历史文献学习札记：色谱法诞生110周年纪念
摘要：今年是色谱法诞生110周年。经过110年的发展,色谱法从曾经鲜为人知的实验技术发展成为既能＂顶天＂又能＂立地＂的一门科学,取得了辉煌的成就。1952年,马丁（Archer John Porter Martin）和辛格（Rich-ard Laurence Millington Synge）因分配色谱获得了诺贝尔化学奖。万古霉素键合固定相的分离性能
摘要：万古霉素作为一种大环抗生素,具有复杂的分子结构。在充分考虑万古霉素分子结构特征的情况下,采用戊二醛间隔臂法制备了万古霉素键合固定相,在反相、亲水、离子交换等分离模式下研究了其色谱分离性能。结果表明,当流动相中有机调节剂含量较低时,该色谱柱表现出典型的反相色谱分离模式特征;随着有机调节剂含量的增加,逐渐转变成亲水模式,分离特性发生明显改变。由于万古霉素分子结构中含有可以解离的氨基,因此该固定相也能够用于阴离子交换模式下的分析方法的发展。分别在反相、亲水和阴离子交换模式下,将其应用于扑尔敏等多种非对映体药物和新型甜味剂甜菊糖的高效液相色谱分离;仅通过改变分离条件,即可在3种不同分离模式下完成分离。这些结果可以为新型色谱固定相的设计,以及发展采用特殊结构改性基团的色谱固定相在相应分离模式下的分析方法提供指导。一种亲水-亲油复合固相萃取填料的制备及其在食品安全检测中的应用
摘要：合成了一种以二乙烯苯和N-乙烯吡咯烷酮为单体的高分子聚合物固相萃取填料（DVB-NVP）,以6种不同极性的化合物为模型化合物,结合高效液相色谱法（HPLC）对该填料进行了系统的评价,并与传统的C18填料及商品化同类型填料做对比;对填料进行了磺酸化修饰（DVB-NVP-SO3H）,并将合成的填料应用于复杂基质中化合物的分析。结果表明：该填料对不同极性化合物的回收率在95.55%～101.08%之间,优于商品化C18填料,与商品化同类型填料相当。DVB-NVP对于白酒中邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯的分析回收率分别为102.55%、102.99%、102.11%,相对标准偏差分别为2.11%、1.69%、0.79%;DVB-NVP-SO3H用于对猪肉中的可乐定和赛庚啶进行分析,回收率分别为89.23%和91.42%,相对标准偏差分别为8.21%和8.86%,符合生物样品分析要求。所合成的填料具有普适性,并具有较高的回收率,应用前景广泛。等电聚焦预分离用于肝癌细胞分泌蛋白质组的分级与鉴定
摘要：分泌蛋白质组（secretome）是指在特定的时空条件下,细胞、组织等分泌的全部蛋白质。分泌蛋白质组可能包含了大量的疾病诊断生物标志物,因此其相关研究越来越受到重视。分泌蛋白质组的组成高度复杂且浓度范围宽,这对分析方法提出了挑战。建立有效的蛋白质或肽段预分离策略,将有利于分泌蛋白质的高覆盖率鉴定。本研究以肝癌细胞系MHCC97L的无血清培养分泌蛋白质为研究对象,采用一种新型等电聚焦预分离（OFFGEL）系统,考察了肽段水平的分级对蛋白质鉴定结果的影响。结果表明,分离后各馏分中肽段的等电点分布与理论预测基本一致,每个馏分中单独鉴定的肽段比例接近80%,显示了该系统对肽段的高分辨分离能力。结合生物质谱技术,在肝癌细胞分泌系统中鉴定了2 995个蛋白质,显示了该系统在复杂体系蛋白质组研究中的应用潜力。超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱分析黄酮类化合物及小毛茛茎叶的成分
摘要：为了探索液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术在快速识别中药及天然产物成分中的应用,以黄酮对照品为研究前体,药用植物小毛茛为研究对象,采用超高效液相色谱/二极管阵列检测器-电喷雾四极杆串联飞行时间质谱（UPLC/DAD-ESI/Q-TOF MS）分析了黄酮类化合物同系物及同分异构体的色谱、质谱特性。结果显示：黄酮氧苷和黄酮碳苷的紫外吸收光谱及二级质谱具有显著性差异,糖苷化位置同保留时间、二级质谱碎片及相对丰度具有相关性。将该方法应用于小毛茛茎叶醇提液的分析,结合其酸水解液的分析,解析了22个黄酮醇糖苷和3个苷元。方法简便,具有可操作性。高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查和确证纺织品中禁用的偶氮染料
