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摘要:目的:构建表达人干燥综合征抗原A(SSA)的毕赤酵母分泌型表达载体。方法:以人白血病淋巴细胞HL-60株cDNA为模板,PCR扩增目的基因SSA,纯化,双酶切,DNA浓缩回收,插入酵母分泌型表达载体pPIC9k,热冲击法转化感受态大肠杆菌JM109,阳性克隆提取质粒,双酶切鉴定并测序。结果:PCR产物大小符合要求,重组质粒pPIC9k-SSA双酶切鉴定与预期一致,测序结果正确。结论:成功构建SSA毕赤酵母分泌型表达载体,为下一步取代从动物胸腺中人工提取低纯度、低产量的SSA抗原,研制新型抗SSA诊断试剂盒打下基础。
摘要:目的:表达人survivin重组蛋白并制备单克隆抗体。方法:表达含有survivin基因的重组质粒pRSETB—survivin,表达人survivin重组蛋白,以此为抗原,常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS21细胞融合,得稳定分泌survivinmAb的杂交瘤细胞株。ELISA检测mAb的相对亲和力,Western blot检测mAb的特异性。间接免疫荧光观察骨肉瘤细胞中survivin的表达情况。结果:重组载体pRSETB—survivin转化入大肠杆菌BL21中表达所得蛋白经Western blot验证为目的蛋白。筛选出2株能稳定分泌特异性抗人survivin的mAb杂交瘤细胞株。免疫球蛋白亚类均为IgG类:单克隆抗体的亲和常数为S1 1.52×10^-9mol/L,S2 2.31×10^-9mol/L。Western blot结果显示,2株单抗识别相对分子质量为20000的survivin单一条带,并发现在骨肉瘤细胞中survivin主要表达在胞浆内。结论:成功地表达出人survivin重组蛋白,制备出抗人survivinmAb,为进一步用于survivin的免疫学检测及骨肉瘤生物学治疗奠定了基础。
摘要:目的:探讨趋化因子受体CXCR4在人卵巢癌细胞中的表达及SDF-1/CXCR4系统与卵巢癌细胞恶性表现的关系。方法:采用RT-PCR检测卵巢癌细胞系SW626中CXCR4的表达,MTT法检测SW626细胞增殖能力的变化,通过体外微孔隔离室板(Transwell)检测SDF-1对SW626细胞迁移及CXCR4的封闭对其迁移的影响。结果:CXCR4mRNA在SW626细胞呈阳性表达,抗CXCR4单克隆抗体(20μg/mL)对SW626细胞增殖有明显的抑制作用(P〈0.05),SDF-1可促进SW626细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制SDF-1对SW626迁移的这种促进作用(P〈0.05)。结论:SDF-1及其受体CXCR4的相互作用可能在卵巢癌细胞增殖和迁移中发挥着重要作用,干扰SDF-1/CXCR4的相互作用可能成为治疗卵巢癌的一个有意义的靶点和策略。
摘要:目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对子宫内膜癌HEC-1-B细胞生长的作用。方法:通过细胞生长曲线及MTT试验研究不同浓度的塞来昔布对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的作用。结果:塞来昔布能够有效地抑制HEC-1-B细胞的生长,并呈一定的剂量和时间依赖关系。结论:塞来昔布能够抑制子宫内膜癌细胞HEC-1-B的生长。
