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摘要:目的:克隆、构建、鉴定重组人促红细胞生成素(rhEPO)基因四环素调控真核表达载体;探讨四环素系统对rhEPO基因表达的调控。方法:以含rhEPO全长cDNA的CHO细胞为模板,通过RT-PCR方法扩增出rhEPO基既将其克隆到真核表达载体pTRE2hyg的多克隆位点,构建成pTRE2hyg-EPO,进行酶切及测序鉴定。将pTRE2hyg-EPO及Tet-On质粒转导入SD大鼠骨骼肌细胞,用RT-PCR、Western印迹实验和半固体细胞培养实验检测rhEPO基因在大鼠骨骼肌内的表达和蛋白的活性,并观察四环素系统对EPO表达的调控作用。结果:(1)成功构建了四环素调控真核表达质粒pTRE2hyg-EPO,经测序鉴定与所需EPO基因序列一致。(2)rhEPO基因可以在大鼠骨骼肌原代细胞中表达,并受四环素调控系统的控制。生成的EPO具有生物活性,可明显刺激骨髓红系细胞的生长。结论:在细胞水平四环素系统可控制转导的EPO基因的表达,并且生成有生物活性的EPO,达到基因治疗的要求。
摘要:目的:建立及优化人宫颈癌组织蛋白质提取方法,为下一步寻找差异表达的蛋白质并早期诊断宫颈癌提供新的思路。方法:利用一步法和三步法提取宫颈癌组织蛋白质,并分别用Bradford法测定相应样品总蛋白质浓度,并进行双向丙烯酰胺凝胶电泳分离,观察两种方法提取样品蛋白质含量及2-DE蛋白质图谱高分辨率的情况。结果:三步法提取的宫颈癌组织蛋白质含量较一步法有明显的增高,2-DE蛋白质图谱较一步法清晰、分辨率高。结论:与一步法相比较,三步法具有高蛋白质浓度、高分辨率、高清晰度的二维电泳图谱的优点,利于全面准确地进行蛋白质学研究。
摘要:隐匿性巩膜破裂是指眼挫伤后不伴有球结膜裂伤的巩膜破裂伤,可以发生在前段巩膜或后段巩膜,伤口隐匿,不易观察,因此易发生误诊和漏诊,给诊断和治疗带来一定的困难。现将笔者遇到的首诊漏诊的2例隐匿性巩膜裂伤患者资料报告如下。
摘要:目的:观察腺病毒介导的人心肌营养素(human cardiotrophin-1,hCT-1)对大鼠不完全性颈脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后可塑性变化、功能恢复和运动诱发电位的作用。方法:在立体定位仪的引导下,致伤大鼠双侧红核和颈3节段皮质脊髓背侧束SCI局部注射hCT-1重组腺病毒载体,并采用荧光免疫组织化学检测其表达。采用改进后的大鼠前肢食物小球抓取动作评分标准和运动诱发电位评定大鼠前肢功能恢复情况。生物素化葡聚糖胺示踪未受损皮质脊髓腹侧束(ventral corticospinal tract,vCST)的出芽情况。结果:SCI局部高效表达的hCT-1诱导vCST出芽增加,同时伴有大鼠前肢运动功能和运动诱发电位P1、N1波波幅的恢复。结论:腺病毒介导的hCT-1在SCI局部的高效表达可增加vCST的出芽数量,并促进运动功能的恢复。
摘要:我院1996年前对十二指肠严重损伤,但未累及胰腺者均采用单纯十二指肠修补、十二指肠部分切除、十二指肠空肠吻合术。术后常出现出血、肠瘘等严重并发症。自1997年6月至2005年8月我们改进十二指肠的修补方法,采用十二指肠破裂修补术,加Roux-en-Y空肠袢覆盖术,再行胃十二指肠减压、空肠造瘘术,收到良好的治疗效果。
