[(167.75±12.1)gvs(325.70±34.6)g,P〈0.01]。(2)Y型迷宫试验中,糖尿病组的大鼠出现的错误反应次数明显高于正常组(P〈0.001)。并且正常组达标所需时间为(3.50±0.53)d,而糖尿病组大鼠在训练的第5天仍旧不能达标。(3)糖尿病组海马NMDA受体NR2B亚基的蛋白表达减弱,与正常组比较差异有显著性(1.255±0.094vs2.606±0.090,P〈0.01)。结论:糖尿病大鼠可出现明显的学习记忆等认知功能的减退,海马NMDA受体NR2B亚基的蛋白表达下降可能是糖尿病脑病的重要机制之一。
摘要:目的:探讨川芎嗪对脑挫伤皮质Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:采用Feeney法复制大鼠脑挫伤动物模型,Wistar大鼠30只,随机分成正常组、模型组和治疗组。采用原位杂交与医学图像分析技术检测Bcl-2 mRNA阳性细胞数目、平均灰度值。结果:大脑皮质Bcl-2 mRNA在模型组阳性神经元多、着色深,平均数密度值高而平均灰度值低;正常组中着色浅、阳性细胞数少,平均灰度值大,二者差异有显著性(P〈0.01)。治疗组与模型组比较,Bcl-2 mRNA阳性神经元增多,平均灰度值降低(P〈0.01)。结论:脑挫伤后Bcl-2 mRNA表达增强,川芎嗪可上调Bcl-2 mRNA的表达,从而抑制神经细胞凋亡,在脑挫伤中起到神经保护作用。
摘要:目的:从抗氧化角度探讨中药水蛭素对荷瘤鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平的影响。方法:取小鼠44只,右腋下接种S-180瘤细胞,随机分为4组,模型对照组给予生理盐水,阳性对照组给予5-氟尿嘧啶,实验组分别给予不同剂量的中药水蛭素,连续用药14d。于第15天取血,分离血清,检测SOD和MDA的含量。结果:中药水蛭素大小剂量组血清SOD含量明显升高,MDA的含量明显下降。结论:中药水蛭素能提高荷瘤鼠清除自由基的能力。
摘要:患者女,40岁,以面部红斑、四肢皮疹发病7年,近期加重并反复发热、体温40℃,伴咳嗽、咳痰,有时刺激性呛咳入院。在外院求治2个月,用过多种抗生素如先锋霉素、头孢菌素、左氧氟沙星等均无效,病情渐重,尿少,精神极差,胸闷气短,不能平卧。
摘要:目的:观察E11-E19SD大鼠胚胎心脏形态变化及TGF-β1、Smad4的表达,并探讨其与大鼠胚胎心脏发育间的相互关系和作用机制。方法:HE染色观察SD大鼠胚胎心脏发育变化;半定量PCR法检测TGF-β1、Smad4在E11-E19心脏中的表达情况。结果:E11-E19SD大鼠心脏由原始心管状发育成为形态和功能都较成熟心脏。TGF-β1和Smad4表达由弱到强再减弱;TGF-β1表达高峰出现在E14,Smad4高峰出现在E17。结论:对SD大鼠心脏E11至E19连续观察为了解胚胎心脏发育过程提供了有价值的参考依据,TGF-β1/Smad4信号通路在SD大鼠胚胎心脏发育不同期间发挥着不同的作用。E11-E12主要起促进细胞增殖的作用;在E13-E15过程中主要发挥诱导细胞分化的功能,E16-E19起到维持细胞增殖和分化作用。
摘要:患者男,50岁,主因胸闷、憋气4h双下肢无力、腰痛3h收入干部病房治疗。入院前4h因与人争吵生气后出现阵发性胸闷、憋气伴大汗,后憋气减轻,3h前出现双下肢无力、
