乳酸菌食品级表达系统的研究进展
摘要：乳酸菌是一类广泛使用的工业菌。近几十年来,乳酸菌作为同源和异源蛋白表达的宿主菌的潜在应用已得到深入研究,在此基础上建立和发展了乳酸菌食品级基因表达系统。首先介绍了乳酸菌食品级表达系统的一些基本条件,表达和标记系统的适用原则,然后追踪其前沿应用进展情况,对乳酸菌食品级基因表达系统的最新应用进行了归纳,根据此表达系统在当前食品经济中的位置,对其在食品工业、医药和保健品等领域的应用前景进行了展望。壳聚糖和植酸复合生物保鲜剂对冷藏鱼丸品质的影响
摘要：通过定期分析处理组和对照组鱼丸样品的感官特征、物理指标（白度、硬度、弹性）和微生物指标（菌落总数）指标,评价了复合保鲜剂0.4 g/dL壳聚糖和0.04 g/dL植酸对在-2℃冷藏条件下鱼丸品质的影响。结果表明,在冷藏过程中,保鲜剂处理能延长鱼丸货架期14 d以上,在货架期终点35 d时,保鲜剂处理组和对照组样品的细菌总数分别为3.51 lgCFU/g和6.3 lgCFU/g。保鲜组鱼丸白度分别为85.21%和86.12%,弹性分别为0.88和0.86,硬度分别为576.43和576.43,感官评分分别为3.76和2.73,失水率分别为6.63%和7.93%。可见,复合保鲜剂在鱼丸冷藏保鲜过程中能有效地抑制细菌繁殖,提高了感官品质,延长了货架期。抑制剂对Pichia生产S-腺苷甲硫氨酸的作用及机制
摘要：S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl-L-methionine,SAM）是市场前景广阔的高价值氨基酸。为通过削弱胞内SAM消耗而进一步提高其积累量,作者在诱导型和组成型P.pastoris发酵后期添加3种抑制剂。首先考察其作用并比较其差异,然后分析其机制。结果显示,添加S-腺苷高半胱氨酸水解酶抑制剂Aristeromycin有助于SAM积累,但比较而言,其在诱导型酵母中最适添加质量浓度更低,很可能因为甲醇代谢导致的氧化胁迫使细胞对甲基化作用依赖性增强。添加多胺合成抑制剂DFMA有利于SAM积累,但添加过多对细胞生长和抗氧化不利。组成型酵母中添加7.5 g/L乙酸可通过抑制多胺生成而增强SAM积累。3种抑制剂均可有效提高P.pastoris中SAM产量。白腐菌Trametes hirsuta SYBC-L19液态发酵水葫芦产漆酶
摘要：利用单因素法和响应面法对白腐菌Trametes hirsuta SYBC-L19利用水葫芦液态发酵产漆酶的培养基和培养条件进行了优化,确定了最佳培养基：水葫芦41.0 g/L,玉米浆粉50.8 g/L,葡萄糖30.0 g/L,CuSO4.5H2O 0.6 g/L,吐温-80 0.5 g/L,香兰素0.5 mmol/L,无机盐混合液50 mL/L。最佳培养条件为：培养温度30℃、初始pH值4.0、装液量80 mL/250 mL、接种体积分数8%,200r/min摇瓶培养8 d,酶活性达7 784 U/L,是优化之前的17.3倍。该研究为水葫芦等生物质资源的有效利用提供了参考。米黑霉脂肪酶基因的高效表达及活性测定
摘要：为了实现米黑霉脂肪酶（Rhizomucor miehei Lipase,RML）基因在大肠杆菌中的高效表达,并得到大量的具有生物活性的脂肪酶,首先通过3种方式提高RML在大肠杆菌中可溶性蛋白的表达量：1）低温诱导（16℃）RML表达;2）新型分子伴侣（Skp）与RML N端融合表达;3）载体pET32a上的Trx.tag与RML N端融合表达。其次对各蛋白质进行纯化及活性测定,各种条件得到的RML比活在（226±10~247±10）U/mg。蛋白质表达结果显示：经低温诱导RML的效果最好,纯蛋白质量浓度为0.86 mg/mL,表明诱导温度是影响可溶性蛋白质表达量的关键因素;活性测定结果表明,Skp和Trx.tag与目的基因N端的融合没有影响RML活性中心（C末端）对底物的结合和催化能力。因此,RML不仅在大肠杆菌中得到高效表达,并且保持原有生物学活性,在工业生产中有应用价值。人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制
