生物大分子的混合模式色谱法——传统的色谱观点正在被改变
摘要：有卓受邀为一个月前出版的J ChromatogrA撰写了一篇题为“生物大分子的混合包谱及应用”的综述文章，在此后又有几篇很有创意的相关论义发表，和此选择具有代表性的有关蛋白质和多肽分离的论文3篇及本人所撰写的综述文章共4篇论文的内容简要作一介绍。纳米粒子毛细管电泳／微流控芯片新技术及其在手性分离中的应用
摘要：纳米粒子因其具有较大的比表面积和良好的生物相容性等特点，已广泛应用于分离科学领域。纳米粒子毛细管电泳／微流控芯片技术是纳米材料技术与毛细管电泳／微流控芯片技术相结合的产物。纳米粒子町以被吸附或键合到毛细管壁作为心定卡甘与被分析物发生相互作用；也可以作为似固定相参与样品住柱内的分配和保留，从而提高柱效，改善分离。手性是自然界的本质属性之一，开发新的快速、高效、灵敏的手性分离分析方法对于对映体的立休选择性合成、药理研究、下性纯度检测和环境检测都具有重要的意义。本文主要综述了近些年来几种不同类型纳米粒子（聚合物纳米粒子、磁性纳米粒子、金纳米粒子、碳纳米管和其他类型纳米粒子）用于毛细管电泳／微流控芯片进行手性分离的现状，并对该领域今后的发展进行了展望。基于气相色谱-质谱联用的代谢组学用于黄连治疗Ⅱ型糖尿病的机理探索
摘要：将代谢组学的方法用于研究黄连治疗Ⅱ型糖球病的机理。Ⅱ型糖尿病造模采用对大鼠灌胃脂肪乳并腹腔注射40mg／kg链脲佐菌素的方法，大鼠分为正常组、模型组、黄连给药治疗组（10g／kg）、二甲双胍给药治疗组（0．08g／kg）。大鼠给药30火后，采集血样用于生化指标的检测．采集24h尿样，用于代谢组学的分析。与模型组相比，糖尿病大鼠给药黄连30灭后，空腹血糖值（FBG）显著降低了59．26％，总胆固醇（TC）降低了58．66％．甘油三酯（TG）降低了42．18％。采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对大鼠尿样中的内源性物质进行了相对含量测定，主成分分析结果表明，正常组与模型组显著分离，黄连组处于正常组与模型组之间，更接近于正常组。发现12个代谢物与糖尿病有关，包括4-甲基苯酚、苯甲酸、氨基丙二酸等。给药黄连后，其中的7个代谢物发生鼎著性回调，与氧化应激状态相关的氨基丙二酸和L-抗坏血酸出现向正常组显著性调节的趋势。这些结果表明，黄连不仅具有降糖和降血脂的作用，而且具有抗氧化作用，在一定程度上可能会抑制糖尿病合并症的发生和发展。气相色谱-串联质谱法测定人参和黄芪中7种毒杀芬残留量
摘要：建立了人参和黄芪中毒杀芬代表性单体残留量的检测方法。选择7种指示性毒系芬坼体为检测品种，样品用环己烷－丙酮（9：1，v／v）加速溶剂萃取法提取，经弗罗里硅土固相萃取柱净化后，以气相色谱-电子轰击离子源串联质谱（GC-EI-MS／MS）在多反应监测（MRM）模式下进行测定。在人参和黄芪两种中药材样品基质，0．005、0．01和0．1mg／kg3个加标水平条件下，7种毒杀芬单体的回收率为72．4％-105％，相对标准偏差为0．96％-10．4％；方法的检出限（S／N=3）为0．2-1．7μg／kg，均符合农药残留检测要求。该方法提取效果好，检测灵敏度高，适用于人参和黄芪中7种毒杀芬残留量的检测。微波辅助萃取-气相色谱-质谱法测定丙烯酸树脂中9种残余单体
摘要：建立了丙烯酸树脂中9种残余单体（丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、丙烯酸丁酯、甲丛丙烯酸丁酯、苯乙烯、丙烯酸、甲基丙烯酸）的微波辅助替取-气相色谱-质谱检测方法。固体丙烯酸树脂样品用乙酸乙酯微波萃取后加甲醇沉淀（液态丙烯酸树脂样品冉按用甲醇稀释）后，采用DB-WAX毛细管柱分离。结果表明，本方法在20min内同时分离了9种单体，所测物质的定量限（LOQ，以信噪比为10计）为3-50mg／kg（固体树脂）和1-10mg／kg（液态树脂）；在1-500mg／L范围内，线性相关系数均在0．995以上；在5个添加水平下平均回收率为84．4％-108．6％，相对抓准偏差（n=6）为0．27％-4．97％。方法的灵敏度和回收率高、选择性好，能满足实际工作的要求。固相萃取-气相色谱-质谱法测定食品中23种邻苯二甲酸酯
