纳米自组装与超灵敏生物检测研究进展
摘要：纳米材料及其组件由于其特殊的电学、光学和磁学等性质已广泛用于生物、医学、环境等领域。作者综述了近年来纳米材料的最新研究进展,从分子模板介导的纳米自组装方法、纳米自组装超结构的光学性质等方面进行了概述。介绍了纳米材料作为光学传感器在生物超灵敏检测方面的应用,对纳米生物传感器的应用前景进行了展望。毕赤酵母分泌表达华根霉脂肪酶（r27RCLC）的糖基化鉴定
摘要：研究了毕赤酵母GS115中能够高效分泌表达的华根霉脂肪酶（r27RCLC）的糖基化情况。运用糖基化抑制剂衣霉素处理表达目的蛋白的毕赤酵母细胞,通过SDS-PAGE比较分析经衣霉素处理后的脂肪酶r27RCLC分泌表达量的变化,结果显示酶的分泌表达受到很大的抑制,说明脂肪酶r27RCLC在表达时候很可能发生了糖基化,且糖基化对其有重要影响。通过生物化学方法,利用内切糖苷酶PNGase F和Endo Hf酶切处理脂肪酶r27RCLC,SDS-PAGE和Western Blot,结果显示r27RCLC未发生糖基化。将样品r27RCLC通过胰蛋白酶酶解等步骤处理,进行MADLI-TOF-MS质谱分析,结果发现MADLI-TOF-MS鉴定结果与内切糖苷酶酶切处理结果一致,进一步证明毕赤酵母分泌表达的华根霉脂肪酶r27RCLC未发生糖基化。会议信息
摘要：会议名称（中文）：第九届全国食品冷藏链大会暨第六届全国冷冻冷藏产业创新发展年会 开始日期：2014—11-30 所在城市：广东省广州市 主办单位：中国制冷学会地衣芽孢杆菌在营养肉汤中生长模型的建立
摘要：考察了温度、NaCl质量分数及pH值对地衣芽孢杆菌在营养肉汤中生长特性的影响,建立了15-45℃下地衣芽孢杆菌的生长模型。结果表明：地衣芽孢杆菌的最适的生长温度范围为30-37℃,NaCl质量分数范围为0-3%,pH值范围为5.0-8.0。在15、20、25℃时其生长曲线用MMF模型拟合较好,在30、37℃用Richards模型拟合较好,其相关系数较高,均大于0.998。相反,在45℃其生长曲线只能用Logistic方程拟合,且相关系数较低,仅为0.907。复合改性改善大豆分离蛋白功能性质的研究
摘要：为考察糖基化接枝及酶法相结合的复合改性对于大豆分离蛋白功能性质的影响,以提高接枝度及产物乳化能力等功能性质为主要指标,制备大豆分离蛋白与麦芽糊精糖基化产物,随后采用中性蛋白酶对该产物适度酶解,得到不同水解程度的糖基化产物水解物,研究产物的乳化能力、起泡性能及抗氧化能力的变化。实验结果表明：经过接枝及适度酶解复合改性后,大豆分离蛋白的乳化能力、起泡性能及DPPH自由基清除能力均有了较大的提高,但深度的酶解有可能破坏蛋白的空间结构,降低粘度从而影响功能性质的发挥。二硫键对提高木聚糖酶AoXyn11A热稳定性的作用
摘要：为提高米曲霉11家族中温木聚糖酶AoXyn11A的热稳定性,将AoXyn11A与源于Thermomyces lanuginosus的耐热木聚糖酶XynA进行三维结构比对分析,发现XynA的α-螺旋与β9-折叠之间存在一个二硫键;基于分子动力学模拟预测结果,利用定点突变技术在AoXyn11A的相应位置引入二硫键（Cys^108-Cys^152）,获得突变酶AoXyn11AT;分别将AoXyn11A及其突变酶基因在大肠杆菌BL21（DE3）中表达,经纯化,获得重组AoXyn11A和AoXyn11AT,并分析比较温度对其酶活性的影响。结果显示,重组AoXyn11AT的最适温度为60℃,比重组AoXyn11A提高了5℃;其在50℃下的半衰期t1/2^50为71 min,较重组AoXyn11A（t1/2^50=25 min）提高了近2倍。研究表明二硫键对提高AoXyn11A的热稳定性有重要作用。挥发性有机酸对餐厨垃圾产沼气过程中胞外多聚物影响研究
摘要：餐厨垃圾的厌氧消化处置被认为是一种高效环保的技术,在减量化的同时还能产生沼气。然而由于餐厨垃圾自身较高的有机物含量,会造成反应体系挥发性有机酸的大量累积,严重抑制产甲烷活性。胞外多聚物作为微生物分泌到胞外的活性物质,其含量和组成会因挥发性有机酸积累导致的反应环境变化而变化明显。实验结果表明：随着物料负荷的升高,反应体系乙酸累积量增加,最高达到17.93 g/L。不同物料负荷下,胞外多聚物总量在反应进行过程中变化不明显,然而主要成分多糖和蛋白质的比例变化较大。反应后期蛋白质质量分数增加,其中S2组蛋白质质量分数最高达到0.038 mg/g,这可能是微生物响应高浓度乙酸环境,缓解挥发性有机酸毒害所引起的。3种类型的胞外多聚物组成随物料负荷的增加变化不同。溶解型和疏松型多糖/蛋白质比例随物料负荷变化明显,12 h时SMP和LB-EPS变化幅度达到70.2%和74.7%,而紧密型多糖/蛋白质比例较为稳定。阿魏菇多糖的相对分子质量及单糖组成的测定
