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实用医学 2008年第17期杂志 文档列表

实用医学杂志临床新进展

脑静脉血栓的影像学研究进展2917-2918

摘要：脑静脉血栓（cerebral venous thrombosis,CVT）是脑血管疾病中的一种特殊类型,影像学技术的发展在CVT的早期诊断和指导治疗方面起着重要作用。磁共振成像（MRI）、磁共振静脉造影（MRV）、对比增强MRV和脑CT静脉造影（CTV）对CVT高度敏感,可早期显示本病的直接和间接征象,反映病理演变及评价治疗效果,是无创伤性、较理想的诊断方法。MRV与MRI结合使用可提高诊断的可靠性,

慢性阻塞性肺疾病的长期家庭氧疗研究进展2919-2920

摘要：慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）是21世纪严重影响人类健康的重大疾病之一,据WHO《全球疾病负担研究》的估计,当前世界上约有6亿COPD患者,在1990年其已成为全球第6位死亡原因,预计到2020年将成为第5位死亡原因。

原发性小肠淋巴瘤的临床病理特征及其诊疗进展2921-2923

摘要：原发性胃肠道淋巴瘤（primary gastrointestinal lymphoma,PGIL）是最常见的结外淋巴瘤,病理类型主要为非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin′s lymphoma,NHL）,

实用医学杂志病例报告

少年小细胞肺癌1例2923-2923

摘要：患者男,16岁（高中生）。2006年6月底患者因受凉出现刺激性咳嗽及咳痰,伴低热。经过一般的抗炎及止咳治疗后无效,症状逐渐加重。8月初胸部CT检查发现：右侧肺门占位病灶（5cm×4cm×4.6cm）伴纵隔内淋巴结明显增大。第3次支纤镜活检病理检查为：未分化小细胞癌。

实用医学杂志基础研究

甜菜碱提高长距离PCR扩增效率的研究2924-2926

摘要：目的：利用甜菜碱优化长距离PCR（LD-PCR）,提高血友病A（HA）基因倒位检测效率。方法：在LD-PCR反应体系中加入DMSO、甘油及不同浓度的甜菜碱进行LD-PCR扩增,比较扩增结果。用甜菜碱优化LD-PCR检测正常人、不同程度HA患者及携带者的FⅧ基因是否存在FⅧ基因22号内含子（IVS22）倒位。结果：在反应体系中加入甜菜碱可获得更好的LD-PCR扩增结果;甜菜碱优化LD-PCR的最佳终浓度为0.8～1.8mol/L;应用甜菜碱优化LD-PCR检出3例HA患者、2例携带者和1例可疑携带者FⅧ基因有IVS22倒位。结论：一定浓度的甜菜碱可以显著提高LD-PCR的扩增效率,提高检测出HA患者的FⅧ基因IVS22倒位的效率。

实用医学杂志病例报告

戒指损伤并卡压手指急诊处理1例2926-2926

摘要：患者男,20岁。因翻墙时挂住戒指后划伤并卡压左手环指2h余入科。伤后患指出现肿胀,伤口有渗血,疼痛明显,因戒指卡压在指根部,而伤口在卡压部远端,故不能取出,自行用剪刀试徒剪开戒指未果,手指肿胀逐渐加重,并出现远端青紫,故来就诊。查体：金属工艺戒指（具体材料不详）环形闭合,卡压在左无名指根部,

实用医学杂志基础研究

葡萄糖对传代内皮细胞活性氧代谢与细胞因子单核细胞趋化蛋白-1表达的影响2927-2930

摘要：目的：在不同浓度的葡萄糖培养条件下,探讨内皮细胞传代过程中活性氧（ROS）的代谢异常及其对单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法：人脐静脉内皮细胞培养和传代后,选取第2、6代细胞分别在5.5mmol/L或16.5mmol/L葡萄糖培养基中培养,以培养0、12、24、48h为各时间观察点。流式细胞术检测细胞ROS含量,半定量逆转录聚合酶链式反应检测MCP-1的表达。结果：（1）第2代细胞经5.5mmol/L葡萄糖培养,ROS水平相对稳定。经16.5mmol/L葡萄糖培养,ROS则呈时间依赖性增加,培养24h和48h后分别较加入葡萄糖培养前增加56.5%和69.2%。同葡萄糖浓度培养下,各时间点第6代细胞ROS检测值均较第2代细胞有显著意义的增加（均P〈0.01）。（2）第2代细胞经5.5mmol/L葡萄糖培养24h后MCP-1 mRNA表达开始上升,可见MCP-1 mRNA表达与时间相关。高葡萄糖培养与低葡萄糖相比,同时间点的MCP-1 mRNA表达均有显著性增强（P〈0.01或P〈0.05）。同浓度葡萄糖作用下,第6代细胞MCP-1 mRNA表达总体上高于第2代细胞。结论：高浓度葡萄糖培养在进一步提高传代内皮细胞ROS量的同时,促进了MCP-1 mRNA的表达,提示高糖促MCP-1表达作用可能也是通过ROS增加介导的。

