卵巢癌生物标志物研究的现代进展
摘要：卵巢癌是妇女中最普通的一种恶性肿瘤。由于卵巢癌临床症状含糊不清，大多数病人是在晚期阶段诊断出的。本文概述了用血清生物标志物对卵巢癌早期诊断及疾病进程监测的当前进展。人诱导多能干细胞自然分化过程中EMT变化研究
摘要：目的研究人诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells，iPSl自然分化过程中上皮-间质转化fepithelial_me8．enchymaltransition，EMT）的变化过程。方法按常规方法iPS细胞接种于单层饲养层细胞上培养并传代。通过EB的方式令iPS细胞自然分化，收集未分化的iPS细胞以及分化7d、14d、21d和28d的细胞，采用RT—PCR和WestemBlot方法检测EMT相关基因及蛋白的表达水平。结果RT—PCR和WesternBlot结果表明．未分化人iPS细胞可见E-cadherin基因和蛋白的表达，分化后E—cadherin的表达明显减少．而N—cadherin基因和蛋白在细胞未分化时均未见表达．发生分化后表达明显上调；在人iPS细胞分化过程中，Snail和Slug转录因子以及蛋白都明显发生上调。结论人iPS细胞自然分化与EMT，即E-cadherin和N—cadherin转化有关。mTOR特异性siRNA重组表达载体的构建及鉴定
摘要：目的构建mTORsiRNA重组表达载体，为探讨RNA干扰技术抑制巨噬细胞mTOR基因的相关研究奠定基础．方法设计具有短发夹结构的DNA序列，经退火成互补双链，再克隆至载体pGPU6／GFP／Neo中构建重组表达载体，转化DH5c~菌株，提取质粒行酶切鉴定后，并进行序列测定。再转染人巨噬细胞RAW264．7，进行荧光摄像和阳性克隆筛选。Westernblot方法检测巨噬细胞mTOR蛋白表达。结果DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTORsiRNA重组表达载体。Westernblot结果显示转染该重组载体的巨噬细胞mTOR蛋白表达下降约4l％。结论mTOR靶向RNA干扰重组表达载体构建成功，可以进行稳定筛选，该载体对巨噬细胞mTOR蛋白表达有抑制作用。冠心病患者血浆高迁移率族蛋白B1与白细胞介素18水平变化研究
摘要：目的研究冠心病fCHDl患者血清白细胞介素-18（IL-18）、高迁移率族蛋白BI（HMGBl）水平变化的临床意义，为CHD的诊疗提供参考。方法CHD组102例为本院确诊患者。对照组52例为健康体检者．采集早晨空腹静脉血5ml于ED．TA-Na2抗凝管中，3000r／min离心15min后采用ELISA法测定HMGBl、IL-18水平。结果CHD组HMGBl、IL-18水平高于对照组（P〈O．01），CHD组中HMGBl、IL-18水平在不同病变程度各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。其水平与冠状动脉病变程度呈正相关。结论HMGBl、II，_18水平变化佐证冠心病的发生和发展中炎症反应在起着重要作用．血浆HMGBl、IL-18水平检测可作为冠心病病程变化的参考指标。伴ider（17）（qlO）t（15；17）变异易位的急性早幼粒细胞白血病临床和实验特征
摘要：目的报道一例初发的、伴有ider（17）（q10）t（15；17）（q22；q21）的罕见急性早幼粒细胞白血病（acutepromyelocyticleukemia。APLl并探讨其临床和实验特征。方法在常规核型分析的基础上，应用双色双融荧光原位杂交（dual—coloranddual—fusionfluorescenceinsituhybridization，DCDF—FISH）和逆转录一聚合酶链反应fRT—PCRl技术进一步检测该病例的细胞遗传学异常和分子生物学异常．并结合文献分析此类少见变异易位的临床特点。