人神经生长因子重组慢病毒载体构建及检测
摘要：目的：构建含神经生长因子（NGF）基因的重组慢病毒载体，并在293T细胞中验证NGF是否可以过表达。方法：将NGF基因克隆至慢病毒穿梭质粒Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP，然后利用酶切鉴定、PCR鉴定及测序验证后，同两个辅助质粒共转染到293T细胞中，构建重组慢病毒载体。重组慢病毒感染293T细胞，通过荧光检测慢病毒的转染效果，用Western Blot检测NGF基因的表达。结果：酶切鉴定、PCR扩增鉴定和对重组慢病毒进行测序，提示重组慢病毒构建正确。荧光显微镜观察重组慢病毒感染的293T细胞，可见强荧光。Western Blot结果提示目的基因可正常表达。RT-PCR测得病毒滴度达到可利用标准。结论：人NGF重组慢病毒载体构建成功。本刊对来稿中统计学处理的有关要求
摘要：1．统计研究设计：应交代统计研究设计的名称和主要做法。如调查设计（分为前瞻性、顾性或横断面调查研究）；实验设计（应交代具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等）；临床试验设计（应交代属于第几期临床试验，采用了何种盲法措施等）。线粒体分裂蛋白抑制剂对β淀粉样蛋白诱导小胶质细胞凋亡的作用及机制
摘要：目的：研究线粒体分裂蛋白抑制剂对茁淀粉样蛋白（A茁）诱导小胶质细胞凋亡的作用及其机制。方法：随机将BV-2小胶质细胞分为con组、A茁组、mdi组和A茁＋mdi组，con组不做特殊处理，mdi组培养基中加入10滋mol/L mdivi-1，A茁组培养基中加入20滋mol/L A茁，A茁＋mdi组培养基分别加入2、5、10、20滋mol/L mdivi-1和20滋mol/L A茁。采用MTT法检测细胞存活率，TUNEL染色检测细胞凋亡，Western blot法检测Drp1、CytC和Caspase-3蛋白水平变化，RT-PCR法检测CA11b mRNA表达变化。结果：与con组相比，A茁组的细胞存活率明显下降，凋亡显著增加，CA11b mRNA上升，线粒体Drp1、细胞浆CytC和激活的 Cas-pase-3增加，差异有统计学意义（＜0.05）；与A茁组相比，A茁＋mdi组的细胞存活率明显上升，凋亡显著减少，CA11b mRNA下降，线粒体Drp1、细胞浆CytC和激活的Caspase-3减少，差异有统计学意义（＜0.05）。结论：线粒体分裂蛋白抑制剂对A茁诱导小胶质细胞凋亡有保护作用，其机制可能为抑制线粒体/CytC/Caspase-3凋亡途径。MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障通透性的影响
摘要：目的：观察P2Y1受体抑制剂MRS2179对大鼠缺血性脑卒中后MMP-9表达及血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法：45只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、MRS2179组各15只。假手术组及模型组经侧脑室注射5滋L人工脑脊液（aCSF），MRS2179组侧脑室注射5滋L MRS2179（2 nmol）。制备大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，假手术组不予缺血。缺血再灌注24 h后，应用干湿重法检测脑组织含水量；伊文思蓝染料（EB）溢出量定量检测BBB通透性改变；Western blot法检测MMP-9蛋白表达。结果：模型组、假手术组、MRS2179组的脑含水量分别为（81.72±0.23）%、（77.65±0.27）%、（79.92±0.24）%（n=6），模型组高于假手术组（P〈0.01）；MRS2179组较模型组有所下降（P〈0.01），但仍高于假手术组（P〈0.01）。