黄鳝白细胞介素1β基因在大肠杆菌中的重组表达及活性分析

作者:杨龙; 臧彧伟; 郑淑婷; 李伟

摘要:白细胞介素1β(IL-1β)在免疫调节和炎症反应中起着重要作用。为了解黄鳝IL-1β基因的功能,以黄鳝肝脏cDNA为模板,PCR扩增IL-1β基因后将其亚克隆至pET28a表达载体中。将序列测定验证过的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组菌进行IPTG诱导后Ni 2+亲和柱分离纯化获得重组蛋白rIL-1β;用SDS-PAGE电泳和Western Blot检测rIL-1β。按2μg/kg剂量对黄鳝进行腹腔注射rIL-1β,用荧光定量PCR分析注射rIL-1β对肝脏IL-1β、NF-κB、AKR和Nrf2等基因表达的影响。结果表明:成功构建了黄鳝IL-1β基因的原核表达载体并实现了重组蛋白的分离纯化;重组的rIL-1β蛋白具有较好的生物活性,腹腔注射rIL-1β显著提高了肝脏IL-1β和NF-κB基因的表达水平,却对AKR和Nrf2基因的表达有明显的抑制作用。研究为进一步深入探索鱼类IL-1β基因在免疫系统中的功能提供了参考资料。

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关键词:
  • 黄鳝
  • 活性分析
  • 重组表达

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期刊名称:生物学

期刊级别:北大期刊

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杂志介绍:
主管单位:安徽省科学技术协会
主办单位:合肥市科学技术协会
出版地方:安徽
快捷分类:生物
国际刊号:2095-1736
国内刊号:34-1081/Q
邮发代号:26-50
创刊时间:1983
发行周期:双月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
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综合影响因子:1.01