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摘要:目的:探讨扩增乙肝病毒全长基因组合适的PCR反应条件。方法:设计针对负链5’末端引物,PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因:改变PCR反应条件,决定最佳退火温度和最佳引物浓度,并观察不同乙肝病毒DNA模板量对PCR扩增效率的影响。结果:最佳退火温度为68%,最佳引物浓度为0、5umol/L,模板量在150拷贝以上能扩增出乙肝病毒全长基因.但模板量达到10^5拷贝抑制扩增效率。结论:退火温度为68%、引物浓度为0.5umol/L、乙肝病毒DNA模板量在150~10^5拷贝为乙肝病毒全长基因扩增的合适PCR反应条件。
摘要:恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histocytoma.MFH)是一种由成纤维组织细胞、组织细胞组成的多形性细胞肉瘤,1964年由O’Brien首次报道。该肿瘤罕见于肝脏。至今国内外文献报道不多。
摘要:目的:采用在原核表达系统表达的人白细胞介素31(IL-31)蛋白免疫新西兰兔.制备兔抗人IL-31多克隆抗体。方法:利用IPTG诱导入IL-31在大肠杆菌中表达.纯化人IL-31重组蛋白,免疫新西兰兔制备抗人IL-31多克隆抗体。Western.blot鉴定抗体的特异性,ELISA法测定抗体效价。荧光定量PCR检测多克隆抗体对IL-3l诱导趋化因子巨噬细胞炎性蛋白313(macrophage inflammatory protein β,MIP-3β)分泌的阻断效应。结果:人IL-31经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后可在大肠杆菌中大量表达,表达量占细菌总蛋白的30%。纯化后的蛋白纯度高。IL-31重组蛋白免疫新西兰兔,通过抗体效价测定,获得了效价达1:2560的多克隆抗体。可阻断IL-31刺激的MIP-3β的分泌。结论:原核表达的人IL-31蛋白能刺激家兔产生抗体,其多克隆抗体的效价高,具有阻断IL-31作用的生物学活性。
摘要:摘要目的:研究Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织内核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)基因mRNA表达水平与含铂类方案化疗疗效的相关性。方法:符合入选条件的患者56例,均为mb、IV期患者一所有的患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC。化疗前利用RNA提取技术及Realtime RT—PCR技术对其组织学标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析。患者分别给予4~6个周期的含铂类方案化疗(吉西他滨/顺铂、紫杉醇/顺铂方案),对患者化疗后的总生存期(overall survival,OS)、肿瘤进展时间(time to progression,TTP)及化疗后反应率(response rate,RR)进行评估。结果:56例患者活检标本的ERCC1 mRNA相对于内控管家基因GAPDH mRNA表达的平均表达水平为6.1×10^3。以ERCC1 mRNA表达水平≥6.1×10^3的22例患者作为高表达组,以ERCC1 mRNA表达水平〈6.1×10^3的34例患者作为低表达组。高表达组患者化疗后RR、OS及TTP分别为22.7%、(144、62±95.21)d及(104.25±89.78)d,与低表达组患者RR(55.9%)、OS[(432.45±134,43)d]、TTP[(278.56±104.34)d]比较,差异均有显著性(均P〈0.05)。结论:ERCClmRNA表达水平是评估晚期NSCLC患者应用铂类药物化疗疗效的一个重要因素。