血管内皮生长因子、转化生长因子岛及树突状细胞在膀胱癌中的表达及其临床意义2930-2932

摘要：目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子岛（TGF-β1）和树突状细胞（DC）在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化双重染色法检测35例膀胱癌冰冻组织切片中DC的表型及肿瘤细胞中VEGF、TGF-β1的表达。结果：膀胱癌组织中CD1阳性DC较正常膀胱组织低表达,差异有显著性（P〈0.05）;肿瘤组织中VEGF、TGF-β1的表达明显高于正常膀胱组织,差异有显著性（P〈0.001）;膀胱癌旁组织中VEGF、TGF-β1的表达与正常膀胱组织差异无显著性（P〉0.05）。结论：膀胱移行细胞癌组织中DC存在免疫功能缺陷,而肿瘤组织局部分泌VEGF、TGF-β1可能是导致DC免疫功能缺陷的原因之一。

卡莫司汀对人脑肿瘤干细胞增殖及细胞周期的影响2933-2936

摘要：目的：探讨卡莫司汀（BCNU）对人脑肿瘤干细胞在细胞增殖及细胞周期方面的影响。方法：取初发的室管膜瘤手术切除标本1例,取材后制备为单细胞,分别接种于无血清培养基获得肿瘤干细胞,接种于含血清培养基获得肿瘤细胞。不同浓度的BCNU作用于细胞72h后,MTT法检测细胞在体外对BCNU的敏感性,并用终浓度为0.01μg/mL的BCNU作用细胞不同的时间段,通过流式细胞仪检测BCNU对细胞周期的影响。结果：（1）MTT显示,BCNU能抑制肿瘤干细胞及肿瘤细胞的生长,其对肿瘤干细胞（IC50=0.157μg/mL）的抑制略低于对肿瘤细胞（IC50=0.072μg/mL）（P〈0.05）。（2）细胞周期方面,与阴性对照比较,两类细胞均表现为随药物作用时间的延长,S期细胞比例增高,并伴有凋亡细胞的增多,但肿瘤干细胞的改变（24h）出现晚于肿瘤细胞（6h）。结论：BCNU对体外培养的脑肿瘤干细胞生长有明显的抑制作用,作用机制可能为通过干扰S期DNA的合成起作用;与脑肿瘤细胞相比,脑肿瘤干细胞在MTT及细胞周期的检测中,均表现出对BCNU有一定的耐药性。

Survivin反义寡核苷酸联合AsI_3-cys对K562细胞凋亡的影响2936-2938

摘要：目的：探讨Survivin反义寡核苷酸（ASODN）联合AsI3-cys对K562细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的诱导作用。方法：K562细胞体外培养,人工合成并硫代修饰Survivin ASODN,通过脂质体转染进入K562细胞,同时与AsI3-cys联用,MTT法检测细胞增殖抑制程度,Tunel法检测细胞凋亡指数,RT-PCR检测细胞中Survivin mRNA的表达水平,流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果：Survivin ASODN各浓度组对K562细胞的增殖有明显的抑制作用,能明显诱导细胞凋亡,联用组诱导K562细胞凋亡的能力与其他组相比在统计学上差异有显著性。结论：Survivin ASODN能够诱导K562细胞凋亡,并提高K562细胞对AsI3-cys的敏感性。