摘要：测定了阿魏菇多糖（Pleurotus ferulae Lenzi polysaccharide,PFLP）的相对分子质量和单糖组成,在理论上为深入探究PFLP的结构以及构效活性奠定了基础。PFLP利用离子交换柱层析（DEAE-52Cellulose）和凝胶柱层析（Sephadex G-100）进行初步和进一步分离纯化,紫外、冻融、电泳实验对其进行纯度鉴定。利用Sephadex G-100柱层析法测定相对分子质量,气相色谱分析其单糖组成。经过分离纯化、纯度鉴定后得到两种纯PFLP组分,分别命名为PFLP1、PFLP2,其相对分子质量分别为5 582、7 963。PFLP1由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1︰1.66︰19.6︰3.98;PFLP2由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1︰0.40︰0.66︰6.76︰4.27。会议信息
摘要：会议名称（中文）：第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会 开始日期：2014—11-21 结束日期：2014—11—24皂苷类似物与肾素的分子对接和结合能分析
摘要：肾素是治疗高血压疾病的重要靶标之一,对肾素抑制剂大豆皂苷I及其类似物大豆皂苷II、甘草皂苷、单葡萄糖醛酸甘草皂苷元与肾素进行分子对接,采用分子动力学模拟和MMPBSA相结合的方法计算对接复合物的结合自由能,并且对各部分贡献能以及分子间相互作用进行分析。结果表明范德华力和静电相互作用是复合物形成的主要驱动力,S2和S3是肾素和皂苷相互作用重要的活性口袋,Ala229、Asp38、Asp226、Gly228和Tyr83是肾素中与这类抑制剂形成疏水作用的重要氨基酸残基,Ser230、Tyr231、Ser84则可与抑制剂形成氢键。对接结果与皂苷抑制能力吻合性较好,可为新的肾素抑制剂的发现奠定基础。液体发酵条件对灵芝菌体形态及胞外多糖活性的影响
摘要：作者主要研究灵芝在液体发酵过程中,发酵时间、初始p H值、培养温度等发酵条件对灵芝菌体形态、胞外多糖产量及多糖抗肿瘤活性的影响,其目的在于通过调控发酵条件获得高活性、高产量的灵芝多糖。依据灵芝菌球直径的大小,所有菌球被分为小型、中型和大型菌球,结果表明,发酵过程中菌体形态以中型菌球为主,在中小型菌球比例较高时有利于胞外多糖的合成,并且小型菌球比例大于大型菌球时,发酵液中多糖含量较高;在比较不同发酵条件下获得的胞外多糖对肿瘤细胞抑制作用时发现,pH 4.0和30℃条件下获得的多糖对小鼠肝癌细胞Hepa 1-6和人乳腺癌细胞MDA-MB-231具有更高的抑制作用。碳氮源对Bacillus pumilus K9产角蛋白酶的影响
摘要：对Bacillus pumilus K9以羊毛粉为底物产角蛋白酶的培养条件及培养基成分进行了单因素优化和正交试验,其中重点考察了碳氮源对K9产角蛋白酶的影响。实验结果表明,添加适量外加碳氮源比使用羊毛粉为唯一碳氮源更利于K9产角蛋白酶;葡萄糖、蔗糖和无机氮源等对产酶具有抑制作用,而适量的麦芽糖和酵母粉则对产酶具有促进作用。B.pumilus K9最适产酶条件为：麦芽糖15 g/L,酵母粉10 g/L,羊毛粉25 g/L,磷酸氢二钾0.4 g/L,氯化钠0.5 g/L;接种量6%,初始p H值为8.5,装液量为25 mL（250 mL）,温度35℃,转速220 r/min,培养时间48 h,上述条件下最高酶活达到1270 U/mL,较优化前提高了2.54倍。乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究