摘要：建立了同时检测食品中23种邻苯二甲酸酯类化合物的固相相萃取-气相色谱-质谱（GC-MS）分析方法。样品经正己烷或乙腈提取、玻璃ProElutPSA固相萃取柱净化，GC-MS选择离子监测模式（SIM）测定。考察了不同种类食品的提取、净化方法。23种邻苯二甲酸酯的线性范围除邻苯二引酸二异壬酯（DINP）和邻苯二甲酸二异癸酯（DIDP）为0．5-5mg／L外，其余均为0．05-5mg／L，相关系数（r）除DIDP外均大于0．99。方法的检出限（信哚比为3）为0．005-0．05mg／kg，定量限（信噪比为10）为0．02-0．2mg／kg。在10种食品基质中3个加标水平的平均回收率为77％-112％，相对标准偏差（RSD，n=6）为4．1％-12．5％。该方法稳定、可靠，操作简单，适用于食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测与确证。串联双柱固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量
摘要：建立了同时测定番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的串联双柱净化-液相色谱-串联质谱方法。样品中的残留物用磷酸盐缓冲液（pH4）提取，经分散固相萃取净化和串联双住固相萃取净化后，用极性色谱柱在梯度洗脱条件下分离待测物，采用正离子电喷雾离子源（ESI＋）在多反应监测（MRM）扫描模式下进行测定，外标法定量。链霉素和双氢链霉素在0．01-0．2mg／L质量浓度范围内线性关系良好，相关系数（r）大于0．999。链霉素和双氢链霉素的定量限均为0．02mg／kg，回l收率为71％-101％，相对标准偏差为2．3％-15％。该方法操作简便，净化效果好，灵敏，准确，适用于检测和分析番茄酱及其制品中链霉素和双氢链霉素残留量。亲水作用色谱-串联质谱法测定稻米中的草甘膦和氨甲基磷酸残留量
摘要：采用亲水作用色谱-串联质谱建立了同时测定稻米中草甘膦及其主要代谢物氨甲基磷酸残留量的检测方法。样品经水提取,C18固相萃取柱和超滤膜净化,以1 mmol/L乙酸铵溶液（用氨水调pH=11.0）-乙腈为流动相,亲水作用色谱柱分离,采用电喷雾离子源、负离子扫描模式和多反应监测模式质谱检测,基质匹配标准溶液外标法定量。草甘膦和氨甲基磷酸分别在0.001～0.250 mg/L和0.002 5～0.250 mg/L质量浓度范围内线性关系良好,检出限（信噪比为3）分别为0.010 mg/kg和0.020 mg/kg。通过对空白大米样品进行0.100、0.500和2.500 mg/kg3个加标水平的回收试验,草甘膦和氨甲基磷酸的平均回收率和相对标准偏差分别为96.3%～107.3%和1.3%～9.1%（n=3）。该方法无需衍生,净化步骤简便快速,定量准确,可满足稻米中草甘膦和氨甲基磷酸残留检测要求。超高效液相色谱-串联质谱法检测畜产品和水产品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留
摘要：以猪肉、猪肝、猪肾、胖头鱼、对虾和蟹为试验材料,建立了喹乙醇（OLA）的残留标示物3-甲基喹口恶啉-2-羧酸（MQCA）残留的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。采用0.2 mol/L盐酸提取可食性组织中的分析物,经C18固相萃取小柱净化、35℃氮气吹干及含0.1%（v/v）甲酸的乙腈溶解后,采用超高效液相色谱分离,串联质谱法确证和定量分析。质谱检测采取正离子多反应监测模式,外标法定量。结果表明：MQCA在2～500μg/L范围内呈良好的线性关系,各组织中的相关系数（r2）均大于0.990;猪肉、猪肝、猪肾、鱼、对虾和蟹中MQCA的检出限依次为0.90、1.51、0.94、1.04、1.62和1.80μg/kg,定量限依次为3.00、5.02、3.13、3.46、5.40、6.00μg/kg。从3～100μg/kg的添加浓度的检测结果可以看出,MQCA的平均回收率均在73.6%与89.0%之间,日内相对标准偏差（RSD,n=5）在15%以下,日间RSD（n=3）为20%以下。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合兽药残留分析技术的要求,适用于动物组织中MQCA残留的定量分析和确证检测。固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定地表水中9种微囊藻毒素