摘要:目的:制作白细胞介素-1β(IL-1β)作用下椎间盘退变(IVDD)的动物模型。方法:新西兰大白兔32只,随机分为两组。IL-1β组(IL组),椎间盘内(L3-4、L4-5、L5-6)注射20μL(10ng/mL)IL-1β;力学组(ME组),咬除椎体棘突及一侧上下关节突。IL组动物椎间盘(T12~L1、L1~2、L2-3)作为对照组(SH组)。各组分别于术后6周及12周分批处死。HE染色在偏差显微镜下进行椎间盘组织观察;透射电镜观察椎间盘组织超微结构。结果:标本大体形态学变化IL组与ME组在6周及12周时椎间盘髓核组织外观基本一致,呈现退变性改变;SH组6周与12周时椎间盘髓核组织外观基本一致,椎间盘退变不明显。HE染色显微镜下椎间盘细胞病理形态学变化IL组与ME组在6周与12周时髓核组织呈现退变性改变,SH组6周与12周时椎间盘退变不明显。透射电镜下椎间盘细胞病理形态学变化IL组与ME组的变化基本相似,6周时椎间盘细胞呈现退变性改变,12周时加重。SH组椎间盘髓核细胞及纤维环细胞在6周与12周时均无明显退变。结论:IL-1β作用下IVDD动物模型与外力作用下IVDD相似,成功建立了IL-1β作用下的IVDD动物模型。
摘要:我院2003年1月至2005年12月共手术治疗甲状腺功能亢进症(甲亢)伴周期性麻痹患者26例,报道如下。
摘要:目的:观察南虎凝胶剂对实验性创伤性滑膜炎兔滑膜组织中NF-κBp65表达的影响。以探讨南虎凝胶剂治疗创伤性滑膜炎的作用机制。方法:采用电针刺激新西兰兔的股四头肌和腓肠肌,引起兔膝关节长时间被动屈伸而导致关节滑膜损伤来制作创伤性滑膜炎的动物模型。分5组给药治疗,5d后处死动物,对动物膝关节滑膜组织病理切片后进行免疫组化染色,观察NF-κBp65阳性细胞情况以了解各组动物关节滑膜组织NF-κBp65的表达水平。结果:模型组NF-κBp65的表达比正常组显著升高(P〈0.01);而预防组、低剂量组和高剂量组的NF-κBp65表达水平明显降低,与模型组比较差异有显著性(P〈0.05),其中高剂量组与模型组比较差异更有显著性谴义(P〈0.01)。高剂量组、预防组与正常组比较NF-κBp65的表达水平差异无显著意义(P〉0.05),但低剂量组与正常组比较NF-κBp65表达水平差异有显著意义(P〈0.05)。结论:南虎凝胶剂有抑制滑膜组织NF-κBp65表达的作用,减轻了兔关节创伤性滑膜炎炎症,并且剂量越大效应越显著,从而推断南虎凝胶剂对于创伤性滑膜炎可能有良好的预防和治疗效果。
摘要:鼻内翻乳头状瘤组织学上属于良性肿瘤范畴,临床上具有易复发、易侵袭和易恶变的特点,手术时要求彻底切除,可选择采用鼻侧切开术和经鼻内窥镜下切除。我科1998-2005年采用鼻内窥镜下手术联合微波烧灼治疗鼻-鼻窦内翻乳头状瘤效果满意,报告如下。
摘要:目的:观察不同剂量大豆复合因子对大鼠实验性溃疡性结肠炎的疗效。方法:给大鼠服用3个不同剂量大豆复合因子4周,然后检查结肠病理改变、循环系统免疫复合物浓度变化、大肠洗液一氧化氮浓度变化。结果:大豆复合因子能减轻大鼠溃疡性结肠炎的病理损伤,减小结肠溃疡面积、显著降低循环系统免疫复合物浓度和肠组织一氧化氮含量。结论:大豆复合因子对大肠杆菌免疫大鼠溃疡性结肠炎有很好的治疗作用。
摘要:患者女,75岁,因“纳差伴恶心呕吐3d”入院行胃镜检查,查体:腹平坦,腹肌紧张,压痛,未触及包块。心肺未见异常。患者曾于14年前因胃癌行胃大部切除术。胃镜检查见巨大结石。大小约10cm×7cm×6cm,形态不规则,表面光滑,质地坚硬,无明显移动,残胃腔充满潴留液,胃黏膜充血水肿明显。胃镜诊断:残胃结石伴梗阻。
摘要:目的:探讨Cajal间质细胞(ICCs)及突触素(SY)在先天性巨结肠发病中的作用。方法:应用免疫组化PV法对10例对照者和32例先天性巨结肠患儿肠标本ICCs、SY进行检测。结果:在对照组及巨结肠有神经节细胞段,ICCs大量分布在肌层内及肌间神经丛周围,并形成网络结构。肌间神经丛、纵肌层、环肌层、黏膜肌层均可见大量SY免疫反应阳性产物。在无神经节细胞段,肠壁各层ICCs细胞密度明显减少甚至消失,正常所见的网络结构遭到破坏。肌间神经丛、黏膜下、环肌层、纵肌层SY表达均不同程度地减少。结论:ICCs、SY分布异常是先天性巨结肠病理改变之一,可能是该病重要的发病机制,参与肠运动障碍的发生。