结果G显带染色体分析显示患者核型为46，XX，der（15）t（15；17）（q22；q21），ider（17）（q10）t（15；17）（q22；q21）／46，XX，t（15；17）（q22；q21）／46，XX，DCDF—FISH结果显不39％的I司期细胞为典型的t（15；17）易位模式-红-绿两融合（101G2F），16％的间期细胞信号模式为-红-绿三融合（101G3F），RT—PCR结果显示PML-RARot（L型1阳性。结论ider（17）（q10）t（15；17）异常多发生于男性患者，常伴有外周血白细胞减低，骨髓形态表现为颗粒增粗型APL特征．但是患者对全反式维甲酸（all—trans—retinoicacid，ATRA）联合化疗有效。转染慢性粒细胞白血病总RNA对树突状细胞介导的抗白血病作用的体外研究
摘要：目的体外诱导和鉴定慢性粒细胞白血病-树突状细胞（CML—DC），并探讨人慢性粒细胞白血病（CML）总RNA体外转染对其介导的特异性细胞毒T淋巴细胞（CTLl对慢性粒细胞白血病细胞杀伤作用的影响。方法分离14例CML患者骨髓单个核细胞．加入rhIL-4、rhGbl—CSF、rhTNF-α诱导培养CML—DC。分别于培养第1、3、6、14d用倒置显微镜进行形态学观察．流式细胞术检测免疫学表型，染色体G显带技术检测其染色体核型，逆转录聚合酶链反应（RT—PCRIl检测bcr—abl融合基因。并于CML-DC培养第5d，加人CML细胞总RNA脂质体转染，或裸总RNA转染，或不加任何试剂继续培养的DC，共三种CML—DC．分别致敏T淋巴细胞．另设以IL-2培养的T淋巴细胞为对照组，比较不同组别的致敏T淋巴细胞的杀伤活性。结果CML骨髓单个核细胞诱导前CDlct、CD83表达均在5％以下。而诱导成熟的CML—DC细胞CDla、CD83阳性表达率分别为20．13~3．43％、26．76＋2．79％，较诱导前均明显增高（P〈0．01）。CML-DC细胞均存在Phl染色体，并表达bcr-abl融合基因。总RNA脂质体转染CML—DC、裸总RNA转染CML—DC、单纯CML—DC分别致敏的T淋巴细胞在效：靶比为20：1时对CML单个核细胞的杀伤效率分别为75．33±3．11％、37．23±2．92％、29．62±1．61％，均明显高于对照组f9．87＋3．43％，P〈0．01）。总RNA脂质体转染的CML—DC所诱导的CTL杀伤活性最强．与后三组杀伤活性均有显著性差异（P〈0．001）。结论CML—DC既具有CML白血病源性．又具有DC细胞的特性，并能诱导特异性CTL杀伤白血病细胞。经脂质体转染CML细胞总RNA可以提高CML-DC介导的CTL特异性杀伤慢性粒细胞白血病细胞。景德镇市两例重症EV71手足口病毒VP1区基因型分析
摘要：目的分析2011年景德镇地区两例临床症状不同的EV71手足口重症病例病毒株的分子生物学特征。方法采集2例临床症状不同的手足口病重症患者咽拭子标本．进行病毒分离和逆转录一聚合酶链反应（aT—PCRl，并将其与GenBank已上传的其他EV71病毒株的VPl区进行相关生物信息学分析。结果两例临床症状不同的重症病例都由EV71病毒引起，他们都同属于C4a亚型．通过氨基酸序列比对发现它们在四个氨基酸的位点上存在变异引起不同临床症状．其中有神经症状的患儿出现第19位丙氨酸由缬氨酸取代（A→V），第106位酪氨酸由苯丙氨酸取代（Y→F）；无神经症状的患儿出现第19位丙氨酸由半胱氨酸取代（A→C），第38位精氨酸由谷氨酰胺取代（R→Q），第293位丙氨酸由丝氨酸取代（A→S）。结论EV71病毒是引起手足口重症病例的主要病原．临床症状的差异性主要体现在有无神经系统症状．通过基因分析发现不同位点氨基酸的突变可能成为临床症状差异性形成的生物学基础．IFN—γ释放试验（T—SPOT．TB）在结核病诊断中的应用