摘要:患者,男,37岁,车祸致挡风玻璃割伤颌颈部30min,创面出血,气促入院。体检:面色苍白,脉搏102次/min,呼吸28次/min,血压80/60mmHg,颌颈部见15cm长伤口,弧形达耳垂,立即在全麻下行颌颈部伤口探查术,术中发现颈前肌群完全断裂,创口内先予结扎止血,见气管环状软骨处完全断裂,腮腺下部断裂,食管部分断裂,颈部大血管完整,置入胃管,彻底清创后将破裂食管前壁用3-0丝线行黏膜和肌层修补术,气管断端用0-0可吸收线修补。将腮腺筋膜缝合,术后2周开始饮食,并逐渐增量,恢复顺利,1个月后出院。
摘要:目的:探讨大鼠肝移植时供肝的不同灌注方法对大鼠的影响。方法:80只大鼠随机分为供、受体两组(各40只)。供体组再随机均分为经腹主动脉灌注组(A组)和经门静脉灌注组(B组)以获取供肝,应用改良二袖套法进行大鼠原位肝移植。检测两组供肝切取时间。热缺血时间,术后第1、4、7、10天的肝功能,术后一般情况及生存率等。结果:A组和B组的供肝切取时间分别为(30.0±3,0)min和(27.0±3.0)min,热缺血时间分别为(2.0±0.5)min和(1.0±0.5)min;A组术后第1天的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素等均较B组高,而术后第7天的结果却相反。结论:对于非肝动脉化的大鼠肝移植手术供肝采用经门静脉灌注的方法操作较简单,供肝切取时间较短,热缺血时间短。术后早期肝功能的损害较小,但恢复速度相对较慢。
摘要:患者,男,45岁。因弥漫性脱发1个月余于2006年1月就诊于我科。患者诉1个月前在颞、顶、枕部出现脱发。逐渐加重,但无其他不适。到当地医院就诊,诊为“脂溢性脱发”。予以除脂、生发药物等治疗,症状无明显改善,且脱发范围进一步扩大。查体:系统检查无明显异常。皮肤科情况:颞、顶、枕部散在黄豆大小不等脱发区,边界不清,部分脱发区残留长短不一的头发,呈虫蚀样,脱发区皮肤周围有散在的充血性红斑。追问病史,患者于3~4个月前有过多次不洁性交史,1个月前有过阴茎溃疡,但约1周后自愈。
摘要:目的:通过研究抗分泌因子(AF)在大鼠内耳组织中的表达及分布,为临床治疗梅尼埃病提供实验依据。方法:选取6只健康雄性sD大鼠,断头后行内耳组织切片,用兔抗大鼠AF的特异性多克隆抗体进行免疫组织化学染色,观察AF在内耳组织中的表达情况。结果:AF在内耳组织中分布广泛,呈轻中度阳性反应,反应集中于与内淋巴关系密切的部位,如耳蜗血管纹边缘细胞、螺旋韧带Ⅰ—Ⅴ型纤维细胞分布区、前庭膜、基底膜、壶腹嵴感觉上皮及暗细胞等部位,与外淋巴相关的圆窗膜也存在中重度阳性反应,耳蜗螺旋神经节及前庭、耳蜗神经纤维均有阳性分布。结论:AF在大鼠内耳中分布范围广泛,多集中于与内淋巴关系密切的部位,提示AF可能参与内淋巴中水的调节。
摘要:短颈畸形(Klippel-Feil)又称为先天性骨性斜颈或先天性颈椎融合畸形,是以两个以上颈椎融合为特征的先天性脊柱发育异常,是由KLIPPEL和FEIL首次报道。笔者在工作中遇有1例,现结合有关文献报告如下。
摘要:目的:探讨瘦素与胎肺发育及瘦素与地塞米松促胎肺成熟作用之间的关系。方法:采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测孕16.21dWister大鼠胎肺组织瘦素mRNA相对表达水平以及地塞米松对原代胎肺成纤维细胞瘦素mRNA表达的影响。结果:瘦素在胎肺组织有普遍表达,表达水平在孕16~17d、孕18~19d、孕20~21d有逐渐上升的趋势(P〈0.05);原代培养胎肺成纤维细胞经地塞米松处理24h后,处理组瘦素表达水平高于对照组(P〈0.05)。结论:大鼠孕晚期胎肺组织中均有瘦素的表达,且随着胎肺的发育有增加的趋势。地塞米松能刺激培养的胎肺成纤维细胞瘦素的表达。