摘要:患者男,48岁,司机。主诉双眼视力下降3~4个月。于2006年1月22日到我院眼科门诊就诊。诉说白天与夜间开车意识疲劳,视力下降明显,视物模糊,困乏。专科检查:视力右1.0,左0.6,双上睑肿胀,但无红,疼痛;裂隙灯检查见双侧晶体清晰,玻璃体正常;右眼视盘正常,视盘鼻侧色淡,左颞侧偏盲,双侧视网膜未见异常。追问病史以前双眼视力为1.5。全身一般检查:精神较疲乏,身高1.70m,呼吸、脉搏、血压、心率均在正常范围。
摘要:目的:试将术中自体血回输作为参照方法,研究抑肽酶在脊柱手术中的使用价值。方法:86例择期脊柱手术病人,随机分为抑肽酶组(组Ⅰ)或自体血回收组(组Ⅱ);组Ⅰ术中静脉泵注抑肽酶50万kIU/h;组Ⅱ术中对切口出血进行回收。观察两组围术期的血栓弹性描记图(TEG)、凝血功能变化及术中出血量、术后伤口渗血量。结果:组Ⅰ病人应用抑肽酶后,术中、术后血红蛋白、红细胞压积、血小板一直处于较高水平,凝血四项及TEG指标比较稳定,术中出血量比组Ⅱ减少了45%。组Ⅱ术中凝血功能明显降低且有部分病人术后处于低凝状态。结论:抑肽酶具有稳定凝血功能状态,减少术中出血量及输血量,在脊枉手术中具有较高推广价值。
摘要:目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡血流与卵泡生长发育、卵母细胞成熟、受精、卵裂、胚胎质量及妊娠结局的关系。方法:2005年6-12月在本院生殖医学中心接受IVF或精子卵浆内注射技术(ICSI)治疗66个周期(女性输卵管因素58个周期;男性因素8个周期)的患者,在注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)日行阴道彩色多普勒超声测量双侧卵巢内每一个直径≥12mm的卵泡血流参数。结果:(1)66个周期中,妊娠26例(39.4%),未妊娠组卵泡血流阻力指数(RI)、收缩期峰流速/动脉舒张末期血流速度(S/D)值比妊娠组显著升高(P〈0.01)。(2)当RI〈0.49时妊娠率、受精率、卵裂率、MⅡ卵细胞数均显著升高(P〈0.05),而Gn用量、周期第次、不育年限、年龄、注射hCG日E2浓度、获卵细胞数、优质胚胎率差异无统计学意义(P〉0.05)。(3)卵泡血流动脉S与D在妊娠组与未妊娠组中差异无统计学意义(P〉0.05)。(4)线性回归分析卵泡动脉RI与卵泡直径无相关性。结论:卵泡动脉RI是预测IVF-ET妊娠结局的有效指标。
摘要:目的:研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发呼吸衰竭患者机械通气时早期肠内营养支持治疗对患者营养状况和免疫功能的影响。方法:19例COPD并呼吸衰竭机械通气患者分为肠内营养治疗组(EN组)和对照组,治疗7d,观察治疗前后营养指标及血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等的变化。结果:EN组血清白蛋白、前白蛋白、血清IgA含量较治疗前明显升高(P〈0.05);治疗后两组比较,EN组血清白蛋白、前白蛋白、血红蛋白、血清总蛋白含量及上臂肌围、肱三头肌皮褶厚度明显高于对照组。结论:对于COPD并呼吸衰竭机械通气患者,及时合理的肠内营养支持治疗有助于改善机体的营养状况及免疫功能,从而提高综合治疗的疗效。
摘要:口腔颌面部疾患常造成严重开口困难,气管插管难度大,必须经鼻盲探,选择合适的表面麻醉方法是保证插管成功的关键。我院将超声雾化表面麻醉应用于此类手术患者,取得满意效果。现报告如下。