人肝癌相关抗原Cdc25C特异性多肽抗体的制备及其应用
摘要：目的制备抗人肝癌相关抗原Cdc25C特异性多肽抗体,为进一步研究Cdc25C的功能奠定基础。方法通过生物信息学软件对人Cdc25C蛋白的抗原属性进行分析,综合考虑多肽的纯度、氨基酸组成、长度、亲水性和二级结构等,得到若干个同源性低、抗原性较高的候选多肽。多肽合成后与KLH佐剂偶联,免疫新西兰大白兔,制备相应的多克隆抗体。经ELISA和Western blotting方法鉴定其活性,并以免疫组化法检测多肽抗体的效果。结果多肽抗体的效价较高,特异性强。以多肽抗体对重组表达的Cdc25C融合蛋白进行Western blotting鉴定,于73k D附近有明显反应条带。以全蛋白的单克隆抗体和多肽抗体检测同一肝细胞癌癌旁组织,购买的Cdc25C单克隆抗体与制备的Cdc25C多肽多克隆抗体平均光密度分别为0.538±0.192、0.410±0.122,两者比较差异无统计学意义（t=0.109,P〉0.05）。结论成功制备抗人肝癌相关抗原Cdc25C特异性多肽抗体;筛选获得的候选多肽具有Cdc25C全蛋白一样的抗原性,制备的多肽抗体具有和针对Cdc25C全蛋白抗体一样的效果。ICGR15联合三维评估系统在精准肝切除中的应用
摘要：目的探讨吲哚氰绿15 min滞留率（ICGR15）联合三维评估系统在精准肝切除中的应用价值。方法选取43例肝癌合并肝硬化行手术治疗的患者,将术前强化CT结果导入三维评估系统,联合患者术前ICGR15及常规检查情况,制定并评估手术方案,根据患者肝切除术后肝功能代偿情况分为肝功能恢复组及肝功能不全组,对两组患者相应指标进行比较分析。结果两组年龄、手术时间、术前转氨酶、术前胆红素、肝切除率差异无统计学意义（P〉0.05）,而术前乙酰胆碱酯酶、术前ICGR15、术中ICGR15、术中ICGR15/术前ICGR15（R）、残肝体积占标准化全肝体积的比例差异有统计学意义（P〈0.05）。R预测术后肝功能不全的截断值为1.781,敏感度为85.7%,特异度为86.2%;三维评估系统预测肝切除体积与实际肝切除体积比较差异无统计学意义（t=0.918,P=0.362）,两者有较好的相关性（r=0.989,P〈0.05）。结论 ICGR15联合三维评估系统可较好地预测肝切除术后肝功能恢复情况,R大于1.781患者术后出现肝功能不全的可能性较大;三维评估系统可良好协助测量肝脏体积,有助于术前手术方案的制定。结直肠癌围手术期患者外周血T淋巴细胞CD69、HLA-DR表达变化及意义
摘要：目的观察结直肠癌患者围手术期外周血T淋巴细胞CD69、HLA-DR的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测40例结直肠癌患者（观察组）术前、术后第5、10天外周血T淋巴细胞CD69、HLA-DR的表达,并与同期检测15例健康体检者（对照组）进行比较,分析CD69、HLA-DR表达与临床病理参数的关系。结果观察组术前CD69、HLA-DR表达明显低于对照组（P〈0.05）,术后CD69、HLA-DR表达水平均较术前明显提高（P〈0.05）。HLA-DR表达与淋巴结转移、远处转移、TNM分期有关（P〈0.05）,与其余临床病理参数无关（P均﹥0.05）。结论结直肠癌患者术前外周血T淋巴细胞CD69、HLA-DR表达明显降低,术后逐渐升高;检测二者表达有助于病情判断,进一步指导结直肠癌免疫治疗。黄芩素对人结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及机制
摘要：目的探讨黄芩素对人结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其作用机制。方法取处于对数生长期的人结肠癌SW480细胞,随机分为对照组,25、50、100μmol/L黄芩素处理组,分别加入生理盐水,25、50、100μmol/L黄芩素处理,采用Ed U、MTT、流式细胞术及Transwell小室实验观察黄芩素对结肠癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并通过Western blotting法检测黄芩素干预后结肠癌细胞Bcl-2、Bax及VEGF蛋白表达。结果 25、50、100μmol/L黄芩素处理组SW480细胞增殖受到抑制,呈剂量、时间依赖性;25、50、100μmol/L黄芩素处理组SW480细胞凋亡率依次升高;25、50、100μmol/L黄芩素处理组SW480细胞的侵袭迁移能力降低;黄芩素干预后SW480细胞中Bcl-2、VEGF蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调（P〈0.05）。结论黄芩素抑制人结肠癌细胞的增殖及侵袭,并促进其凋亡,机制可能与下调Bcl-2、VEGF蛋白表达并上调Bax蛋白表达有关。四种重楼皂苷对结肠癌细胞的体外毒性作用比较