摘要:目的:建立同时将13、18、21、X、Y五色探针用于分析单个卵裂球的方法。方法:收集体外受精一胚胎移植治疗周期中受精第3天.不适宜移植和冷冻的正常受精胚胎11个、双精受精胚胎1个用于研究。用Tyroae’s酸溶解这些胚胎的透明带后,用0.1%Tween-20/0.01N HCl将卵裂球固定,用Vysis公司的MultiVysion PGT FISH探针(含有13、18、21、X、Y五种染色体探针)进行分析。结果:12个胚胎共有46个卵裂球,有核的卵裂球43个,其中有3个卵裂球各有2个核,共有46个细胞核。成功固定45个核,固定成功率为97.8%。43个核有杂交信号,杂交率为95.6%。11个单精受精胚胎共有39个核有信号,都为二倍体胚胎,其中正常胚胎2个。在9个异常胚胎中。嵌合型胚胎6个,异常非嵌合型胚胎2个,无规律分离型1个。结论:种植前胚胎中,染色体异常胚胎广泛存在。非整倍体胚胎占染色体异常胚胎的绝大多数,嵌合型是非整倍体的主要形式,形成非整倍体的主要原因可能是减数分裂过程中染色体丢失。
摘要:目的:探讨白细胞介素-21(IL-21)对Burkitt淋巴瘤细胞株Raji的增殖和细胞周期的影响及其可能机制。方法:通过噻唑蓝(MTT)比色法检测观察IL-21对Raji细胞生长的影响.流式细胞仪观察IL-21在Raji细胞周期的作用,逆转录-聚合酶链式反应(RT.PCR)检测IL-21对C—mycmRNA表达水平的影响。结果:IL-21对Raji细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖关系(P〈0.05)。IL-21使G/G,期细胞数目增多,而s期细胞数减少。随着IL-21浓度升高,C—myc的表达水平逐步下降(P〈0.05)。结论:IL-21可以抑制淋巴瘤细胞的生长和增殖.其机制可能与降低C—myc的表达有关、
摘要:2007年8月,本市西湖区某度假村发生一起暴发性食物中毒事件,到我科就诊的人数达32人。暴发性食物巾毒以发病急、患者多为特点,也是对急救护理应急与管理能力的考验。由于组织抢救及时,救治合理,全部患者急救成功。现将急救的经验体会总结如下。
摘要:目的:观察生胃酮在戊四氮诱发急性癫痫模型中的干预作用。方法:用戊四氮诱发急性癫痫模型.观察戊四氮及生胃酮腹腔注射各组大鼠痫性发作等级及潜伏期。结果:在急性癫痫模型中10mg/kg生胃酮组潜伏期、平均痫性发作等级与致痫组相比差异无显著性,20mg/kg生胃酮组平均潜伏期较致痫组明显延长(P〈0.01),平均痫性发作等级与致痫组及10mg/kg生胃酮组相比差异均有显著性(P〈0.01)。结论:生胃酮有较明确的抗癫痫作用,在一定范围内有剂量依赖性。
摘要:患者男,67岁。因“反复气喘5个月余,加重伴呼吸困难3d”于2007年11月14日收治本科。曾诊断为“慢性支气管炎。阻塞性肺气肿”。5个月内3次在本院呼吸内科予抗炎、平喘等治疗,气喘症状反复,伴咳嗽、咳痰,无声嘶、咳血、喉痛及发热等症状。体查:T36.4℃,P88次/min。R25次/min。BP137/94mmHg,轻度紫绀,平静时有吸气性呼吸困难和吸气性三凹征,桶状胸,双肺叩诊呈过清音.听诊肺部闻及干性哮鸣音,间接喉镜检查咽喉部未见异常。声门上区和声门区未见新生物,双声带色泽和活动正常.颈部未及肿大淋巴结。