摘要：建立了高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱（HPLC-LTQ/Orbitrap MS）快速筛查确证纺织品中禁用的偶氮染料的方法。样品在柠檬酸缓冲液中由连二亚硫酸钠还原成芳香胺,经硅藻土提取柱净化后,用Acquity UPLC BEH C18柱（50mm×2.1mm,1.7μm）分离,以甲醇和0.1%（v/v）甲酸作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子（ESI＋）模式电离,高分辨质谱一级全扫描用于筛选分析,数据依赖扫描模式的二级碰撞诱导解离（CID）谱图用于确证,对纺织品样品中的偶氮染料进行定性鉴别。在0.05～2.00mg/L范围内,21种致癌芳香胺的线性相关系数均大于0.99。通过实际样品的加标回收测定,回收率范围为65.5%～111.5%,相对标准偏差（n=6）为0.87%～2.49%。该方法的定量限可以达到0.08mg/kg,可用于纺织品中禁用偶氮染料的实际检验工作。新书介绍：《实用原子光谱分析》
摘要：由清华大学邓勃教授主编的《实用原子光谱分析》已于2013年8月由化学工业出版社出版。原子光谱包括原子发射光谱（AES）、原子吸收光光谱（AAS）和原子荧光光谱（AFS），已广泛地应用于各类样品的元素分析。超高效液相色谱-串联质谱法同时测定土壤中239种农药的残留量
摘要：建立了超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）,可于10min内快速测定土壤中的239种农药残留。土壤样品经AOAC（Association of Official Analytical Chemists）QuEChERS方法处理,用乙腈萃取;无水硫酸镁、乙酸钠固液分离后,过0.2μm滤膜;在UPLC-MS/MS正、负离子同步扫描多反应监测模式下进行分析。239种农药中,线性相关系数（r2）大于0.99的有236个,占总数的99%。在40μg/kg添加水平下所有被检测农药的回收率均在50%～150%之间,且相对标准偏差（RSD）均小于20%;其中有209种农药的回收率达到70%～120%,有161种的RSD小于10%。方法的检出限（LOD）范围为0.69～29.04μg/kg。土壤中多种农药残留的同时检测要求时间短、准确度和精密度高,本方法符合这些检测要求,适用于土壤中农药残留的检测。分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时检测火锅食材中11种喹诺酮类药物
摘要：建立了一种固相分散萃取-超高效液相色谱-串联质谱（QuEChERS-UPLC-MS/MS）同时检测火锅食材中11种喹诺酮类药物的方法。样品用5%甲酸乙腈溶液提取后加入盐析剂分层,提取液中加入C18和PSA填料进行基质分散固相净化,浓缩后经Poroshell 120EC-C18柱分离,用电喷雾离子源正离子多反应监测（MRM）模式串联质谱进行检测。11种药物在1.0～100.0μg/kg范围内具有较好的线性关系,相关系数均大于0.998。该方法检出限（LOD）为1.8～3.1μg/kg,定量限（LOQ）为6.0～10.3μg/kg。11种药物的回收率为70.1%～100.3%,相对标准偏差（RSD）为2.42%～10.88%。该方法简便快速、灵敏度高、准确度好、使用范围广,可作为火锅食材中11种喹诺酮类药物残留的确证方法。反相高效液相色谱法同时测定甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质含量