摘要：目的探讨重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、H对结肠癌细胞的体外毒性,为寻求有效的结肠癌化疗药物提供依据。方法选取复苏结肠癌细胞系SW620、SW480、Colo320、Lovo,将其与重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、H、奥沙利铂等药物共培养48 h,加CCK-8孵育2 h,酶标仪检测450 nm处吸光度值。采用SPSS23.0统计软件分析重楼皂苷对结肠癌细胞的毒性。Annexin V/PI染色,流式细胞仪检测凋亡细胞。Western blotting法检测Bax、Caspase-3蛋白表达。结果重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、H对结肠癌细胞系SW620、SW480、Colo320、Lovo抗肿瘤活性均良好。四种重楼皂苷单体对结肠癌细胞IC50值波动于0.4～8 mg/L。重楼皂苷I和重楼皂苷V对结肠癌细胞的毒性强于另外两种重楼皂苷单体（P〈0.05）。重楼皂苷I（IC50值波动在0.4～0.6 mg/L）与奥沙利铂（IC50值0.1～2.1 mg/L）体外抗肿瘤作用相当。流式细胞仪显示重楼皂苷I处理的细胞Annexin V/PI阳性细胞比例升高52.3%,Western blotting结果显示重楼皂苷I处理的细胞Bax和Caspase-3蛋白表达分别是对照组的3倍和1.13倍。结论重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、H对结肠癌细胞均有良好的抗肿瘤活性,其中以重楼皂苷I作用最强,其能介导结肠癌细胞凋亡。三七总皂苷对重症急性胰腺炎大鼠的治疗作用及机制
摘要：目的观察三七总皂苷对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠的治疗作用,并探讨其机制。方法选取SD大鼠30只,随机分为假手术组（SO组）、重症胰腺炎组（SAP组）、三七总皂苷干预组（PNS组）,每组各10只,经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备大鼠SAP模型。SO组进腹后仅翻动胰腺和十二指肠后关腹,不注入5%牛磺胆酸钠,其中PNS组模型建立后立即予腹腔注射三七总皂苷50 mg/m L,SO组、SAP组建模后注射生理盐水0.1 m L/100g。各组大鼠分别于建模后4 h检测血清淀粉酶（AMS）,光镜下观察胰腺组织病理学改变,免疫组化SP法检测胰腺组织中NF-κB及炎症因子TNF-α表达。结果与SO组相比,PNS组和SAP组大鼠血清AMS水平、胰腺组织病理学评分、NF-κB和TNF-α表达量显著升高（P均〈0.05）;与SAP组相比,PNS组大鼠血清AMS水平、胰腺组织病理学评分、NF-κB和TNF-α表达量显著降低（P均〈0.05）;相关性分析结果显示,胰腺组织腺泡细胞内NF-κB与TNF-α因子表达呈正相关（r分别为0.958、0.992、0.989,P均〈0.05）。结论三七总皂苷能减轻SAP的胰腺损伤,其机制可能为抑制胰腺组织NF-κB因子激活,减少炎性细胞因子过度释放。miR-7对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的逆转作用及机制
摘要：目的探讨microR（miR）-7对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的逆转作用及可能的下游分子机制。方法采用ADR诱导体外人乳腺癌MCF-7细胞,建立阿霉素耐药性MCF-7/ADR细胞株;MCF-7或MCF-7/ADR乳腺癌细胞转染miR-7过表达载体（miR-7 mimic）或干扰miR-7载体（miR-7 inhibitor）48 h后,阿霉素（100 ng/m L）处理24h,MTT法测算细胞存活率;荧光定量PCR法测定miR-7和ABCC10 mRNA表达;蛋白免疫印迹法检测ABCC10蛋白表达。结果 MCF-7/ADR细胞表达低水平的miR-7和高水平的ABCC10。MCF-7/ADR过表达miR-7,ABCC10mRNA和蛋白表达受抑制,细胞的阿霉素敏感性增加,细胞活性下降;MCF-7低表达miR-7,ABCC10 mRNA和蛋白表达增加,细胞的阿霉素敏感性降低,而细胞活性增加。结论调控miR-7表达能逆转乳腺癌细胞阿霉素耐药性,其机制可能是miR-7通过调节ABCC10表达实现。沙利度胺联合表阿霉素对小鼠H22肝癌细胞增殖、侵袭与凋亡的影响