摘要：目的探讨T淋巴细胞感染结核后IFN-γ释放斑点试验fT—SPOT．TB）在结核病诊断中的应用及价值。方法采用T—SPOT．TB方法对疑诊或待排结核患者外周血液中释放IFN-γ的结核杆菌特异性淋巴细胞的测定。结果T—SPOT．TB方法的阳性率是83．1％（89／107），结核菌素试验（tuberculinskintest，TSTl的阳性率40．2％（43／1071，涂片找抗酸杆菌阳性率是25．6％f21／82），TB—DNA的阳性率是9．4％（5／531．分枝杆菌分离培养阳性率是21．4％（9／42）。结论T—SPOT．TB方法检测诊断结核性疾病敏感性为83．1％、特异性为95．2％：其阳性率明显高于TST、涂片找抗酸杆菌、TB—DNA、分枝杆菌分离培养，采用该方法检测T淋巴细胞感染结核IFN-γ释放快速敏感．特异性高，在结核性疾病诊断中具有重要价值。HE4和CA125检测与病理学分类在卵巢癌诊断中的相关性研究
摘要：目的探讨人血清附睾蛋白4（HE4）和糖蛋白抗原125（CAl25）在卵巢恶性肿瘤诊断中与病理学分类的符合率，同时探讨以上两种标记物对卵巢癌的灵敏度和特异性。方法将研究对象通过病理切片分为卵巢癌确认~H（50例1，卵巢良性病变组f50例1。健康妇女（50例1．同时用化学免疫发光的方法检测上述对象的HE4及CAl25血清浓度。结果在卵巢恶性病变过程中，通过病理确诊是否患卵巢癌，CAl25对卵巢癌病人的灵敏度和特异性分别为57％和68％，HE4对患卵巢癌各期的灵敏度和特异性为94％和96％。结论HE4在卵巢癌患者中高表达。与病理结果符合率较高：CAl25在卵巢癌灵敏度特异性低．与病理诊断符合率低．且CAl25对早期卵巢癌患者存在着一定的误诊漏诊，HE4是比CAl25更能反映患卵巢癌的一个指标。三种不同方法检测β-咔啉类生物碱所致的人胃癌SGC-7901细胞凋亡
摘要：目的比较分析目前常用的三种检测细胞凋亡方法在不同β-咔啉类生物碱浓度条件下所致人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的运用。方法将生长状态良好的细胞按不同的给药浓度分为A组40μg／ml，B组20μg／ml，C组10μg／ml，D组51xg／ml，E空白对照组，作用24h、48h。分别用MTT法、Hoechest33258细胞核染色法、流式细胞术检测细胞凋亡。结果MTF法结果显示，A组、B组、C组、D组与E组相比较，生长抑制率差异有统计学意义fP〈O．01）；Hoechest33258细胞核染色法显示，E组细胞核浓染、边集、碎裂较少，其他组细胞核均有不同程度的改变，A组、B组、C组、D组与E组相比较，凋亡核百分比差异有统计学意义伙0．05）；流式细胞仪检测结果显示，A组、B组、C组、D组与E组细胞凋亡率相比有统计学差异（P〈0．01）。结论β-咔啉类生物碱能引起人胃癌SGC-7901细胞凋亡。两种方法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果的分析
摘要：目的比较两种方法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果的差异。方法分别采用纸片扩散法和MIC测试条fMTS）法检测替加环素对23株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外敏感性。结果MTS法敏感率为100％；而纸片扩散法敏感率为95．7％，出现4．3％的中介菌株。若以MTS法为标准，纸片扩散法检测的次要误差率为4.3％，无重要误差和严重误差。结论纸片扩散法和MTS法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外敏感性时，其结果存在差异。关键词：碳青霉烯酶；肺炎克雷伯菌；替加环素冠心病患者血清同型半胱氨酸及血脂水平分析
摘要：目的探讨冠心病患者血清同型半胱氨酸及血脂水平变化的临床意义。方法分别测定118例冠心病患者血清同型半胱氨酸（Hcy）及三酰甘油（TG）、总胆固醇∽）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、载脂蛋白A1（ApoAD、载脂蛋白B（ApoB）、脂蛋白a[Lp（a）】和游离脂肪酸（NEFA）水平，并与108例健康对照组比较。结果冠心病患者血清Hcy水平（19．75±9．76）μmol/L显著高于对照组（11．85±2．48）μmol／L（P〈0．01）。冠心病组有较明显的脂类代谢障碍，其血清TG、Lp（a）、NEFA均显著高于对照组①（0．01），HDL—C和ApoAl结果均显著低于对照组（P〈0．01）。而TC和LDL-C、ApoB与对照组比较（P〉0．05），无明显差异。结论冠心病患者血清HDL—C和ApoAl水平明显降低，血清Hcy升高是CHD的一个危险因素。与血脂指标联合检测时，可进一步提高其对冠心病的预防、诊断和治疗价值。温度对血管紧张素Ⅱ及肾素活性结果影响的研究
