实用医学杂志 北大期刊 统计源期刊

实用医学 2010年第13期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

肝肾综合征的发病机制及早期诊断研究进展2267-2269

摘要：肝肾综合征（hepatorenalsyndrome．HRS）是肝硬化或其他严重肝病时发生的一种预后极差的严重并发症．以肾功能衰竭、血流动力学改变和内源性血管活性系统激活．肾动脉显著收缩导致肾小球滤过率降低为特征，临床以少尿或无尿及血尿素氮、肌酐升高等为主要表现，但肾脏无器质性病变。在肝功能衰竭患者中．HRS发生率为60％～80％。一旦发生HRS，治疗相当困难，预后差，3个月病死率高达80％～100％。迄今为止，HRS的金标准治疗为肝移植。用血管升压素拮抗剂做维持治疗。

实用医学杂志病例报告

彩超诊断异位妊娠与黄体同时破裂1例2269-2269

摘要：患者女，35岁，已婚，停经40＋d，于2009年9月21Et下腹坠痛3h．急诊人院。患者既往月经规律，末次月经2009年8月10日。查体：T36．3℃，P78次／min。BP100／70mmHg。急性病容，被动体位。妇科检查：外阴发育正常，已婚经产型。宫颈光，举痛阳性。附件：双侧压痛阳性，右侧明显，因腹肌紧张，未触及明显包块。

实用医学杂志基础研究

氧化铁磁性纳米颗粒作为MDR1反义寡聚核苷酸载体的构建2270-2273

摘要：目的：构建磁性纳米MDR1反义探针，评价以氧化铁磁性纳米颗粒作为载体转染MDR1反义基因的可行性。方法：应用多聚赖氨酸修饰葡聚糖包裹氧化铁纳米颗粒（dextrancoatedironoxidenanopartieles），并将此复合物与肿瘤多药耐药反义基因结合。采用琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性纳米颗粒结合MDR1反义基因的能力，结合氧化铁纳米颗粒作为载体进行荧光标记的反义寡聚脱氧核苷酸（asODN）体外细胞转染实验。结果：琼脂糖凝胶电泳显示纳米氧化铁在不同的pH值及各种质量比均有良好的DNA结合能力。纳米氧化铁可作为基因载体将MDR1反义基因转染细胞，荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞，普鲁士蓝铁染色观察到细胞内的蓝色铁颗粒。结论：成功构建了MDR1反义基因磁性纳米颗粒。纳米氧化铁可作为基因载体转染人细胞。

MGMT基因重组腺病毒载体的构建2273-2276

摘要：目的：构建表达人O6-甲基乌嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因重组腺病毒载体。方法：提取人肝组织总RNA，利用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）克隆人肝细胞MGMT基因，将PCR产物连接入pBS-T原核载体，阳性重组子以双酶切及PCR鉴定。将目的基因MGMT片段亚克隆至腺病毒质粒pacAd5CMVmcsIRESeGFPpA，构建重组腺病毒载体pacAd5CMVmcsIRESeGFPpA—MGMT。结果：构建了人MGMT基因的重组腺病毒载体。结论：本研究成功构建了含MGMT基因的重组腺病毒载体，为进一步研究耐药基因MGMT在烷化剂治疗中对真核细胞的保护作用提供了有力的工具。

中华眼镜蛇毒组分诱导人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞凋亡的研究2277-2280

摘要：目的：探讨中华眼镜蛇毒组分（najanajaactravenomcomponent，NNAVC）诱导KG1a细胞凋亡及相关机制。方法：以NNAVC作用人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞，台盼蓝拒染法测定细胞毒性，流式细胞仪测细胞凋亡率，RT—PCR测细胞凋亡相关基因（Bax、Bak、Bcl-2）的表达。结果：NNAVC对KG1a细胞有显著的细胞毒性作用，能诱导KG1a细胞凋亡，促凋亡作用可能与Bcl-2表达下调和Bax表达上调有关。结论：NNAVC通过调节抗／促凋亡分子诱导KG1a细胞凋亡．提示NNAVC具有治疗复发难治性白血病的应用前景。