摘要：目的探讨沙利度胺联合表阿霉素对小鼠肝癌H22细胞的增殖、侵袭与凋亡的影响。方法取处于对数生长期的小鼠H22肝癌细胞,随机分为4组,分别加入生理盐水（生理盐水组）、沙利度胺50μg/m L（沙利度胺组）、表阿霉素5μg/m L（表阿霉素组）及沙利度胺50μg/m L联合表阿霉素5μg/m L（联合组）,采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率,侵袭实验检测细胞穿透数,并采用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率。结果联合组H22细胞增殖抑制率、细胞凋亡率明显高于另外三组（P均〈0.05）,细胞穿透数显著低于另外三组（P〈0.05）。沙利度胺组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率明显低于表阿霉素组（P均〈0.05）,细胞穿透数显著高于表阿霉素组（P〈0.05）。结论沙利度胺能很好地协同表阿霉素抑制小鼠H22肝癌细胞的增殖及侵袭,并促进细胞凋亡。中度肝挫裂伤合并失血性休克兔早期凝血功能变化
摘要：目的观察中度肝挫裂伤失血性休克兔的早期凝血功能变化。方法选取新西兰兔20只,随机分为实验组和对照组各10只,实验组用开腹直接肝脏重击法并控制性颈动脉放血法建立中度肝挫裂伤失血性休克模型,对照组仅实施开腹手术。通过血栓弹力图分别检测创伤前（t0）、创伤后1 h（t1）及创伤后4 h（t2）的凝血功能变化。结果实验组反应时间（R）在t1时点相对于对照组出现延长（t=2.8,P〈0.05）,血凝块形成时间和最大振幅在各个时间点变化与对照组比较差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论中度肝挫裂伤失血性休克兔伤后1 h出现一过性凝血延迟,随后自行恢复,凝血功能变化不明显。2型糖尿病大鼠肝脏组织中Toll样受体4和NF-κB表达变化及意义
摘要：目的观察2型糖尿病大鼠肝脏组织中Toll样受体4（TLR4）和NF-κB的表达变化,并探讨其意义。方法将清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（NC组）、胰岛素抵抗组（IR组）、糖尿病4周组（DM4周组）和糖尿病8周组（DM8周组）,动物处死前股动脉取血,测定空腹胰岛素（FINS）、空腹血糖（FPG）、糖化血清蛋白（GSP）、血脂等生化指标。应用RT-PCR法检测大鼠肝脏组织中TLR4 mRNA表达,免疫组化法测定肝脏组织中NF-κB蛋白表达。结果大鼠血清ALT、AST和肝脏TLR4 mRNA及NF-κB蛋白表达于NC组、IR组、DM4周组、DM8周组依次递增,DM4周组和DM8周组的FPG、TG、TC、GSP高于NC组和IR组,与NC组比较,其他3组的FINS、LDL-C均高于NC组,而HDL-C均低于NC组,差异有统计学意义（P〈0.05）。TLR4 mRNA与NF-κB蛋白表达、ALT、AST水平均呈正相关（r分别为0.706、0.974、0.950,P均〈0.01）;NF-κB蛋白表达与ALT、AST水平呈正相关（r分别为0.657、0.646,P均〈0.01）。结论 2型糖尿病大鼠肝脏组织中TLR4 mRNA与NF-κB蛋白表达随病情的进展而逐渐增加,TLR4/NF-κB信号通路介导炎症反应在2型糖尿病发生、发展及肝脏组织的脂肪变性中可能起重要作用。急性低压缺氧大鼠脑组织中细胞红蛋白、MDA、SOD、CAT的表达变化
摘要：目的观察急性低压缺氧不同时点大鼠脑海马区细胞红蛋白（Cygb）、丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）表达的时序性变化特点。方法将100只成年雄性SD大鼠随机分为常氧对照组及低压缺氧6、12、18、24 h组,每组20只。除常氧对照组外,其他各实验组大鼠置于低压缺氧舱内建立大鼠急性低压缺氧模型。采用甲苯胺蓝染色法观察各组大鼠脑海马区形态学改变;采用分光光度法检测各组脑组织MDA、SOD、CAT活性。采用RT-PCR技术检测各组脑海马区Cygb mRNA表达。采用激光共聚焦显微镜观察各组大鼠脑海马中Cygb的荧光表达定位及时序性变化特点。结果甲苯胺蓝染色显示随低压缺氧时间的延长,各缺氧组大鼠脑海马区神经细胞中胞核由蓝色淡染变为蓝色深染,胞质中Nissl体减少,变成粉状或消失。与常氧对照组相比,各缺氧组大鼠脑组织中MDA水平上升,SOD、CAT活性均降低,P均〈0.05。免疫荧光化学染色显示各缺氧组大鼠海马区神经细胞中Cygb荧光强度随缺氧时间延长而逐渐增加。Cygb mRNA表达随缺氧时间的延长逐渐增加（P均〈0.05）,且呈时间依赖性。结论急性低压缺氧大鼠脑海马区Gygb表达、MDA水平升高,SOD、CAT活性降低,且随缺氧时间的延长而变化。XPD基因多态性与广西壮族人群肝癌家族聚集性的关系