摘要：建立了固相萃取-超高效液相色谱-电喷雾串联三重四极杆质谱（SPE-UPLC-ESI-MS/MS）联用技术分析水中9种微囊藻毒素的方法。样品经SPE提取和净化后,以Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱为分离柱,以含0.1%甲酸乙腈和含0.1%甲酸水作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源电离、正离子多反应监测模式质谱进行定性和定量分析。9种微囊藻毒素在0.1～50μg/L或0.5～100μg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数为0.999 0～0.999 8,方法的检出限（以3倍信噪比计）为0.1～0.5 ng/L;高、中、低3个添加水平的回收率为75.8%～109%,相对标准偏差为0.49%～10.0%。结果表明,该方法灵敏、准确,检测范围广,分析速度快。应用该方法检测了杭州市两处水库水样中的微囊藻毒素,分别检出了3种和8种微囊藻毒素。分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺
摘要：以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。考察了甲醇、乙腈、丙酮和氯仿-甲醇与三乙胺构成致孔剂合成的聚合物性能及其形貌特征。通过正交试验优化的聚合反应配方为：1.0 mmol莱克多巴胺,4.0 mmol丙烯酰胺,20.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯,6.0 mL乙腈-三乙胺（30∶1,v/v）,50.0 mg偶氮二异丁腈。建立的基于分子印迹固相萃取-高效液相色谱测定饲料试样中莱克多巴胺的方法,在0.50～100 mg/L质量浓度范围内有良好的线性关系（r=0.999 4）;饲料试样中 1.0、10及100 mg/kg 3个添加水平的莱克多巴胺平均回收率大于80%;批内、批间测定的相对标准偏差小于10%;检出限（信噪比为3）达到0.1 mg/kg。该方法灵敏、可靠,用于饲料等复杂基质中莱克多巴胺检测的效果优于相关标准分析方法。高效液相色谱法同时测定生物质乳酸发酵液中有机酸及糖类化合物
摘要：建立了高效液相色谱（HPLC）同时测定生物质乳酸发酵液中有机酸及糖类的分析方法。使用Bio-RadAminex HPX-87H色谱柱,以5 mmol/L的H2SO4为流动相,在柱温55℃,流速0.6 mL/min条件下,采用示差折光检测器进行检测。结果表明,该方法可在17 min内实现发酵液中各种有机酸和糖类化合物等的完全分离与定量,6种有机酸和3种糖类化合物在0.15～5.19 g/L范围内的线性关系良好,回归方程的线性相关系数在0.999 8以上。将该法用于米根霉发酵液的检测,两个水平的加标回收率为96.91%～103.11%,相对标准偏差（n=6）为0.81%～4.61%。该法适用于微生物发酵液中多种有机酸和糖类的快速、高效分离和定量测定。中国化学会第十一届全国分析化学年会（第一轮通知）
摘要：中国化学会决定于2012年10月26-29日在美丽的海滨城市—青岛召开“第十一届全国分析化学年会”，并委托青岛科技大学负责筹办。会议将就我国自上届学术会议以来分析化学学科的新成就、新进展及我国分析化学学科的发展进行学术交流和研讨，会议将组织分析化学前沿的专题报告、分组报告和讨论，并邀请部分国外学者和海外华裔学者与会。热忱欢迎大家踊跃投稿和参加会议。现将有关事项通知如下：烯唑醇免疫亲和色谱柱的制备及其在样品前处理中的应用
摘要：将四甲氧基硅烷（TMOS）水解后与烯唑醇抗体聚合,采用溶胶-凝胶法合成了烯唑醇免疫亲和色谱（IAC）柱固定相,并用其制备了对烯唑醇具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC柱条件进行了优化,选择超纯水作为吸附与平衡介质,30%～50%（体积分数）甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明：在优化条件下,IAC柱对烯唑醇的动态柱容量达125.4μg/g。在河水样品和水果样品中添加烯唑醇,经IAC柱净化富集,洗脱液采用高效液相色谱检测,河水中烯唑醇的平均回收率为90.36%～100.14%,相对标准偏差（RSD）为2.03%～6.08%;水果中烯唑醇的平均回收率为85.55%～94.02%,RSD为3.38%～6.78%。本研究为烯唑醇在河水、水果等样品中的残留分析提供了一种新的高效前处理手段。高效液相色谱法同时测定稻田中苄嘧磺隆和苯噻酰草胺残留