胶体金免疫层析法检测大肠杆菌O157：H7的实验研究2280-2283

摘要：目的：建立一种简单实用的胶体金免疫层析法用于食品样品中大肠杆菌O157：H7的快速筛查。方法：采用柠檬酸三纳还原法制备胶体金颗粒．标记抗E．coli0157：H7单克隆抗体．制备免疫胶体金复合物，组装胶体金免疫层析快速检测试纸条，并对其特异性、灵敏度和稳定性进行了测试和评价。结果：该试纸条特异性较好．不与其他受试菌株发生交叉反应，检测灵敏度为10^5CFU／mL。120份人工污染E．coliO157：H7模拟食品样本增菌后检测，该法检测阳性118份，灵敏度高达98．3％。结论：本实验成功研制了E．coliO157：H7胶体金免疫层析试纸条，该试纸条具有灵敏度高、特异性好、检测速度快、操作简便等优点，可用于现场大量样品的初筛。

幽门螺杆菌内毒素分子对肝细胞Toll样受体2表达的影响2283-2285

摘要：目的：探讨幽门螺杆菌（却）内毒素分子对肝细胞Toll样受体2表达的影响。方法：却培养及提取内毒素，应用体外培养技术培养肝癌细胞株HepG2，将内毒素和HepG2混合孵育，采用免疫组化法检测Toll样受体2在细胞上表达的水平。结果：不同浓度的内毒素作用于HepG2细胞24h后均有Toll样受体2表达，不同浓度内毒素实验组肝组织上的Toll样受体2表达均比对照组明显增强。结论：脂多糖可能与肝细胞Toll样受体2结合，促使肝细胞Toll样受体2表达上调，参与肝脏疾病的发病机制。

姜黄素对肝癌细胞耐药基因表达的影响2285-2288

摘要：目的：研究姜黄素对人肝癌细胞Huh7和Hep3B中耐药基因（MDR1、MRP1和DRG2）表达的影响，探讨姜黄素诱导肝癌细胞凋亡的分子作用机制。方法：以DAPI核染色法研究姜黄素对不同肝癌细胞的凋亡诱导作用。利用JC一1染料进行线粒体染色研究姜黄素对Huh7和Hep3B细胞线粒体膜电位的影响。通过半定量PCR（RT—PCR）检测姜黄素对耐药基因表达的影响。结果：姜黄素可以显著抑制Huh7细胞中耐药基因MRP1的表达。结论：姜黄素可能通过抑制耐药基因MRP1的表达诱导肝癌细胞Huh7凋亡。

实用医学杂志实验研究

黄芩苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响2289-2292

摘要：目的：观察黄芩苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影v向。方法：30只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照纽、糖尿病组、黄芩苷组（均n=10）。对照组喂养普通饲料，糖尿病纽及黄芩苷组喂养高糖高脂饲料。喂养6周后．糖尿病组及黄芩苷组一次性腹腔注射链尿佐菌素30mg／kg，1周后建立糖尿病模型。黄芩苷组灌胃黄芩苷150rag／（kg·d），糖尿病组和对照组用等容量生理盐水灌胃。灌胃12周后，测定24h摄食量、体重、空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白水平，采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率．免疫组化法检测survivin蛋白的表达。结果：与对照组比较，糖尿病组及黄芩苷组24h摄食量、空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯、低密度脂蛋白水平升高（P〈0．05或P〈0．01），体重、高密度脂蛋白水平下降（P〈0．05或P〈0．01），心肌细胞凋亡率显著升高（P〈0．01），survivin蛋白表达水平下降（JP〈0．01），胆固醇水平差异无显著性（P〉0．05）：与糖尿病组比较，黄芩苷组24h摄食量、空腹胰岛素、甘油三酯水平下降（P〈0．05或P〈0．01），体重显著升高（P〈0．01），空腹血糖、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平差异无显著性（P〉0．05），心肌细胞凋亡率下降（P〈0．01），survivin蛋白表达水平升高（P〈0．01）。结论：黄芩苷可以抑制糖尿病大鼠心}儿细胎．凋亡茸作用机制可能与凋亡基因survivin袁达有关．