免疫磁珠法检测外周血微转移前列腺癌细胞的方法学探讨2939-2942

摘要：目的：探讨前列腺癌外周血微转移免疫磁珠检测方法学的建立及其意义。方法：体外培养前列腺癌LNCaP细胞,将其分别与外周血单个核细胞（PBMC）及全血细胞混合,混合细胞悬液和事先已与单克隆抗体（鼠抗人PSMA单抗）预孵育的包被人抗鼠IgG抗体的磁珠作用,在磁架上分离,显微镜观察,计算玫瑰花环形成率,并进行灵敏度的检测。台盼蓝染色检测分选前后癌细胞存活率。结果：免疫磁珠检测法敏感性高,当PBMC与LNCaP细胞比例为106：1时可以检测到癌细胞,检测灵敏度为20个肿瘤细胞/mL外周血。分选后癌细胞活率较之分选前未明显改变。结论：免疫磁珠法是一种简便、快速、灵敏并且临床实用价值高的检测技术,可为临床早期发现前列腺癌微小残留提供新的思路,有助于前列腺癌的治疗和预后判断。

子宫平滑肌瘤组织中Annexin Ⅰ的表达及其意义2942-2944

摘要：目的：探讨Annexin Ⅰ在子宫平滑肌瘤中的表达及其与子宫平滑肌瘤发生、发展的关系。方法：选取温州医学院附属第二医院2006-2007年经病理证实的子宫平滑肌瘤标本50例,以及距离包膜2cm以外的瘤旁正常子宫肌层标本50例。应用SP免疫组织化学法检测30例子宫平滑肌瘤及其瘤旁正常子宫肌层组织中Annexin Ⅰ的蛋白水平,应用RT-PCR法检测20例子宫平滑肌瘤及其瘤旁正常子宫肌层组织中Annexin Ⅰ的mRNA水平的表达情况。结果：不管是mRNA水平还是在蛋白水平,正常子宫肌层Annexin Ⅰ高表达,子宫平滑肌瘤组织Annexin Ⅰ低表达,两组间表达差异具有显著性（P〈0.01）。结论：Annexin Ⅰ表达下调与子宫平滑肌瘤发生发展密切相关,可作为研究子宫平滑肌瘤发病机制的重要指标。

实用医学杂志实验研究

SD大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性鉴定2945-2947

摘要：目的：探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs）体外分离培养方法,鉴定其生物学特性,为BMSCs应用奠定技术基础。方法：无菌条件下分离SD大鼠股、胫骨,用无血清培养液（α-MEM培养基、100U/mL青霉素,100U/mL链霉素）冲出骨髓,采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离纯化rBMSCs,通过传代培养,扩增rBMSCs。倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,绘制细胞生长曲线。免疫细胞化学染色测定rBMSCs表面标志,成骨诱导试剂盒检测rBMSCs向成骨分化的潜能。结果：镜下rBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长。生长曲线分析rBMSCs贴壁2d基本无增殖,处于潜伏期,对数增殖期为3～6d,第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象。rBMSCs表面标志显示第3代rBMSCs纯度可达99%以上,其细胞表型CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。向成骨诱导rBMSCs10d后细胞表现成骨细胞特性,碱性磷酸酶活性明显增高。结论：本实验从细胞取材、细胞接种密度、条件培养基到细胞微环境等各方面的方法进行了优化,建立了一种理想的体外分离扩增rBMSCs的培养体系。实验结果表明所分离培养的rBMSCs纯度高、扩增迅速、生物学形状稳定,可为组织工程提供比较理想的种子细胞,为进一步研究BMSCs生物学行为及临床研究和应用奠定了坚实的基础。

去铁胺对大鼠肺组织低氧诱导因子-1表达及对模拟高原低氧大鼠肺组织结构的影响2948-2951

摘要：目的：观察去铁胺对大鼠肺组织低氧诱导因子-1（HIF-1α）表达及对模拟高原低氧环境下肺结构的影响。方法：实验分成两部分,（1）25只Wistar大鼠随机分成5组,腹腔注射去铁胺（DFX）200mg/kg后,分别用RT-PCR和免疫组化方法在各个时相点（0、2、4、8、24h）检测肺组织HIF-1α mRNA和蛋白质的表达。（2）40只Wistar大鼠随机分成5组,每组8只。常氧对照组（N）,急性低氧对照组（H0）,急性低氧组（H1）,DFX处理组（DFX0）,DFX处理＋急性低氧组（DFX1）。各组动物经相应处理后,测定N、H0、DFX0组肺组织HIF-1α mRNA,观察N、H1、DFX1组肺显微及超微结构变化并检测肺组织一氧化氮浓度及Na＋-K＋-ATP酶活性。结果：（1）大鼠腹腔注射DFX后肺组织未表达HIF-1α蛋白质,对照组（0h）大鼠肺组织少量表达HIF-1α mRNA,2h后开始升高,4h达峰值（P〈0.01）,以后逐渐下降,24h后基本恢复到正常对照组水平。（2）大鼠腹腔注射DFX200mg/kg,1次/d,5d后,DFX0组HIF-1α mRNA表达水平显著高于H0和N组（P〈0.01）。（3）经模拟海拔6000m急性低氧24h后,H1组肺组织NO浓度和Na＋-K＋-ATP酶活性低于N组（P〈0.01）,而DFX1较H1组明显升高（P〈0.01）。（4）经模拟海拔6000m急性低氧24h后,H1组肺出现明显的间质性水肿,而DFX1组则水肿明显减轻。结论：DFX可以促进大鼠肺组织表达HIF-1α mRNA;间断腹腔注射DFX可以减轻大鼠低氧性肺间质水肿并提升肺组织NO浓度和Na＋-K＋-ATP酶活性。