摘要：筛选获得毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K/hsa-ifnα2b,胞外分泌表达rHSA-IFNα2b药物蛋白。经摇瓶及5 L发酵罐条件优化,确定最佳发酵条件。经50 L发酵罐工艺放大,发酵产量稳定,可达到350 mg/L。离心获得发酵上清液,超滤浓缩10倍,再依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析及Q Sepharose 6FF离子柱纯化。纯化产品进行SDS-PAGE纯度检测、SEC-HPLC检测、相对分子质量测定、N端测序、内毒素检测和生物活性检测。筛选获得一株高产菌,优化获得最佳的发酵条件。纯化产品检测（SEC-HPLC）纯度大于95%,相对分子质量为85 821,氨基酸的N端测序为DAHKSEVAHRFKDLG,与预期的相符。内毒素含量小于5EU/mg,符合国家药典的要求。体外生物细胞活性高达1.6×106IU/mg。具有良好的工业应用价值。不同加工工艺对香菇脆片品质的影响
摘要：主要研究了真空油炸、真空微波、真空干燥3种加工香菇的方法。比较了3种加工方法的色泽、酥脆度、能耗、外形、风味方面的不同,同时确定了香菇的前期处理工艺条件。结果表明：用0.01~0.02 g/dL EDTA-2Na＋0.3 g/dL柠檬酸作为护色液,于（95±2）℃漂烫2~3 min能最有效地抑制褐变。荧光定量PCR分析土壤杆菌及其ntrC突变株对氮源的应答反应
摘要：热凝胶是土壤杆菌在环境氮源限制时产生的水不溶性多糖,其合成与氮源代谢调控相关,但其机理还不清楚。作者使用荧光定量PCR的方法比较了土壤杆菌野生菌株和其ntrC突变株在氮源充足和限制条件下氮源代谢相关基因和碳代谢相关基因的转录水平差异,探索了土壤杆菌对氮源限制环境的应答机制及氮源调控蛋白NtrC和热凝胶合成之间的关系。结果表明土壤杆菌在环境氮源限制时,ntrB,glnA,glnB,nifR等4种氮代谢相关基因和exoC,exoN,crd,cisY,ndk,glmU等6种碳代谢基因的相对转录水平都有不同程度的提高,表明当环境氮源缺乏时土壤杆菌调整细胞整体代谢（包括氮源吸收代谢、碳代谢、能量合成等）,同时使碳代谢流进入热凝胶合成途径用于能量储存。NtrC蛋白参与调控热凝胶合成,而且热凝胶合成过程相关酶的调控,除了存在转录水平调控外,还可能还存在翻译水平的调控。ntrC突变株的热凝胶合成能力相对于野生菌显著降低,且热凝胶合成基因crd在氮源缺乏时的相对转录水平较野生菌株高,推测NtrC蛋白并非crd基因的转录因子。天山冻土中嗜冷酵母菌生物多样性
摘要：采用麦芽浸膏富集平板涂布天山冻土中可培养酵母菌,通过麦芽浸膏分离培养基筛选菌株。采用酵母菌常规生理生化实验、最适生长温度、最适pH对分离菌株的生理学进行研究。以NL1和NL4为PCR扩增引物,通过26S rRNA基因D1/D2区序列同源性分析,初步确定酵母菌株的系统进化地位。分离筛选到4株嗜低温酵母菌,分属于隐球酵母（Cystofilobasidium infirmominiatum）、掷孢酵母（Sporobolomyces patagonicus）、棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）和毕赤酵母（Pichia kluyveri）。青芥辣中辣根水解度的优化
摘要：为了提高青芥辣中辣根的水解度,改善青芥辣产品品质,特在以辣根粉为原料加工青芥辣的过程中对辣根水解度进行了研究。作者研究了温度、时间、pH值以及抗坏血酸（VC）添加量四因素对青芥辣中辣根水解度的影响。单因素试验及正交试验的结果显示：最佳水解条件为温度60℃、时间1 h、pH值5.0、抗坏血酸（VC）添加量0.2 mg/g。以上结果为进一步提高青芥辣中辣根水解度提供参考。SYBR Green实时荧光PCR检测食品中鲨鱼源性成分真实性方法的建立