REM睡眠剥夺对大鼠焦虑行为的影响及瘦素的作用2292-2295

摘要：目的：研究REM睡眠剥夺对大鼠焦虑行为的影响及瘦素的作用。方法：成年雄性Wistar大鼠90只随机分为9组（n=10），分别为生理盐水群居对照（Ns）24h、72h、120h组；生理盐水REM睡眠剥夺（NSSD）24h、72h、120h组和瘦素REM睡眠剥夺（L—SD）24h、72h、120h组。均为腹腔注射给药。大鼠的REM睡眠剥夺模型采用小平台水环境法建立，大鼠的焦虑行为采用高架十字迷宫（elevatedplus—maze，EPM）测试，分别观察瘦素和生理盐水对REM睡眠剥夺（SD）大鼠（第24、72、120小时）焦虑行为的影响。结果：成功建立REM睡眠剥夺模型及高架十字迷宫焦虑模型。大鼠焦虑行为结果：（1）与NS组相比．NS．SD组在24h（F=5．32，P=0．01）和120h（F=15．06，P=0．00）时EPM的总次数增加，L=SD组在120h时的总次数降低；（2）NS=SD组在120h时的开臂次数％（X2=21．55，P=0．00）和开臂时间％（X2=22．53，P=0．00）均显著增加。L=SD组在120h时的开臂次数％和开臂时间％显著减少。结论：REM睡眠剥夺与大鼠焦虑行为的变化呈时间相关性，瘦素可减少长期REM睡眠剥夺导致的大鼠焦虑行为。因此．瘦素可能参与了REM睡眠剥夺的抗焦虑作用。

血管紧张素转换酶2在糖尿病大鼠早期心肌组织中的表达2296-2298

摘要：目的：观察糖尿病早期大鼠心肌组织中血管紧张素转换酶2（ACE2）mRNA的表达。方法：将21只8周龄雄性Wistar大鼠，随机分为正常对照组（n=7）和糖尿病组（n=14），一次性腹腔注射链脲佐菌素55mg／kg．72h后血糖大于16．7mmol／L纳入糖尿病组，饲养12周。采用实时定量PCR（RT—PcR）检测正常及糖尿病大鼠心肌组织ACE2的基因表达。结果：与正常对照组相比，糖尿病组大鼠心肌组织ACE2mRNA表达显著增加（P〈0．05）。结论：在糖尿病早期，大鼠心肌组织ACE2mRNA的表达增加。

链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型2299-2301

摘要：目的：研究如何运用链脲佐菌素（streptozotoein，STZ）结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型。方法：40只健康雄性SD大鼠随机分为高脂组、糖尿病对照组、正常组。高脂组用STZ60mg／kg一次性左下腹腔注射，并结合4周的高糖高脂饮食。糖尿病对照组用相同剂量STZ一次性左下腹腔注射，普通饲料喂养4周。正常组用相同剂量的柠檬酸缓冲液一次性左下腹腔注射，普通饲料喂养4周。于注射药物后72h及1、4、8、12周等不同时间点测量空腹体重、血糖、尿糖等指标，进行统计分析。结果：高脂组与糖尿病对照组、正常组相比空腹血糖、体重明显增加，差异有显著性（P〈0．05）。高脂组与糖尿病对照组相比血糖增高并能保持长时间的稳定、尿糖强阳性。结论：STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食4周可成功诱导2型糖尿病大鼠模型。