摘要:目的:用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)及碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料标记方法检测小鼠脾细胞杀伤能力.并探讨其应用价值。方法:采用CFSE标记靶细胞,PI标记被杀伤细胞,并通过直接杀伤实验和双向杀伤实验验证方法可行性。分离各组C57BL/6小鼠脾细胞作为攻击细胞,Balb/c小鼠脾细胞经5¨m01/LCFSE染色后作为靶细胞。将攻击细胞与靶细胞按20:1的比例混合,培养6h后用PI染色10min,经流式细胞术分析。比较Balb/c小鼠脾细胞致敏C57BL/6小鼠组(免疫组)和地塞米松处理组的脾细胞杀伤能力。结果:CFSE及PI两种荧光染色细胞可以在流式细胞仪上明显区分。CFSE和PI双阳性细胞是被杀伤的靶细胞。免疫组与地塞米松处理组的杀伤能力差异存在显著性(P〈0.05)。结论:CFSE与PI两种荧光染料染色的杀伤实验方法操作简单、方便.有良好的应用价值。
摘要:原发的骶骨骨巨细胞瘤较为少见.临床上多采用手术方法治疗.因骶骨部的解剖关系复杂,早期症状不明显.当发现时肿瘤已较大,手术中的出血较多.给手术带来一定困难。自2000年1月至2006年1月共收治骶骨骨巨细胞瘤5例,采用腹主动脉阻断加肿瘤切除或刮除,术中出血少,暴露清楚,疗效满意,现汇报如下。
摘要:目的:探讨前哨淋巴结活检(SLNB)在早期乳腺癌简化的腋淋巴结清扫(ALND)中的应用及效果,了解EPOS法快速免疫组化发现前口哨淋巴结(SLN)微转移的能力及准确性。方法:30例早期乳腺癌行关蓝染色SLNB术中行SLN冰冻切片联合EPOS法快速免疫组化检查,其中阴性者28例分成两组,15例行简化的ALND(仅清扫胸小肌外侧组淋巴结.简化组),13例行标准ALND(标准组)。结果:EPOS法快速免疫组化使SLN假阴性率降了50%,简化组后腋窝引流时间、积液及患肢水肿发生率较标准组减少,患肢功能恢复良好,短期随访无腋窝局部复发及远处转移。结论:EPOS法联合冰冻切片可减少SLN的假阴性率,SLN阴性可安全使用简化的ALND,减小手术创伤和并发症。
摘要:患者女,26岁。因活动后胸闷3个月于2007年4月7日入院。患者3个月前无明显诱因出现活动后胸闷,休息后自行缓解,无发热、咳嗽咳痰,平卧无不适。既往体健,无心脏病史及手术史。查体:体温36.5℃,脉搏82次/min,呼吸18次/min,血压115/60mmHg。发育正常,全身浅表淋巴结无肿大,皮下未触及肿块。口唇无紫绀,颈静脉无怒张。胸廓无畸形,双肺呼吸音清,未闻及干湿性罗音。心浊音界无扩大,心律齐,未闻及心脏杂音。
摘要:目的:比较经尿道输尿管镜气压弹道碎石术和腹膜后腹腔镜切开输尿管取石术治疗输尿管上段结石的安全性和疗效.方法:86例输尿管上段结石并肾盂输尿管上段积水患者,采用经尿道输尿管镜气压弹道碎石术和腹膜后腹腔镜切开输尿管取石术.分析两种手术方法的手术时间、术后住院时间以及治愈率。结果:输尿管镜组、腹腔镜组的手术时间、术后住院时间分别为(93.33±42.34)min vs (75.74±25.11)min、(5.45±2.59)d vs(8.67±2.80)d.两组各值比较,差异具有显著性(P〈0.05)。输尿管镜组手术治愈率72%,腹腔镜组手术治愈率96%,两纽比较,差异具有显著性(P=0.002)。结论:腹膜后腹腔镜输尿管切开取石术比经尿道输尿管镜气压弹道碎石术治疗输尿管上段结石更安全和有效。