摘要：目的研究血管紧张素Ⅱ（AⅡ）和肾素活性（PRA）在不同温度条件下对测定结果的影响。方法90例标本分成三组，第一组采血后4℃低温离心。第二组室温放置2h后40C低温离心。第三组在40C冰箱放置2h后4℃低温离心。离心后三组都在30min内上机测定结果。另外，将20例标本分别放入4℃和-20℃冰箱，取0d、1d、2d、3d、7d、14d为时间点，测定结果保持稳定的天数。结果在分组实验中第二组与第一组相比AⅡ结果降低（20．21±10．98）％，PRA结果降低（25．6±9．76）％（P〈0．05），第三组与第一组相比AⅡ结果降低（1．60±0．85）％，PRA结果降低（3.3±1．181％fP〉0．05），在4℃环境中，AⅡ与PRA前3天结果没有显著性差异，P〉0．05。3天到14天有显著性差异，P〈0．05。在-20℃环境中AⅡ标本在14天内6个时间点的结果没有显著性差异，P〉0．05。PRA在7天内的结果无统计学差异．P〉0．05。而7天到14天有显著性差异，P〈0．05。结论AⅡ和PRA对温度敏感．室温放置能使其结果偏低．而在低温环境中能够保持结果稳定。建议AⅡ和PRA标本的运送与预处理都应该在低温中进行．并制定详细的操作规程确保在日常工作中流程的可靠。医院感染MRSA的mecA基因和耐消毒剂基因qacA的流行病学研究
摘要：目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因和耐消毒剂基因qacA携带情况。方法采用全自动微生物分析系统VITEK2-COMPACT及配套鉴定卡、药敏卡对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验．并用WHONET5．6软件进行数据统计分析；用PCR扩增mecA基因和qacA基因，并对阳性基因进行测序分析。结果2009年1月至12月共分离金黄色葡萄球菌260株，其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）140株f53．8％1．对其中50株进行mecA基因和qacA基因检测，发现mecA基因阳性50株，阳性率为100％。未检出qacA基因。结论50株MRSA菌株均携带meCA基因，均未检测到耐消毒剂基风ⅡacA。胃肠道恶性肿瘤患者外周血髓源抑制细胞的检测
摘要：目的探讨髓源抑制细胞（MDSCs）在胃肠道恶性肿瘤患者外周血的表达及临床意义。方法收集20名健康志愿者（年龄28～50岁，平均36岁）和59名新诊断的胃肠道恶性肿瘤患者（年龄27。80岁，平均59岁）的外周血，用荧光标记的抗人Linl、HLADR、CD33及CDllb单克隆抗体标记肿瘤患者和健康人的外周血细胞．应用流式细胞分析术检测MDSCs（Lin-/Le HLA DR-CD33＋ CD11b＋）细胞的表达。结果胃肠道恶性肿瘤患者的MDSCs百分比为（3．99±1．241％，明显高于健康人群（1．81±0．74，P〈O．01）；伴肿瘤转移者（5．34±1．54）%和非转移肿瘤患者（3．71±1．46）％比较，有统计学差异（P〈0．051：胃癌患者MDSCs（3．57±1．59）％和肠癌（4．31±1．71）％相比，无统计学意义（P〉O．051；所有肿瘤患者中，同时患有高血压、糖尿病者19例。MDSCs平均（3．62±1．16）％，和一般肿瘤病人比较，无差异（Jp〉0．05）。结论MDSCs在胃肠道恶性肿瘤中表达增高，肿瘤继发转移者增加更明显，可用于判断病情和预后；但在不同组织来源肿瘤中的表达不具有特异性，高血压、糖尿病等基础疾病对MDSCs在影响肿瘤发生发展方面无明显影响。动脉全血和静脉血清电解质结果线性回归分析