福莫特罗对过敏性哮喘大鼠气道中嗜酸性粒细胞浸润的抑制作用2302-2305

摘要：目的：研究福莫特罗对过敏性哮喘大鼠嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）炎症的作用，探讨影响肺组织内嗜酸性粒细胞浸润的机制。方法：48只雄性Wistar大鼠随机分为6组：正常对照组（A）、哮喘模型组（B）、小剂量（0．08mg／kg）~莫特罗组（c）、中剂量（0．12mg／蚝）福莫特罗组（D）、大剂量（O．16mg／kg）福莫特罗组（E）、地塞米松（0．5mg／kg）组（F），每组8只。卵蛋白致敏诱发建立哮喘大鼠模型，福莫特罗口服，地塞米松腹腔注射给药7d。常规HE染色观察病理变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测肺组织匀浆中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophilcationicprotein，ECP）的含量。结果：（1）A组气道炎症没有明显变化；B组炎症变化明显，大量EOS浸润，较A组差异有显著性（P〈0．01）；各用药组炎症有所减轻，浸润EOS数量明显减少（P〈0．01）。（2）B组嗜酸性粒细胞趋化活化因子（eotaxin）较A组显著升高（P〈0．01）；各用药组下降（P〈0．05）。各用药组eotaxin与EOS数量呈正相关。（3）B组ECP含量较A组显著升高（P〈0．01）；各用药组均低于B组（尸〈0．01）。结论：（1）哮喘气道中嗜酸性粒细胞增多。福莫特罗能够明显降低气道中EOS数量。与抑制EOS趋化有关。（2）福莫特罗可能是通过减少肺组织内eotaxin的表达来抑制EOS趋化的。（3）福莫特罗能够抑制EOs活化，减少肺组织中的ECP含量。

不同剂量芹菜素对急性局灶性大鼠脑缺血／再灌注损伤神经保护作用的影响2305-2307

摘要：目的：观察不同剂量芹菜素对急性局灶性大鼠脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用．探讨发挥芹菜素脑保护作用的适宜剂量。方法：采用改良线栓法建立局灶性脑缺血／再灌注模型，对大鼠进行神经行为学评分，测定脑组织含水量、伊文思蓝（EB）和丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化以及芹菜素对上述变化的影响。，结果：模型组和芹菜素组的神经行为学评分、脑含水量、EB及MDA含量均显著升高，SOD活性显著降低；和模型组比较．芹菜素组可降低神经行为学评分、脑含水量、EB及MDA含量，提高SOD活性，其中以中剂量组（25mg／kg）改变最为明显。结论：芹菜素以中剂量组（25mg／kg）对急性缺血／再灌注脑损伤的保护作用最为显著。

实用医学杂志临床研究

高危型人乳头状瘤病毒对评估宫颈电圈切除术治疗宫颈上皮内瘤样病变预后的意义2308-2310

摘要：目的：探讨检测高危型人乳头状瘤病毒（HPV）对评估宫颈电圈切除术（LEEP）治疗宫颈上皮内瘤样病变（ON）预后的意义。方法：对560例经阴道镜下宫颈活检证实为CIN的患者进行LEEP治疗，治疗后随访1年．检测治疗前后高危型HPV的负荷量，对病灶持续存在或复发等情况进行回顾性分析总结。结果：术前病理为CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ的三组患者，其高危型HPV感染率分别为32．63％、90．85％和98．13％。前组（低度宫颈上皮内瘤样病变组）与后两组（高度宫颈上皮内瘤样病变组）高危型HPV感染率差异均有统计学意义（P〈0．001），高危型HPV感染率随宫颈病变严重程度的加重而上升。术后6个月CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ三组患者高危型HPV感染率分别为2．54％、12．80％和25．23％，术后1年三组患者高危型HPV感染率分别为0．88％、9．15％和22．43％，与术前比较，三组高危型HPV感染率均显著下降（P〈0．001）；CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ三组患者术后的病变持续存在率分别为1．69％、6．71％和12．15％，复发率分别为0、7．32％和10．28％．前组与后两组术后病变的持续存在率和复发率差异存在显著性（P〈0．001），术后高危型HPV持续阳性可提示病变的持续存在或复发。结论：LEEP能显著降低CIN患者高危型HPV感染率，有效治疗宫颈上皮内瘤样病变．术后检测高危型HPV病毒负荷量能判断疾病预后。