摘要：建立了同时测定甘草酸单铵盐原料药中主成分18α-甘草酸、18β-甘草酸及其有关物质A、有关物质B含量的高效液相色谱法,并用于其质量标准的建立。采用Durashell C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,以10mmol/L高氯酸铵（氨水调节pH 8.20）-甲醇（48∶52,v/v）为流动相,流速0.80mL/min,检测波长254nm,柱温50℃,进样量10μL。在优化的色谱条件下,18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A、有关物质B在0.50～100mg/L范围内线性关系良好（r〉0.999 9）,检出限分别为0.15、0.10、0.10、0.15mg/L,平均回收率在97.32%～99.33%之间（n=3）,相对标准偏差（RSD）在0.05%～1.06%之间。本方法检测灵敏、重现性好,结果准确可靠,可用于甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质的检测分析,有利于其原料药的质量控制。高效液相色谱法测定乳制品中的双氰胺
摘要：建立了乳制品中双氰胺的高效液相色谱（HPLC）检测方法。样品经乙腈提取后采用HPLC测定。优化后的色谱条件：XBridge Amide柱（250mm×4.6mm,3.5μm）,流动相为乙腈和水（体积比为90∶10,含0.2%甲酸）,流速为1.0mL/min,检测波长为218nm。方法在0.5～50mg/L范围内线性关系良好,相关系数（r2）为0.999 9,回收率在96.7%～101.0%之间,RSD为4.5%～4.9%（n=6）,检出限为0.2mg/kg（S/N=3）,定量限为0.5mg/kg（S/N=10）。该方法简单、准确、灵敏度高,适用于各种乳制品中双氰胺的检测。同位素稀释气相色谱/三重四极杆串联质谱法分析环境样品中的多氯萘
摘要：采用稳定同位素标记的多氯萘（PCNs）同类物为内标,建立了同位素稀释气相色谱/三重四极杆串联质谱技术测定环境样品中20种高关注的PCNs同类物的方法。结果表明：PCNs同类物的校正曲线在0.5～200μg/L范围内线性良好（R2〉0.99）,检出限（LOD）为0.04～0.48μg/L,相对标准偏差（RSD）小于15%。采用基质加标法评价该方法对实际环境样品中PCNs测定的回收率为45.2%～87.9%。为验证方法的适用性,以河流沉积物和再生铝冶炼排放的烟道气样品为对象,利用所建立的方法测定了20种PCNs同类物,并将结果与高分辨气相色谱/高分辨质谱方法的测定结果进行了比对,两种方法测定结果的RSD为0.5%～41.4%,表明所建立的同位素稀释气相色谱/三重四极杆串联质谱方法可用于实际环境样品中PCNs的定性、定量分析。气相色谱-质谱法测定蔬菜和水果中193种农药的残留量
摘要：在系统优化固相萃取吸附剂填料类型、洗脱溶剂种类及体积的基础上,建立了蔬菜和水果中193种农药残留的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经乙腈均质提取,C18/PSA固相萃取柱净化,乙腈洗脱,GC-MS选择离子监测（SIM）模式检测,以磷酸三苯酯内标法定量。结果表明,130种农药在10～1 000μg/L、34种农药在20～1 000μg/L、26种农药在50～1 000μg/L、3种农药在100～1 000μg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.996 7～1.000 0,方法检出限（以信噪比为3计）为0.04～8.26μg/kg,添加回收率为71.6%～117.9%,相对标准偏差为3.0%～11.8%。该方法样品处理简单快速,相比其他多残留分析方法净化效果好,其灵敏度和选择性明显提高,适用于日常检测工作。适用于质谱分析的在线固相萃取除盐方法
摘要：建立了一个简单、快速、有效的适用于质谱或液相色谱-质谱联用的在线固相萃取（SPE）高通量除盐方法。方法分为单柱和双柱模式,借助于包含双梯度泵（上样泵/分析泵）、自动进样器和配有十通切换阀的柱温箱的高效液相色谱系统,完成样品的自动化在线除盐。单柱模式通过上样泵实现在SPE柱上进样和除盐,被分析物则保留在SPE柱上;除盐完成后,通过阀切换利用分析泵洗脱富集在SPE柱上的被分析物。双柱模式则在单柱模式基础上增加了1根SPE柱,在色谱管理软件控制下2根SPE柱轮流工作,高效率完成样品的在线除盐。该方法在结合质谱分析蛋白质、多肽等领域具有较好的应用前景。固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时检测尿样中的麻黄碱和N-甲基麻黄碱