摘要:目的:评价原发性肝癌行经肝动脉栓塞化疗(TACE)联合三维适形放疗(3DCRT)综合治疗的临床疗效。方法:77例不能手术切除的原发性肝癌患者作为治疗组采用TACE联合3DCRT进行治疗,以同期单纯TACE治疗的130例有可比性原发性肝癌患者作为对照组。比较两组近期疗效、生存期及毒副作用。结果:治疗组和对照组治疗有效率、甲脂蛋白(AFP)定量下降50%以上的比例分别为81.8%、55.8%和60.0%、34.6%.两组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。治疗组和对照组1、2、3年生存率,中位生存期.平均生存期分别为78.6%、48.4%、30.7%、23个月、35.17个月和54.6%、23.8%、6.2%、13个月、16.62个月,差异有显著性(P〈0.05)。两组毒副作用相似..结论:对不能手术切除的原发性肝癌患者,TACE联合3DCRT综合治疗,能提高疗效、延长生存期,毒副作用无明显增加。
摘要:目的:分析随血压水平下降相应的动脉脉冲速率(PWV)的变化对终末期肾功能衰竭(ESRF)患者预后的意义。方法:52例维持性血液透析患者,年龄(62±13)岁,共观察(17±9)个月,观察伴随血压下降PWV的变化,通过调整干体重控制患者血压水平,共有12例患者死亡,其中7例死于心血管并发症,5例死于非心血管并发症。结果:Cox分析结果提示(1)随血压水平下降,PWV水平保持不变(无相应下降);(2)左心室容积增加:(3)年龄大;(4)存在基础心脏原发病,是不依赖于患者血压水平变化而独立影响患者病死率的因素。随血压变化PWV水平保持不变的病例死亡的危险系数为0.288(95%可信区间0.084~0.987),P〈0.05。结论:对于ESRF患者,随血压水平下降,动脉PWV变化不明显能作为ESRF维持性血液透析患者远期病死率指示标准。
摘要:目的:探讨应用脉冲组织多普勒显像技术(PW—TDI)所测Tei指数评价风湿性心脏病(RHD)患者手术前后右室功能的临床价值。方法:测量45例RHD患者手术前后及42例健康对照者的右心常规超声指标,同时记录三尖瓣环的PW—TDI频谱图.测量相关时间间期.并计算出Tei指数。结果:45例RHD患者中,术前右房、右室明显扩大,三尖瓣返流和肺动脉高压,术后右房、右室缩小(P〈0.05),三尖瓣返流减轻,肺动脉压下降(P〈0.05)。45例患者术前容收缩时间、等容舒张时间延长,射血时间缩短,Tei指数明显升高(P〈0.01),术后1~3个月等容收缩时间、等容舒张时间较术前缩短,射血时间延长,Tei指数明显减低。结论:用右室三尖瓣环的PW—TDI法获得的Tei指数可以较敏感地反映RHD患者手术前后右心室功能的变化,是评价其右室整体功能的较好指标。
摘要:目的:探讨局部晚期鼻咽癌患者治疗及随访过程中T细胞亚群的变化规律。方法:采用流式细胞仪检测50例局部晚期鼻咽癌患者治疗及随访过程中血浆T细胞亚群的变化。结果:局部晚期鼻咽癌患者治疗前血浆T细胞亚群较正常人群稍低(P〉0.05).在治疗第1、22天血浆T细胞亚群较治疗前变化不明显(P〉0.05),而在第43天CD4^+升高,CD8^+降低,CD4^+/CD8^+比值明显升高,较治疗前差异有显著性(P〈0.05)。在治疗第71、99天,CD4^+比例降低,CD8+比例有所升高,CD4^+/CD8^+比值明显降低,与治疗前比较差异有显著性(P〈0.05),且第71天以CD4^+比例下降为主.而第99天则以CD8^+比例升高为主。在治疗第127天,随访过程中第3、6个月患者血浆T细胞亚群开始恢复.但仍然保持低水平,与治疗前无明显差异(P〉0.05)。在随访第9、12、15个月患者血浆T细胞亚群基本恢复正常,与治疗前无明显差异(P〉0.05)。结论:局部晚期鼻咽癌患者T细胞亚群在治疗及随访过程中呈现动态的变化,在治疗的第43天CD4^+/CD8^+比值明显升高,而第71、99天CD4^+/CD8^+比值明显降低,随访1年左右基本恢复正常,这也为临床进行及时合理的细胞免疫调节治疗提供了一个较好的依据。