SLO1B1和CYP2C9联合突变对那格列奈降血糖效果的影响2311-2313

摘要：目的：研究SL0181521T〉C变异以及SL0181521T〉C和CYP2C9}3的联合突变对口服降糖药那格列奈的降血糖效果的影响。方法：对48名健康志愿者（12例SLC0181521TT／CYP2C9＊1基因型，14例SLC0181521TT／CYP2C9＊3基因型．12例SLC0181521TC／CC／CYP2C9＊1基因型．10例SLC0181521TC／CYP2C9＊3基因型）单次口服120mg那格列奈，分别在给药前和给药后0．25、0．5、O，75、1、1．5、2、3、4、6、8h采血．用自动生化分析仪进行血糖浓度分析。结果：单一的SL0181521T〉C多态和CYP2C9{3多态对于那格列奈的降血糖效果与野生型对照组比较差异无显著性。联合突变组在最大血糖升高值，0～4h和0．8h的血糖浓度平均变化值与野生型组比较差异无显著性，但是在最大血糖降低值与野生型对照组和SL0181521T〉C突变组比较差异有显著性意义（P=0．027，P=0．048）。结论：在健康受试者，单一及联合的SL0181和CYP2C9多态性对那格列奈降血糖效果没有显著影响：但是在2型糖尿病患者中，有关影响需要进一步的研究。

抵抗素基因启动子-420C／G多态性与非酒精性脂肪性肝病的关系2314-2316

摘要：目的：探讨抵抗素基因启动子-420C／G多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的关系及其对血浆抵抗素水平的影响。方法：选择82例NAFLD患者（NAFLD组）和98例健康人群为研究对象（NC组）．采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术检测不同组别抵抗素基因-420C／G位点多态性．酶联免疫方法（ELISA）测定空腹血浆抵抗素水平。结果：NAFLD组和NC组抵抗素基因-420C／G基因型和等位基因频率比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；等位基因频率的相对风险分析显示，G等位基因携带者患NAFLD的相对风险是c等位基因的1．886倍；NAFLD组的血浆抵抗素水平明显高于NC组（P〈0．01）。结论：抵抗素基因启动子-420位点C／G多态性影响血清抵抗素水平并可能与NAFLD有关联，其中G等位基因可能是NAFLD发病的遗传易感基因。

支气管哮喘控制程度与痰液嗜酸性粒细胞、白细胞介素-5的关系2316-2318

摘要：目的：通过研究糖皮质激素（ICS）治疗轻中度哮喘过程中哮喘控制程度与诱导痰中的嗜酸性粒细胞（EOS）、白细胞介素-5（IL-5）的动态变化，探讨动态监测痰液炎性标志物评估哮喘控制程度的可行性。方法：收集符合标准的轻中度哮喘患者，年龄大于14岁，平均年龄39．6岁，根据症状评分、最大呼气峰流出值（PEF）及既往治疗情况分层（组），给予不同剂量的舒立迭（或等剂量其他激素）吸入治疗。测定达到完全控制时的哮喘症状积分、PEF、诱导痰EOS计数及IL-5浓度。结果：40例经规范的激素治疗后达到了GINA方案中完全缓解的标准。达到完全控制平均时间为2周。哮喘患者临床症状积分、PEF、EOS计数及IL-5浓度在治疗后改善明显（P〈0．001）。结论：哮喘症状评分、PEF与气道炎症改变可能不完全符合，诱导痰作为目前最简便的无创性气道研究方法，为临床和实验工作提供了更广阔的操作平台。如能在哮喘疾病发展进程中动态监测痰液中EOS计数、IL-5浓度，能够较准确客观地反映气道炎症的变化情况，并可进一步通过其水平变化调整LABA＋ICS治疗方案。