摘要:目的:探讨分泌性中耳炎(OME)的病因和发病机制。方法:采用机械性阻塞右侧咽鼓管的方法建立OME动物模型,左耳作为对照,对中耳上皮黏膜中琥珀酸脱氢酶(SDH,一种重要的与能量代谢有关的酶)进行光镜和电镜酶细胞化学研究。结果:实验组中3d组和7d组的SDH酶活性均较正常对照组减弱,且差异有显著性。结论:发生OME时,SDH酶活性受抑制,导致能量代谢的障碍,不能产生足够的ATP以维持强烈而有效的纤毛摆动..引起中耳积液的持续存在。
摘要:自1995—2005年底我院共收治小儿渗出性多形性红斑48例,其中30例应用静脉注射丙种球蛋白,与未用静脉注射丙种球蛋白患儿比较有满意疗效。现报告如下。
摘要:目的:探讨多排螺旋CT血管造影(MSCTA)在分析肝移植动脉解剖变并中的应用价值。方法:分析100例预行肝移植术患者的动脉CT血管造影(CTA)资料,并与数字减影血管造影(DSA)(26例)或手术(19例)结果进行对照。所有病例均在Toshiba Aquilion16层螺旋CT机上进行。动脉期层厚为1mm,重建层厚为1mm,螺距15,延迟时间25S,对比剂用量为1.5mL/kg。依据Michels分型对100例CTA进行分类,并记录CTA对不同动脉分支的显示率。结果:正常肝动脉解剖占79%,变异占21%。45例有DSA或手术结果者,CTA的诊断符合率为95.6%。结论:MSCTA在分析肝移植动脉解剖变异中有较高的符合率.可应用于肝移植术前的评价.
摘要:目的:观察滋养细胞膜抗体、封闭抗体及其抗独特型抗体水平对子痫前期发病的影响。方法:取重度子痫前期患者15例作为病例组,正常妊娠30例作为对照组。取孕妇外周血及其胎儿脐静脉血,首先采用ELISA间接法测定孕妇血中滋养细胞膜抗体水平,然后进行单向混合淋巴细胞培养,测定孕妇体内混合淋巴细胞反应封闭抗体及其抗独特型抗体水平。结果:病例组的滋养细胞膜抗体水平明显高于对照组,两者比较差异有显著性(P〈0.05),病例组外周血的混合淋巴细胞反应封闭抗体水平较对照组低(P〈0.05);混合淋巴细胞反应封闭抗体的抗独特型抗体水平病例组也较对照组低(P〈0.05)。结论:妊娠期母体滋养层特异性抗原表达增多,滋养细胞膜抗体水平升高,封闭抗体及其抗独特型抗体产生不足可能是导致子痫前期发病的原因之一。
摘要:目的:探讨谷氨酰胺(Gin)与重组人生长激素(rhGh)各自应用及联合应用对肝硬化患者外周血淋巴细胞、白细胞计数的影响。方法:选取20例肝硬化患者,随机分成4组,所有患者给予等氮等热量营养支持7d,Gin+rhGh组口服Gin[0.3g/(kg·d)]和皮下注射rhGh(10U/d),Gin组口服Gin,rhGh组皮下注射rhGh,肝硬化对照组给予相应安慰剂。观察治疗前后患者白细胞、淋巴细胞计数以及淋巴细胞百分比的变化,并分别进行比较。结果:Gln+rhGh组治疗后,淋巴细胞计数以及淋巴细胞百分比都有显著意义的升高,与其他3组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。而各组白细胞总数无显著意义的变化。结论:Gin与rhGh联合应用能提高淋巴细胞计数以及淋巴细胞百分比。
摘要:目的:揭示细胞间黏附分子-1(ICAM-1,CD54)和P-选择素(CD62p)在鼻息肉发病机制中的作用。方法:收集鼻息肉标本32例,炎性鼻甲黏膜11例,正常鼻黏膜12例作对照,应用FACScan流式细胞仪测定不同标本内表达这两种黏附分子的阳性细胞数量。结果:鼻息肉和炎性鼻甲黏膜ICAM-1和P-选择素的细胞阳性率均明显高于正常鼻黏膜(P〈0.001);鼻息肉和炎性鼻甲黏膜之间ICAM-1和P-选择素的细胞阳性率差异无显著性(P〉0.05);ICAM-1和P-选择素在鼻息肉中的表达有正相关关系(r=0.9001,P〈0.001)。结论:ICAM-1和P-选择素在鼻炎和鼻息肉发病过程中都起了重要作用,在鼻息肉中二者表达有一致性。