洗胃对兔口服百草枯急性中毒的治疗作用2952-2954

摘要：目的：探讨洗胃对兔口服百草枯急性中毒的治疗作用。方法：对随机分组的日本大耳白兔灌胃高剂量或低剂量百草枯,分别在灌胃后不同时间启动洗胃。比较各组兔血百草枯浓度、肺病理改变、兔生存情况。结果：对兔灌胃百草枯10min后启动洗胃能够降低高剂量中毒组的血百草枯浓度,但不能减轻肺损伤及改善预后。对低剂量中毒组,10min后启动洗胃能减轻肺损伤并改善预后;将启动洗胃时间推迟到灌胃百草枯后30min,没有发现洗胃治疗有效。结论：对于较低剂量范围的口服百草枯急性中毒,尽早洗胃可能会改善预后。

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对胎粪诱导肺损伤中炎症反应的作用2955-2957

摘要：目的：研究胎粪吸入所致肺炎症损伤与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）两者之间的相关性及AngⅡ受体拮抗剂的抗炎作用。方法：30只S-D大鼠,随机分为生理盐水对照组、胎粪吸入组和拮抗剂治疗组,每组10只。模型制备后24h取材,观察其肺组织病理损伤并检测湿/干重比及进行病理评分;检测AngⅡ在肺组织的表达情况及用图像分析方法检测其含量;测定肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量及肺匀浆髓过氧化物酶（MPO）活性。结果：胎粪组肺组织病理损伤严重,病理评分及湿/干重比较对照组和治疗组明显增加（P〈0.05）,对照组和治疗组差异无显著意义;各组间AngⅡPU值、TNF-α含量及MPO活性差异有显著性（P〈0.01）;并且各组中TNF-α含量及MPO活性与其肺组织中AngⅡPU值呈显著正相关（P〈0.01）,相关系数分别为0.744和0.747。结论：AngⅡ可增加胎粪吸入肺损伤中炎症因子和炎症细胞含量。受体拮抗剂沙拉欣的治疗可以减轻炎症反应导致的肺损伤。

心肌匀浆上清液对大鼠骨骼肌卫星细胞诱导分化的影响2957-2959

摘要：目的：探讨心肌匀浆上清液对大鼠骨骼肌卫星细胞诱导分化的影响。方法：体外培养的大鼠骨骼肌卫星细胞,检测纯度。于原代培养的第3天加入心肌匀浆液持续作用1周,3周后观察细胞形态。采用免疫组织化学的方法检测心肌特异性肌钙蛋白-T（cardiac troponin-T,cTn-T）的表达。结果：诱导培养后的大鼠骨骼肌卫星细胞不表达cTn-T蛋白。结论：骨骼肌卫星细胞在心肌匀浆诱导下没有向心肌细胞转化。

年龄对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响及其意义2960-2962

摘要：目的：研究年龄对骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）体外增殖活性的影响。方法：用贴壁法培养不同鼠龄的大鼠骨髓MSCs,流式细胞仪检测骨髓MSCs表面抗原,通过测定成纤维细胞集落形成单位（CFU-F）数及MTT法来检测骨髓MSCs的数量及增殖能力,并用ELISA法检测MSCs培养上清IL-6、干细胞因子（SCF）的水平。结果：随年龄的增加,大鼠骨髓MSCs的数量明显减少（P〈0.05）;2月龄组大鼠MSCs培养上清中IL-6、SCF含量明显高于其他组（均P〈0.05）,且高龄大鼠骨髓MSCs的增殖能力明显降低。结论：年龄增加可导致大鼠骨髓MSCs数量减少,体外增殖能力减退。