摘要：建立了同时测定稻田（稻田土壤、水和植株）中苄嘧磺隆和苯噻酰草胺残留量的高效液相色谱（HPLC）分析方法。稻田水样品用二氯甲烷直接萃取;稻田土壤样品用碱性乙腈-二氯甲烷（1∶1,v/v）混合液直接提取;水稻植株样品用碱性二氯甲烷提取后,二氯甲烷提取液经弗罗里硅土柱净化。上述样品溶液采用C18不锈钢色谱柱（150mm×4.6 mm,5μm）分离,流动相为水-甲醇（30∶70,v/v）,流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,紫外检测波长为238 nm,外标法定量。苄嘧磺隆和苯噻酰草胺在0.05～5.00 mg/L范围内的线性关系均很好（r〉0.999 9）。在稻田水、土壤和水稻植株中添加3个水平（0.05,0.10,1.00 mg/kg）的苄嘧磺隆和苯噻酰草胺,两者的回收率均在85.39%～113.33%之间,相对标准偏差为0.91%～10.24%。这表明该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留测定的技术要求。固相萃取-离子色谱法测定地下水中痕量的高氯酸根离子
摘要：建立了测定地下水中痕量高氯酸根（C10 4-）的固相萃取-离子色谱（SPE-IC）分析方法。0.7 L水样经预处理降低主要干扰离子Cl-、CO23-和SO24-的干扰后,使用Cleanert PWAX弱阴离子交换固相萃取小柱对地下水中痕量（μg/L级）的C10 4-进行富集,用6 mL 1%NaOH溶液洗脱,富集液经0.45μm水膜过滤后,用IonPac AS20阴离子分离柱、50μL进样环、40 mmol/L KOH溶液淋洗、抑制电导检测分离分析。结果表明,地下水样品中C10 4-的方法检出限和测定下限分别为0.15μg/L和0.60μg/L,进样质量浓度在1～15μg/L范围内有很好的线性关系,线性相关系数为0.999 2,回收率为99.7%～100.5%;该方法经济有效,可用于地下水中痕量C10 4-的检测。利用该方法测定了哈尔滨周边部分地区地下水中C10 4-浓度,检测结果与离子色谱-质谱联用法的检测结果的相对误差为1.85%～9.24%。离子交换色谱法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白
摘要：建立了高效、经济、大规模获得鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）的生产方法。在对传统的水稀释法改良的基础上,结合聚乙二醇沉淀与离子交换色谱进行IgY的分离纯化。结果显示,用8倍无菌水稀释蛋黄液,用0.1 mol/L HCl调节pH为5.2,在4℃下静置8 h,于5 000×g力离心可得上清粗IgY液,经测定回收率可达93.47%。然后用6%聚乙二醇沉淀后经DEAE-Toyopearl 650 M离子交换纯化,最佳的纯化条件：0.05 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS,pH 7）平衡上样,0.075 mol/L PBS（pH 7）洗脱。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析结果显示所得的IgY的纯度为95.02%,活性保持率高达73.77%。本研究弥补了传统分离方法不能同时达到高纯度和高回收率的缺点,且可用于大规模生产。重组蛋白A亲和填料的制备及其性能评价
摘要：为了获得一种优良的抗体纯化介质,制备了重组金黄色葡萄球菌蛋白A（rProtein A）亲和填料,并考察了所制备的亲和填料的纯化性能。利用自行构建的rProtein A工程菌,经诱导表达、纯化获得rProtein A纯品,将其偶联到经环氧氯丙烷活化的Sepharose 4 Fast Flow凝胶上,得到rProtein A亲和填料,并使用兔抗尿酸氧化酶抗体对该填料的性能进行验证。结果显示,在自制的rProtein A亲和填料上rProtein A浓度为1.5×10-4 mol/L。采用Scatchard模型分析,得到其解离常数和最大表观吸附量分别为2.28×10-7 mol/L和20.697 g/L,说明制得的rProtein A亲和填料对抗体有很好的结合能力。将该填料于0.1 mol/L NaOH溶液中浸泡1 h,其色谱性能未见变化。将该填料用于纯化兔抗体,湿胶结合抗体量可达19 mg/mL;一步柱色谱即可得到电泳纯度的抗体样品,回收率高于96%。本研究为rProtein A亲和填料的国产化奠定了基础。