模型组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为（1737.60±67.46）ng/g，显著高于假手术组（324.18±63.35）ng/g（P〈0.01）；MRS2179组梗死侧脑组织血管外EB溢出量为（1165.15±93.26）ng/g，较模型组明显下降（P〈0.01）（n=6）。假手术组、模型组、MRS2179再灌注24 h梗死边缘区脑组织中相对MMP-9蛋白含量分别为（0.52±0.05）、（1.69±0.08）、（0.99±0.10）（n=3），模型组与假手术组相比明显升高（P〈0.01），MRS2179组与模型组比较显著下降（P〈0.01）。结论：P2Y1R抑制剂MRS2179可能通过降低MMP-9表达，降低BBB通透性，减轻缺血性脑卒中后脑水肿程度。慢性低灌注大鼠基质金属蛋白酶和淀粉样物质的表达
摘要：目的：研究慢性低灌注后基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9和淀粉样物质A茁40表达的变化。方法：Wistar大鼠48只随机分为假手术组和缺血组各24只，缺血组大鼠结扎双侧颈总动脉，假手术组不造成缺血。免疫组化染色观察MMP-2、MMP-9和A茁40表达的变化。结果：缺血组大鼠低灌注后7 d，免疫组化染色显示MMP-2和A茁40在皮质的静脉内皮上有阳性表达；低灌注后14 d，MMP-2和A茁40在较小动脉内皮上阳性表达；低灌注后30 d在相对较大的动脉内皮上阳性表达；MMP-9在血管内皮未见表达。结论：慢性低灌注后A茁40在血管内皮沉积，MMP-2表达增加。外源性神经生长因子治疗大鼠脑出血的疗效分析
摘要：目的：观察外源性神经生长因子（NGF）治疗大鼠脑出血的疗效。方法：48只SD大鼠随机分成NGF组24只、脑出血组12只和假手术组12只。Ⅶ型胶原酶尾状核注射制备大鼠脑出血模型；NGF组给予NGF血肿内注射，脑出血组注射等量生理盐水，假手术组只进针。分别于术后1、3及7d对3组大鼠进行神经功能评分，免疫组化法检测血肿灶周Nestin及血管内皮生长因子（VEGF）的阳性细胞数。结果：造模后7 d， NGF组神经功能缺损评分降低，低于NGF组1 d及3 d时的评分（P＜0.05），且低于脑出血组7 d时的评分（P〈0.05）。各时间点NGF组Nestin及VEGF阳性细胞数均显著高于假手术组（P＜0.01），高于脑出血组（P＜0.05）；NGF组7 d时Nestin及VEGF阳性细胞数高于同组1 d及3 d时（P＜0.05）。结论：外源性NGF有助于促进脑出血大鼠的神经功能恢复，其机制可能与激活脑出血大鼠的内源性神经干细胞及促进脑组织分泌VEGF有关。普罗布考对动脉粥样硬化兔主动脉白三烯C4的影响
摘要：目的：观察普罗布考对高同型半胱氨酸（Hcy）血症诱导动脉粥样硬化（AS）兔主动脉白三烯C4（LTC4）的影响。方法：将24只雄性新西兰大耳白兔随机分成3组各8只：对照组给予基础饲料喂养；模型组和普罗布考组在基础饲料中加入1%的蛋氨酸；普罗布考组从第12周起用普罗布考（1 g/d）灌胃；饮食量200 g/d，均喂养20周。第20周末用RT-PCR检测动脉血管中白三烯C4合成酶（LTC4S）的mRNA表达，用ELISA检测动脉血管中LTC4的含量。结果：模型组腹主动脉LTC4S的mRNA表达及LTC4的含量较对照组增高（P〈0.05），普罗布考组腹主动脉LTC4S的mRNA表达水平及LTC4含量低于模型组（P〈0.05）。结论：普罗布考能抑制主动脉LTC4S的mRNA表达，降低主动脉LTC4的含量，该作用可能为其抗AS的机制之一。高压氧对外伤性癫痫动物模型的治疗作用
摘要：目的：研究高压氧治疗（HBOT）对外伤性癫痫（PTE）动物模型的治疗作用。方法：42只成年SD大鼠随机分为正常组（12只）、模型组（12只）及HBOT组（18只），通过注射氯化亚铁制作PTE模型，HBOT组予HBOT 3个疗程，观察各组癫痫发作的行为及脑电图表现，RT-PCR检测c-myc mRNA的表达。结果：HBOT组的癫痫发作较模型组明显减少，脑电图上痫样放电潜伏期延长，频率减慢和波幅降低；模型组中c-myc表达较正常组显著升高（P〈0.01）。与模型组比较，HBOT组中c-myc表达显著减少（P〈0.01）。结论：HBOT对PTE具有积极治疗作用，其机制可能与ARF-MDM2-p53通路及Bcl-2的表达有关。双黄通腑颗粒对大鼠脑出血水肿的治疗作用