摘要：建立了固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾串联质谱（SPE-UPLC-ESI MS/MS）联用方法,定量测定尿样中的麻黄碱和N-甲基麻黄碱。样品经Oasis MCX柱提取、纯化和富集后,采用电喷雾（ESI）离子源电离,正离子多反应监测（MRM）模式质谱进行定性和定量分析。麻黄碱和N-甲基麻黄碱在0.025 0～2.50μg/L质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数分别为0.999 8和0.999 2,提取回收率高于80%,提取效率的RSD小于5.0%,检出限均达到0.01μg/L,可大大延长尿样检材中麻黄碱和N-甲基麻黄碱的检测周期。结果表明,该方法快速、准确,为尿液中痕量麻黄碱和N-甲基麻黄碱的分析提供了灵敏的分析方法。超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中毒死蜱的主要代谢产物3,5,6-三氯-2-吡啶醇
摘要：建立了人尿液中毒死蜱主要代谢产物3,5,6-三氯-2-吡啶醇（3,5,6-TCP）的超高效液相色谱-串联质谱分析测定方法。采用二氯甲烷-乙酸乙酯（20∶80,v/v）溶液中性条件下提取,ACQUITY UPLC BEH C18柱色谱分离,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,在电喷雾电离（ESI）负离子模式下,选择离子监测（SIR）方式检测。方法线性范围为0.005～0.4mg/L,检出限为0.41μg/L,平均加标回收率为97.9%,日内及日间精密度（RSD）均小于15%。该方法操作简单、灵敏度高、准确性好、重现性强,已成功应用于人尿液实际样品中3,5,6-TCP的测定,为毒死蜱的人体健康风险暴露评估以及其生物负荷的痕量监测提供了有效的方法支撑。高效液相色谱-串联质谱法测定饲料和卧床土中的环境雌激素
摘要：建立了饲料和卧床土中雌三醇、雌二醇、雌酮、双酚A和己烯雌酚5种环境雌激素的固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定方法。对色谱流动相、质谱条件、固相萃取柱等影响因素进行了优化,得到的最优化条件为：样品经乙腈提取后,用固相萃取柱（NH2-SPE）进行富集,采用Acquity UPLCTM HSS T3色谱柱分离,以乙腈-甲醇（4∶1,v/v）与0.01%氨水为流动相,采用梯度洗脱,在负离子模式下进行MS/MS测定。在该优化条件下,5种环境雌激素的检出限（以信噪比为3计）为0.06～0.22μg/kg,回收率为81.70%～102.20%,相对标准偏差小于10.00%。该方法用于饲料和卧床土中的5种环境雌激素残留量的测定具有简便、快速、灵敏的特点。液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱和超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱用于检测牛肉中的刚果红
摘要：建立了牛肉中刚果红的检测方法。定性方法采用液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱对未知物进行质谱谱图库匹配,定量分析采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱。牛肉样品中的刚果红经液液萃取净化后,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18Rapid Resolution HD色谱柱（50mm×2.1mm,1.8μm）进行分离,流动相为95%（体积分数）甲醇,流速为0.2mL/min。AB 4000＋三重四极杆质谱仪在电喷雾负离子化（ESI）及MRM模式下定量。结果显示,刚果红在0.03～1mg/L浓度范围内,线性关系良好（相关系数为0.999 8）,精密度良好（RSD小于5%）,回收率为88%～91%,检出限约为0.01mg/L。本方法快速简便,重现性好,可以为牛肉及其他肉制品中刚果红的定量提供良好的解决方案。