摘要:目的:应用腺病毒为载体在体内过表达Apelin基因,研究Apelin对于心力衰竭的保护作用。方法:SD大鼠随机分为4组,其中3组行冠状动脉结扎术:空白对照组control(心衰大鼠尾静脉注射生理盐水500μL);病毒对照组Ad-GFP(心衰大鼠尾静脉注射Ad-GFP500μL);治疗组Ad-Apelin(心衰大鼠尾静脉注射Ad-Apelin500μL);另外一组为假手术组sham。各组大鼠均于术后24h单次尾静脉注射给药,并于术后14d进行第二次尾静脉注射。于首次注射后第3天随机取出心、肾及主动脉组织,荧光显微镜下观察Ad-Apelin被组织吸收的情况。用Westernblot方法检测心肌组织Apelin的表达。用多普勒超声心动图、血流动力学测定和心肌梗死面积测定来评价心脏功能的变化。结果:心脏、主动脉、肾脏组织都可见大量绿色荧光表达,治疗组(Ad-Apelin)心肌、主动脉组织内Apelin蛋白表达显著增加,超声、血流动力学及心肌梗死面积测定结果均显示过表达Apelin的心衰大鼠心脏收缩功能明显改善,心肌形态得到一定的改善。结论:Apelin基因过表达对于心力衰竭大鼠有明显的心脏保护作用。
摘要:目的:通过观察大鼠追赶肥胖过程中瘦素水平及瘦素受体mRNA(OBRb-mRNA)表达变化进一步揭示追赶肥胖发生机制。方法:5周龄Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后随机分为对照组(NC)和追赶肥胖组(RN),NC组持续开放饮食,RN组给予半量饮食喂养4周(S4)后自由开放饮食8周。在造模过程中检测大鼠进食量、体重变化。分别于实验第0、4、6、8、12周采集血液并剥离内脏脂肪,测内脏脂肪(以两侧肾周及附睾脂肪为代表)重量/体重比值(以两侧肾周及附睾脂肪为代表);用ELISA法测血清瘦素水平及RT-PCR检测内脏脂肪OBRb-mRNA表达。结果:实验第4周,与NC组比较,RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值明显降低(P〈0.05),内脏脂肪OBRb-mRNA表达增强,但无统计学意义。开放喂养后RN组血清瘦素水平、内脏脂肪/体重比值呈时间依赖性升高,于第8周时显著高于NC组(P〈0.05);而脂肪组织OBRb-mRNA表达逐渐降低,于第6周时明显低于NC组(P〈0.05)。结论:在追赶生长过程中内脏脂肪组织OBRb-mRNA表达下降导致瘦素抵抗可能是造成内脏脂肪堆积的因素之一。
摘要:目的:研究TSPOT-TB试剂盒在结核病临床诊断中的应用价值。方法:应用TSPOT-TB试剂盒检测结核感染组(包括26例临床已确诊结核病患者和4例PPD强阳性志愿者)和非结核感染组(包括20例PPD阴性的非结核病患者和10例PPD阴性的健康对照者)外周血单个核细胞,观察斑点形成细胞(SFC)的数量。结果:30例结核感染组中,28例(93.3%)TSPOT-TB检测阳性,其中4例PPD强阳性志愿者检测均为阳性;30例非结核感染组中,仅1例(3.4%)TSPOT-TB检测阳性。TSPOT-TB阳性组的SFC显著高于TSPOT-TB阴性组。在29例TSPOT-TB阳性者中,31.0%检测孔A(ESAT-6抗原)和B(CFP-10抗原)均阳性,44.8%仅检测孔A阳性,24.2%仅检测孔B阳性。结论:TSPOT-TB试剂盒在检测结核感染、辅助结核病诊断方面具有很高的应用价值。
摘要:目的:评价利用肛门括约肌控尿的乙状结肠新膀胱术在治疗男性膀胱癌中的临床效果。方法:回顾性分析1999年6月至2008年3月16例男性膀胱全切、利用肛门括约肌控尿的乙状结肠新膀胱尿流改道患者资料。患者年龄48~83岁,平均61岁。均为膀胱移行细胞癌,T2N0M014例,T3N1M02例。术中利用远端乙状结肠20cm,去管化重建成近似球形的新膀胱,双输尿管与新膀胱抗返流吻合,并恢复肠道的连续性。结果:手术时间3~4h,平均3.5h。输血量200~600mL,平均400mL。无术中和术后早期并发症。术后3个月膀胱容量350~550mL,平均460mL,无残余尿及尿失禁。术后6个月尿流动力学检查4例,患者最大尿流率19.4~78.4mL/s,平均38.1mL/s,最大排尿压23.6~63.4cmH2O,平均45.0cmH2O。1例出现盆腔转移,1例偶有发热,无尿道肿瘤复发,肾功能和电解质正常。结论:利用肛门括约肌控尿的乙状结肠新膀胱术并发症少,排尿和控尿功能满意,是一种安全、有效的尿流改道方法。