摘要：目的：研究双黄通腑颗粒对脑出血大鼠脑水肿区脑含水量的变化以及对基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、水通道蛋白4（AQP4）表达的影响。方法：SD大鼠60只随机分为药物灌胃组和盐水对照组各30只，用自体血注入法制作脑出血模型，术后第2天药物灌胃组开始灌入双黄通腑颗粒药液，对照组灌入等量生理盐水。2组各分3、5、8 d三个时间点处死10只大鼠，测各组脑含水量，制作石蜡切片，用免疫组化方法观察血肿周围水肿区脑组织MMP9、AQP4的表达。结果：药物灌胃组与盐水对照组相比，脑含水量降低，脑组织血肿周围水肿MMP9、AQP4表达降低（P〈0.05）。结论：双黄通腑颗粒对大鼠脑出血后脑水肿具有治疗作用。三七总皂苷对急性脑梗死患者血清VEGF和VEGFR含量的影响
摘要：目的：研究三七总皂苷（PNS）对急性脑梗死（ACI）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和VEGF受体（VEGFR）的含量影响。方法：选择60例脑梗死患者分为治疗组和对照组各30例，并设立健康组60例，治疗组和对照组均给予脑梗死治疗，治疗组还给予PNS。采用ELISA法测定VEGF和VEGFR于入院时和治疗第14天血清含量的变化，治疗前及治疗后14 d进行神经功能评分。结果：治疗后14 d，治疗组的VEGF、VEGFR水平高于对照组（P〈0.05）；治疗组的神经功能评分与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：PNS能提高ACI患者的VEGF和VEGFR表达水平，且能改善神经功能缺损。第14届东方脑血管病介入治疗大会通知
摘要：由第二军医大学长海医院举办的第14届东方脑血管病介入治疗大会（OrientalConferenceofInterventionalNeuroradiology，OCIN）将于2014年10月30日-11月2日在上海举行。会议秉承“沟通、合作、规范、创新”的大会宗旨，以“促进学术交流、加强学科合作”为目标，致力于创建国际化学术交流、高端科研展示、多学科高峰对话、实战型技术演示、个性化临床讨论、全方位培训等为一体的神经介入领域精品学术交流平台。丁基苯酞对脑梗死灶远隔部位继发性损害的影响
摘要：目的：采用磁共振弥散张量成像（DTI）探讨丁基苯酞治疗对脑梗死患者梗死灶远隔部位继发性损害的影响。方法：60例急性脑梗死患者随机分为丁基苯酞组和对照组各30例。2组均给予抗血小板及基础治疗，丁基苯酞组加用丁基苯酞，于治疗前及治疗4周后行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、改良Rankin评分（mRS）及DTI扫描，分别测量梗死灶、梗死同侧大脑脚及对侧相应区域的部分各向异性（FA）值。结果：治疗4周后，2组患者NIHSS和mRS评分均较治疗前降低（P＜0.01），丁基苯酞组低于对照组（P＜0.05）；2组患者梗死灶及同侧大脑脚水平锥体束的FA值均较治疗前下降（P＜0.01），丁基苯酞组的梗死灶、同侧大脑脚FA值均大于对照组（P＜0.01）。结论：丁基苯酞可能通过减轻梗死后远隔损害而改善脑梗死患者的神经功能损害。活检骨骼肌对肌糖原累积病的诊断价值
摘要：目的：总结肌糖原累积病（MGSD）临床与活检骨骼肌的病理特点。方法：回顾性分析16例MGSD患者的临床和骨骼肌病理资料。结果：临床表现包括肌力下降、运动不耐受、肌痛、肌张力减低等，可合并多系统受累；血肌酸激酶不同程度升高；肌电图正常或呈肌源性/神经源性损害。活检骨骼肌病理分析：典型病理表现为细胞浆内散在不定形空泡和/或PAS染色空泡内糖原流失或蓄积；2例酸性磷酸酶活性增加；1例磷酸化酶活性缺失；电镜下可见大量糖原颗粒聚集，MGSDⅡA病患者可见双膜自噬泡、髓样小体、溶酶体聚集和糖原颗粒蓄积。结论：骨骼肌活检对MGSD诊断与鉴别诊断具有重要价值；细胞浆内糖原空泡、糖原蓄积是重要病理诊断依据，酸性磷酸酶、磷酸化酶特殊染色有助于分型诊断，指导致病基因测序；电镜下溶酶体髓磷脂样改变支持MGSDⅡA型诊断。枕神经电刺激联合针灸治疗头痛的疗效研究