摘要：目的研究着色性干皮病基因D（XPD基因）基因多态性与壮族人群肝癌家族聚集性的关系。方法于广西肝癌高发区选取18个肝癌高发家族成员178例（高发组）及相对应的18个无肿瘤家族成员178例（对照组）为研究对象,用流行病学问卷调查的方法收集肝癌相关因素,同时现场采集空腹外周血10 m L,用PCR-RFLP法检测XPD基因。结果高发组与对照组在性别、年龄构成、吸烟、主食玉米方面比较差异无统计学意义（P均〉0.05）。高发组HBs Ag阳性携带者74例,HBs Ag阳性率为41.6%,对照组HBs Ag阳性携带者31例,HBs Ag阳性率为17.4%,两组HBs Ag阳性携带者差异有统计学意义（χ2=3.374,P〈0.001）。高发组TG基因型的分布与对照组比较有统计学差异（P〈0.05）。高发组G等位基因的分布与对照组比较有统计学差异（P〈0.05）。结论XPD751基因多态性与壮族人群肝癌家族聚集性密切相关。自动曝光技术结合迭代重建技术降低肝脏CT辐射剂量的可行性分析
摘要：目的探讨自动曝光技术结合迭代重建技术对降低肝脏CT辐射剂量的可行性。方法选择疑诊肝肿瘤或肝肿瘤复查患者93例,随机将其分为A、B、C组各31例,三组均予64排螺旋CT扫描检查,A组电压120 k V、电流150 m As,B、C组采用自动曝光技术并迭代重建技术对数据进行重建,B组电压120 k V、电流130 m As,C组电压120 k V、电流110 m As。计算三组有效辐射剂量、主观评价图像质量（分辨率、图像失真、诊断信心度）、客观评价图像质量（CT值、噪声、SNR、CNR）。结果 A、B、C组有效辐射剂量分别为（7.64±0.67）、（4.23±0.27）、（2.41±0.38）m Sv,三组有效辐射剂量比较,P〈0.05。A、B组图像分辨率、图像失真、诊断信心评分及总分均高于C组（P均〈0.05）。B组肝CT值、SNR、CNR高于A、C组（P〈0.05）,三组噪声比较,P〉0.05。结论肝脏CT扫描时采用自动曝光技术结合迭代重建技术可有效降低辐射剂量,管电流降至130 m As时不影响图像质量。联合肝切除术治疗肝门部胆管癌疗效的Meta分析
摘要：目的系统评价联合肝切除手术治疗肝门部胆管癌（HCCA）的疗效和安全性。方法用关键词或主题词检索Pub Med、EMBASE、Cochrane Library、中国知网（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、中文科技期刊数据库（维普）、万方数字化期刊全文数据库以获得有关比较联合切肝和非切肝手术治疗HCCA的文献。中文检索词：HCCA、联合切肝、肝切除术、肝叶切除、根治手术。英文检索词：Hilar cholangiocarcinoma、Hilar bile duct carcinoma、Perihilar cholangiocarcinoma、Klatskin Tumor、Hepatectomy、Liver resection、Radical resection。检索时间从建库至2014年10月。根据纳入和排除标准由2名研究者独立进行文献质量评价。结果纳入文献11篇,共1 021例患者,其中联合切肝组663例,非切肝组358例。与非切肝组相比,术后并发症发生率、1个月内病死率的比值比（OR）分别为1.20、1.28,95%可信区间（CI）分别为0.64～2.24、0.51～3.22,两组比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）。与非切肝组相比,根治性切除率的OR为4.97,95%CI为3.45～7.18,两组比较,P〈0.01。结论联合肝切除术治疗HCCA安全有效,能明显提高肿瘤的根治性切除率,且不会引起术后并发症和病死率的增加。胃肠道间质瘤淋巴管及血管生成机制