摘要：目的通过动脉血气分析仪检测动脉全血电解质和血生化仪检测静脉血清电解质，探寻两种方法检测结果之间存在的关系。方法随机配对研究，随机选取98例住院患者。于患者住院期间某一时间分别同时进行动脉血气分析和血生化仪检测静脉血清电解质，比较动脉血气分析和静脉血清生化IfnSN（Na＋）、血钾（K＋）、血钙（Ca2＋1结果的差异，通过散点图分析两种检测方法之间的关系，最后纳入线性回归分析进一步明确两者的相关度frl及回归方程。以P〈0．01为具有统计学差异。结果98例患者动脉血气分析仪和血生化仪检测的Na＋，K＋，Ca2＋比较均存在统计学差异，P〈0．001。两者Na＋，K＋检验结果成正相关，而Ca2＋结果无相关性．动静脉血Na＋、K＋相关度r分别为0．940，0．930。进一步的线性回归分析得出回归方程分别为静脉血Na＋（mmol/L）=1．04X动脉血Na＋＋0．170．静脉血K＋（mmol／L）=1．083x动脉血艮＋0．360。结论动脉血气分析仪和血生化仪检测动脉全血和静脉血清Na＋，K＋，Ca2＋有显著差异，但动脉全血Na＋．K＋可以通过回归方程的转换算出接近静脉血清的结果。流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌的耐药性分析
摘要：目的了解我院临床分离的流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌的耐药性。方法对2012年1月-2013年8月我院不同标本分离的流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌，依照CLSl2010版标准判断药敏结果，采用WHONET5．6软件进行数据处理和统计分析。结果2012年1月-2013年8月我院共分离流感嗜血杆菌60株（产β-内酰胺酶16株），肺炎链球菌60株、卡他莫拉菌43株（产β-内酰胺酶36株），除1株流感嗜血杆菌和4株肺炎链球菌自血液标本分离外，其他均来源于痰标本。流感嗜血杆菌对复方新诺明的耐药率最高60％，氨苄西林的耐药率为28．6％．对阿莫西林，克拉维酸、头孢噻肟、氧氟沙星敏感率均在90％以上。肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、四环素耐药率分别为95．7％、95．5％、86．7％，对头孢噻肟、左氧氟沙星、青霉素的耐药率分别为O％、2．3％、8．5％。卡他莫拉菌对阿莫西林／克拉维酸、头孢呋辛、头孢克洛、头孢噻肟、氧氟沙星均呈现高度敏感（敏感率〉90％）。结论流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌对头孢菌素类、阿莫西林／克拉维酸以及喹诺酮类抗菌药物保持高度敏感性；产β-内酰胺酶仍是上述2种细菌对氨苄西林耐药的重要耐药机制；检出氨苄西林耐药而β-酰胺酶阴性的流感嗜血杆菌的分离株，其耐药机制有待进一步研究；肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、四环素呈高水平耐药，头孢噻肟、左氧氟沙星、青霉素、阿莫西林是治疗肺炎链球菌所致感染的首选抗菌药物。对这些苛养菌造成的感染及其耐药性席当引起重视．临床廊根据具体的药物敏感试聆结果来指导用药以减少耐药菌株的产牛．精浆对氧磷酶-1活性测定对男性不育患者诊断价值研究
摘要：目的探讨精浆PON-1活性测定对男性不育症患者诊断价值。方法选择有生育力的男性对照组50例，男性不育症组42例．采用分光光度法和计算机辅助精液分析系统分别测定精浆PON-1活性和精液常规参数。结果与对照组比较，男性不育组精浆PON-1活性、精子浓度、活力及精于正常形态率降低，P〈0．01；精索静脉曲张组和白细胞精子症组精浆PON-1活性降低，P值分别小于O．05和0．01；白细胞精子症组精浆PON-1活性低于精索静脉曲张组，P〈0．01；根据制定的ROC曲线．PON-l活性曲线下面积为0．907。结论精浆PON-1活性测定为男性不育症实验室诊断提供参考依据。