摘要：目的：探讨枕神经电刺激联合针灸治疗头痛的临床疗效。方法：头痛患者76例随机平分为电刺激组和联合治疗组各38例，2组均采用枕神经电刺激治疗，联合治疗组还给予针灸治疗，评估总体疗效及头痛症状评分。结果：联合治疗组的总体疗效及头痛症状评分均优于电刺激组（P＜0.05或0.01）。结论：采用枕神经电刺激联合针灸治疗头痛具有显著的临床疗效。跨窦急性硬膜外血肿并骨折并发脑静脉窦回流障碍的分析
摘要：目的：探讨脑外伤后跨窦急性硬膜外血肿并骨折发生脑静脉窦回流障碍（CVFO）的早期诊断和治疗方法。方法：回顾性分析跨窦硬膜外血肿和/或骨折患者403例，所有患者均早期行MRV检查，部分行CTV检查。对CVFO患者给予早期静脉应用小剂量尿激酶治疗，对损伤占位效应明显且早期出现脑疝的患者，积极手术解除机械压迫。结果：跨窦硬膜外血肿并骨折131例，CVFO 107例（81.7%）；单纯跨窦线形骨折242例，CVFO 100例（41.3%）；跨窦凹陷骨折30例，CVFO 24例（80.0%）。跨窦硬膜外血肿并骨折与跨窦凹陷骨折患者的CVFO发生率均显著高于单纯跨窦线形骨折患者（P〈0.001）。231例CVFO患者中有88例影像学随访3月，再通良好53例，好转18例，无明显改变16例，变差1例。结论：跨窦硬膜外血肿并骨折后并发CVFO的机率较高，且其风险随损伤程度而增大。早期诊断和尿激酶干预是静脉窦回流恢复通畅的关键。持续硬膜外镇痛用于防治硬膜穿破后头痛的疗效观察
摘要：目的：观察持续硬膜外镇痛（CEA）用于防治硬膜穿破后头痛（PDPH）的疗效。方法：30例意外出现硬膜穿破者随机分为观察组和对照组各15例。观察组采取CEA等方法，对照组则采取硬膜外腔单次注入生理盐水等方法，对2组患者头痛、头晕恶心、呕吐发生情况及不同时间段的相关评分和安全性进行观察。结果：观察组头痛发生率为13.33％、头晕恶心发生率6.67%，呕吐0例，均低于对照组，头痛持续时间较对照组明显缩短（P〈0.05）；且术后第2、3、4、5天观察组的头痛评分、头晕恶心评分和呕吐评分均低于对照组（P〈0.05），2组安全性相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：CEA用于防治PDPH疗效确切。改良颞肌筋膜瓣转移术治疗晚期面瘫
摘要：目的：探讨改良颞肌筋膜瓣转移术治疗晚期面瘫的疗效。方法：采用颞肌联合颞肌筋膜瓣，动态恢复患侧面部表情肌功能，对19例晚期面瘫患者（手术组）进行手术治疗。同时选取内科非手术治疗面瘫患者22例为对照组。随访6～18月。结果：对照组和手术组治疗后的改良Portmann量表评分分别为（11.2±4.1）分、（15.1±3.3）分，治疗总有效率分别为62.23%、84.17%，手术组疗效优于对照组（P〈0.05）。结论：改良颞肌筋膜瓣转移术是一种治疗面瘫的良好手术方式，尤其对于内科治疗无效的晚期面瘫患者具有显著疗效。早期综合康复治疗对急性脑卒中患者功能重建的影响
摘要：目的：探讨早期综合康复治疗对急性脑卒中患者功能重建的影响。方法：急性脑卒中患者128例，随机分为康复组和对照组各64例，2组均给予神经内科常规及对症支持治疗，康复组同期应用Brunnstrom、Bobath疗法、本体感觉神经肌肉促通法（PNF）等治疗技术进行康复训练1个月。2组治疗前后均采用临床神经功能缺损程度（CNDS）、Brunnstrom分级、改良Barthel指数（MBI）及简式Fugl-Meyer运动功能评测法（FMA）等进行疗效评定。结果：治疗后，2组患者CNS评分均较治疗前明显下降（P＜0.01或0.05），康复组低于对照组（P＜0.05）；2组患者MBI评分、FMA上下肢评分及Brunnstrom分级均较治疗前明显提高（P＜0.01或0.05），康复组高于对照组（P＜0.05）。结论：急性脑卒中患者早期进行综合康复治疗能减少神经功能损害，提高肢体运动功能，改善日常生活活动能力。