摘要：乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O-乙酰基,消除木聚糖酶水解木聚糖时该基团产生的空间阻碍作用。以宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）E001菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了乙酰木聚糖酯酶成熟肽的编码基因（Auaxe）,并构建了重组表达质粒p PIC9K^M-Auaxe,SalⅠ线性化后电转入毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115中,经G418抗性筛选及甲醇诱导表达72 h,获得了重组乙酰木聚糖酯酶（reAuAxe）,其酶活性为35.6 U/m L。发酵液经纯化获得电泳纯reAuAxe,其表观相对分子质量约为3.4×10^4,比酶活性为390.5 U/mg。纯化后reAuAxe的最适反应温度为50℃,在45℃及以下稳定;其最适反应pH为6.0,在pH 4.5-7.0范围内稳定;所测的多数金属离子及EDTA对其酶活性影响不大。会议信息
摘要：会议名称（中文）：2014年第二届应用生物技术国际会议 会议私称（英文）：The 2nd International Conference on Applied Biotechnology,ICAB 2014油茶甘油二酯激酶基因（CoDGK3）的克隆与表达分析
摘要：以油茶转录组数据为基础,采用RT-PCR和RACE技术,根据Unigene序列设计油茶甘油二酯激酶基因（CoDGK）RACE引物,分离克隆了DGK基因全长cDNA序列,命名为CoDGK3（GeneBank登录号：KM068056）,基因全长1568 bp,开放阅读框1 455 bp,编码485个氨基酸;氨基酸同源比对及序列分析表明油茶与其它物种的DGK氨基酸序列具有较高的相似性,其中与麻风树和毛果杨相似性最高,达到78%;利用生物学软件对蛋白质进行生物信息学分析,获得其结构特点及理化性质;分析转录组数据中DGK相关的Unigene序列RTKM值和对CoDGK3基因实施实时荧光定量PCR,结果表明CoDGK3在油茶种子发育各时期表达量变化差异不大,并且发现转录组数据分析和实时荧光定量分析的结果变化规律一致,证明了转录组测序的有效性。响应面法优化黑曲霉产葡萄糖氧化酶发酵条件
摘要：为了提高葡萄糖氧化酶的产量,通过响应面法对诱变后的黑曲霉菌株的发酵条件进行优化,首先利用Plackett-Burman设计筛选出对酶活影响最显著的因素：牛肉膏蛋白胨、吐温-60和磷酸氢二铵;继而用最陡爬坡实验逼近最大影响区域;最后利用Box-Behnken设计及其响应面分析确定最优的发酵培养基（g/L）：蔗糖87.5,牛肉膏蛋白胨3.15,NH4NO31.88,（NH4）2HPO40.34,KH2PO40.25,Tw-6030.47,玉米粉12.5,培养基优化后的发酵酶活为87.5 U/mL,与优化前（45.27 U/mL）相比提高了93.28%。在7 L发酵罐中对显著影响因素吐温-60的不同添加时间进行对比,确定对数期流加吐温-60可以显著提高发酵的酶活,发酵后酶活为92.88 U/mL。原生贡寮山药萃取物抗氧化成分及抗氧化活性的研究
摘要：探讨了干燥、萃取方式对原生贡寮山药（Dioscores alata）抗氧化成分以及抗氧化活性的影响。抗氧化成分分析了总多酚质量分数;体外抗氧化的测定方法包括DPPH自由基清除能力与还原力。结果表明,山药皮冷冻干燥后经过乙醇萃取所得萃取物的总多酚质量分数以及抗氧化能力最高。抗氧化能力及总多酚质量分数以冷冻干燥优于热风干燥,萃取方式以50%体积分数乙醇溶液最优,山药皮优于山药肉。HPLC分析萃取物中主要多酚成分为绿原酸。同时对体外抗氧化活性以及总多酚含量较高的原生贡寮山药的乙醇萃取物进行抑制体内细胞ROS产生测试,结果显示各个样品均可以显著降低由LPS所诱导细胞ROS的产生,抑制效果跟抗氧化能力结果一致。籼米基脂肪替代品对速溶咖啡口感的影响
摘要：研究了籼米为基质的脂肪替代品的制备工艺。通过单因素试验研究了耐高温α-淀粉酶添加量、籼米粉目数和水解时间对产品DE值的影响,并通过正交试验确定了制备籼米为基质的脂肪替代品的最佳工艺条件：酶添加量4.0 U/g米粉,水解时间30 min,籼米粉目数100目。制备的产品DE值3.0左右,干燥后产品为白色粉状物。利用提取脂肪替代品后的沉淀继续制备DE值13-17的麦芽糊精,工艺条件为：酶添加量40.0 U/g米粉,水解时间40 min。最后,添加质量分数6%的脂肪替代品和9%的麦芽糊精复配出的速溶咖啡口感最佳。