一种快速检测微囊藻毒素mcyG基因的新技术——环介导恒温扩增

作者:张柏烽 朱鹏 严小军 党晨阳 吕亚厅 吴景华

摘要:利用环介导恒温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,以微囊藻毒素(Microcystins,MCs)合成基因簇中的mcyG基因为靶序列,设计了1 套LAMP引物,建立了LAMP反应体系并进行灵敏度和特异性实验。结果表明mcyG基因的最低检测限为:24 cfu/mL,远低于常规PCR(Polymerase Chain Reaction)。整个检测过程仅需 40 min,且可直接目测结果。特异性实验中, 13 株淡水常见水华蓝藻分属:色球藻属(Chroococcus)、念珠藻属(Nostoc)、鱼腥藻属(Anabaena)、束丝藻属(Aphanizomenon)、微囊藻属(Microcystis),其中10株呈阳性反应,3 株为阴性。在野外样品检测中,来自太湖与黄庆苗池塘的水样PCR检测显示阴性反应,而LAMP检测均呈阳性反应,提示此两处水样中可能含有产毒微囊藻,显示出了LAMP检测方法良好的野外检测和预警能力。综合上述,LAMP 检测方法能够快速检测产微囊藻毒素的关键基因,且结果可视化。该方法简便、快捷、不依赖特殊检测设备,极具推广前景。

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关键词:
  • 微囊藻毒素
  • 环介导等温扩增技术
  • 快速检测

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期刊名称:生态学报

期刊级别:北大期刊

期刊人气:5683

杂志介绍:
主管单位:中国科学技术协会
主办单位:中国生态学会;中国科学院生态环境研究中心
出版地方:北京
快捷分类:生物
国际刊号:1000-0933
国内刊号:11-2031/Q
邮发代号:82-7
创刊时间:1981
发行周期:半月刊
期刊开本:B5
下单时间:1-3个月
复合影响因子:3.21
综合影响因子:4.06