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摘要:目的为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5’UTR、pGL3-3’UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5’UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5’UTR和3’UTR序列的重组质粒,为研究Tudor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。
摘要:目的观察肺腺癌细胞H2228克唑替尼耐药前后对化疗药物紫杉醇和顺铂敏感性变化,并探讨其可能机制。方法采用克唑替尼体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法处理H2228细胞,培养克唑替尼耐药细胞株H2228/CR。MTT法检测克唑替尼、紫杉醇及顺铂对H2228及H2228/CR细胞的增殖抑制率;实时荧光定量PCR法和Western blotting法分别检测H2228及H2228/CR细胞波形蛋白、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白的mRNA和蛋白表达。结果经过6个月的培养,H2228/CR对克唑替尼明显耐药,且对紫杉醇及顺铂的敏感性降低。H2228/CR细胞E-钙黏蛋白mRNA及蛋白表达水平较亲代H2228细胞明显降低,而N-钙黏蛋白、波形蛋白的mRNA及蛋白表达水平较H2228细胞明显增高。结论克唑替尼耐药细胞H2228/CR对常规化疗药物紫杉醇、顺铂敏感性降低,其耐药机制可能与H2228/CR细胞发生上皮间质转化有关。
摘要:目的探讨肺部超声检查联合血浆降钙素原(PCT)、CRP检测对社区获得性肺炎(CAP)的诊断价值。方法对临床疑诊CAP患者240例同时进行肺部超声和胸部CT检查,并检测血清PCT、CRP及计数WBC。以胸部CT结果作为诊断CAP'金标准',分析肺部超声及血浆PCT、CRP对CAP的诊断价值。结果肺部超声诊断CAP的特异性为72.73%、敏感性为95.65%。CRP升高诊断CAP的敏感性为97.66%,特异性为30.77%;PCT升高诊断CAP的特异性为96.15%,敏感性为42.52%;WBC数量增加诊断CAP的特异性、敏感性分别为88.46%、84.58%。肺部超声检查联合血浆PCT、CRP检测诊断CAP的,特异性为92.59%,敏感性为99.06%。结论肺部超声检查联合血浆PCT、CRP检测对CAP的诊断敏感性及特异性均优于单项检测。
摘要:目的探讨合并Bartter综合征的小儿囊性纤维化的临床表现、诊断和基因型特点。方法回顾性分析华人中首例合并假性Bartter综合征的囊性纤维化患儿的临床表现、基因型特点等,并复习相关文献。结果患儿女,16个月,临床表现为反复呼吸道感染伴发作性低钾低钠低氯性碱中毒。汗液氯离子(Cl-)左下肢为108.4mmol/L,右下肢为120.4 mmol/L。囊性纤维化穿膜传导调节因子(CFTR)基因突变分析,发现2个已知基因突变,即R709X(母源)、G970D(父源)。结论合并假性Bartter综合征的囊性纤维化患儿主要表现为反复肺部感染、汗液Cl->60 mmol/L;突变基因为R709X和G970D。