摘要：为确保鲨鱼产品的真实性,作者研究建立了食品中鲨鱼源性成分的SYBR Green实时荧光PCR鉴定方法。运用建立的SYBR Green实时荧光PCR方法对9种鲨鱼及48种常见非鲨鱼类动植物样品进行检测,9种鲨鱼样品均出现扩增曲线,且熔解曲线在（84±1.5）℃内出现峰值;其他非鲨鱼样品中均未出现扩增曲线,熔解曲线在（84±1.5）℃也未出现峰值。该检测方法的检测限为0.000 1 ng/μL鲨鱼DNA和质量分数0.01%狗鲨肉粉。运用建立的方法对20种常见的鲨鱼产品进行PCR检测,除仿鱼翅和鲨鱼肝油外所有产品中均能检测出鲨鱼成分。结果表明,该检测方法特异性强,灵敏度高,能够用于食品中鲨鱼源性成分的真实性鉴别。甘草、连翘提取液及其复合液对桃果实保鲜效果的影响
摘要：为探讨甘草、连翘提取液及其复合液对桃果实保鲜效果的影响,分别用料液比为1∶20的甘草提取液、连翘提取液以及两者按3∶1、1∶3、1∶1比例混合的复合液共5种处理浸泡桃果实各5min,以蒸馏水浸泡处理桃果实5 min为对照（CK）,研究了不同中草药提取液处理对桃果实生理生化变化的影响。结果表明：与对照相比,不同中草药提取液处理均可在不同程度上提高桃果实的保鲜效果,其中甘草提取液和甘草∶连翘=1∶1复合液2种处理能够显著（P〈0.05）降低桃果实的失重率,推迟呼吸高峰的出现并降低峰值,减缓可溶性固形物（SSC）及可滴定酸（TA）质量分数的下降,抑制丙二醛（MDA）质量摩尔浓度的上升,维持较高的VC质量分数,保持桃果实良好的感官品质,并使其贮藏期比对照延长2 d。碱性蛋白酶产生菌的筛选鉴定及培养优化
摘要：通过对筛选的产碱性蛋白酶菌株进行形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析鉴定,确定高活力菌株为解淀粉芽孢杆菌。发酵碳源、氮源和金属盐的优化,确定优化培养组分。对接种体积分数、培养温度和培养pH进行研究,确定最佳培养条件。在最优条件下培养18 h后获得最大酶活力为395.18 U/mL,产酶能力比优化前提高了2.55倍。该研究为深入研究工业发酵生产碱性蛋白酶提供了参考。几种不同干燥方法对荔枝肉干燥品质的影响
摘要：作者对剥壳荔枝用热风干燥法、热风微波耦合干燥法、微波真空干燥法及真空冷冻干燥法进行干燥,分别取其最优的干燥工艺并进行对比,通过测定不同干燥方法的蛋白质、还原糖的成分和色泽,分析干燥产品的质量,据此可根据不同的需求选择不同的干燥方法。质量法和HPLC法相结合检测酶解后烟梗果胶质质量分数
摘要：将质量法和高效液相色谱法相结合,建立了适合于酶解后烟草样品中果胶质质量分数的检测方法。首先对酶解后的烟梗及梗丝样品进行酸解、过滤处理,所得到的固态样品的果胶酸用质量法检测,原质量法中被丢弃上清液中的半乳糖醛酸质量分数则采用HPLC法检测,将两种方法测定并换算得到的果胶质质量分数相加。结果显示：用HPLC法检测时,半乳糖醛酸检测结果的变异系数为0.33%,平均回收率为99.32%。该法测得的总果胶酸质量分数,其变异系数比用传统质量法检测果胶酸质量分数所得的变异系数有所降低。该方法果胶质提取更充分,酶解后烟梗及梗丝中各种形态的果胶质都能得到检测,具有检测结果更准确、方法简单、便于实际操作的优点。不同碳源对黑芝菌丝体液体发酵的影响
摘要：对黑芝菌丝体液体发酵体系进行了研究。实验中以黑芝菌丝体生物量为主要评价指标,通过正交实验研究了无机盐、维生素和碳源在黑芝菌丝体发酵中的交互作用。结果显示：黑芝菌丝体对果糖的吸收利用要优于蔗糖和乳糖,且当碳源种类不同时,黑芝菌丝体对无机盐和维生素的需求也明显不同。实验中筛选出的较适宜黑芝菌丝体液体发酵的培养基为：果糖20 g/L＋KH2PO42 g/L＋K2HPO42 g/L＋MgSO4.7H2O 2 g/L＋CaCl2.2H2O 1 g/L＋VB120 mg/L,pH自然。黑芝菌丝体在此培养基中发酵培养7 d,菌丝生物量可达0.808 6 g/dL。水生蔬菜加工保鲜品质调控关键技术研究
摘要：水生蔬菜产业是我国的特色传统优势产业,其保鲜加工产品是我国出口创汇的主要农产品之一。水生蔬菜营养丰富,风味独特,天然环保,随着人们健康意识的增强,水生蔬菜的保健功能也越来越受到关注,但由于保鲜贮藏难,品质和风味劣变快的特点,抑制了水生蔬菜产业的快速发展,应着手解决我国水生蔬菜保鲜加工产业中存在的问题。食品与生物技术学报2012年第31卷总目次