摘要：目的探讨胃肠道间质瘤（GIST）的淋巴管及血管生成机制。方法收集70例GIST患者的肿瘤组织蜡块,并收集30例胃癌患者的肿瘤组织蜡块,通过免疫组化法观察淋巴管密度及微血管密度（MVD）,并观察淋巴生成及血管诱导相关因子血管内皮生长因子（VEGF-C）、果蝇同源异形盒蛋白1（PROX-1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、的表达。结果 GIST的淋巴管及MVD计数均显著低于胃癌组织（P〈0.05）;胃间质瘤、小肠间质瘤及胃癌组织中VEGF-C、PROX-1、HIF-1α表达差异均无统计学意义（P均〉0.05）;HIF-1α低表达组的MVD明显低于高表达组（P〈0.05）。结论间质来源GIST的淋巴管及微血管计数明显少于上皮来源的胃癌,VEGF-C、HIF-1α表达可能与GIST微血管生成相关;VEGF-C可能与GIST淋巴管生成有关。肝硬化并自发性细菌性腹膜炎患者血清和腹水中CA125、白蛋白水平变化及意义
摘要：目的观察肝硬化腹水并自发性细菌性腹膜炎（SBP）患者血清及腹水中肿瘤抗原125（CA125）、白蛋白水平变化,并探讨其意义。方法选取60例肝硬化腹水并发SBP患者为SBP组,同时选取60例肝硬化腹水无SBP患者作为非SBP组;抽取两组患者静脉血和腹水,对所采集的血清及腹水进行CA125、白蛋白测定,并计算出腹水-血清CA125梯度、血清-腹水白蛋白浓度梯度（SAAG）。结果 SBP组血清CA125、腹水CA125、腹水-血清CA125梯度显著高于非SBP组（P〈0.05）,SBP组血清白蛋白、腹水白蛋白显著低于非SBP组（P〈0.05）,SBP组SAAG比非SBP组高,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肝硬化腹水并SBP患者血清CA125、腹水CA125水平明显升高,血清白蛋白、腹水白蛋白明显降低,血清、腹水中CA125、白蛋白检测有助于SBP早期诊断。鸦胆子油联合化疗治疗结直肠癌效果的系统评价
摘要：目的系统评价鸦胆子油（BJOE）联合化疗治疗结直肠癌的疗效及安全性。方法使用计算机在EMbase、Pub Med、CNKI、万方、VIP等检索网站对鸦胆子油联合化疗治疗结直肠癌的文献进行检索,实验组接受BJOE联合化疗治疗,对照组接受单纯化疗治疗。检索时限至2015年7月全部相关文献,依照纳入和排除标准对文献进行筛选提取后应用Rev Man5.3进行Meta分析。结果本研究纳入10篇中文文献,共799例晚期结直肠癌患者。实验组生活质量评分（KPS）、客观缓解率（ORR）明显高于对照组（P〈0.01）;同时,实验组外周血白细胞降低、血红蛋白降低、血小板降低及胃肠道反应的发生率均明显低于对照组（P〈0.01）;两组腹泻、周围神经毒性的发生率比较无统计学差异（P〉0.05）。发表偏倚描绘图呈漏斗状。结论 BJOE能提高晚期结直肠癌患者的化疗疗效并减轻化疗的不良反应。2009～2014年某三甲医院肝胆外科病房感染的病原菌分布及耐药性分析
摘要：目的了解肝胆外科病房感染主要病原菌的分布及耐药性变迁,为肝胆外科医院感染合理用药及预防提供理论依据。方法对2009～2014年我院肝胆外科住院感染患者分离的病原菌及主要病原菌的耐药性进行回顾性分析。结果共分离病原菌3 141株,其中革兰阴性杆菌2 099株（66.8%）,革兰阳性球菌952株（30.3%）,真菌90株（2.9%）;革兰阴性杆菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主,分别占24.8%、14.2%、10.6%、8.8%。革兰阴性杆菌对多种抗生素有耐药性,但大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类的亚胺培南的耐药率为0,ESBLs在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中检出率分别为33.7%和21.2%。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率分别为14.1%和23.1%,对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药率最低的是头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星;革兰阳性球菌以葡萄球菌属和肠球菌属为主,对青霉素和红霉素等表现出较高的耐药性,对万古霉素仍较敏感,2013～2014年发现2株屎肠球菌对万古霉素耐药;2009～2014年MRSA检出率分别为91.5%、76.7%、74.2%、61.5%、36.4%、42.3%,呈逐年下降趋势。结论 2009～2014年某三甲医院肝胆外科病房感染的病原菌主要是革兰阴性杆菌,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;其次为革兰阳性球菌。革兰阴性杆菌对多种抗生素有耐药性,革兰阳性球菌对青霉素和红霉素等表现出较高的耐药性,对万古霉素较敏感,2009～2014年MRSA检出率呈逐年下降趋势。
