转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力观察
摘要：目的设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子1受体（IGF1R）基因的小干扰RNA（siRNA）,构建其慢病毒表达载体,观察转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力。方法根据siRNA设计原则,参照IGF1R mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染肝癌细胞株Huh7 24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF1R mRNA,筛选干扰效率最高的siRNA序列。构建该序列的慢病毒表达载体,转染293T细胞进行病毒包装。将包装好的慢病毒表达载体感染肝癌细胞株Huh7和Hep3B,筛选沉默IGF1R基因表达的稳定细胞株。将上述稳定细胞株扩大培养,观察细胞IGF1R mRNA表达变化及细胞增殖、迁移与侵袭能力变化。结果实时荧光定量PCR显示,IGF1R_002序列在100 nmol/L浓度时抑制效率最高,达78.6%。与未感染任何病毒的Huh7、Hep3B细胞,感染p LVX-shRNA2空载体的Huh7、Hep38细胞相比,感染携带IGF1R干扰序列慢病毒的Huh7、Hep3B细胞IGF1R mRNA表达水平显著下调,细胞增殖活性明显降低,细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制（P均〈0.01）。结论筛选出1对高效沉默IGF1R基因的siRNA序列,即IGF1R_002;该siRNA介导的IGF1R基因沉默可明显抑制肝癌细胞株Huh7和Hep3B增殖、迁移与侵袭。《山东医药》关于医学名词与统计学符号的应用说明
摘要：医学名词要以1989年及以后由全国自然科学名词审定委员会审定、公布,科学出版社出版的《医学名词》和相关科学的名词为准,暂未公布者仍以人民卫生出版社出版的《英汉医学词汇》为准。中文药物名称应使用1995年药典（法定药物）或卫生部药典委员会编辑的《药名词汇》（非法定药物）中的名称,英文药物名称则采用国际非专利药名,不用商品名。芒柄花黄素对人鼻咽癌细胞株HONE1凋亡的诱导作用及其机制探讨
摘要：目的观察芒柄花黄素对人鼻咽癌细胞株HONE1细胞凋亡的诱导作用,并探讨其相关机制。方法用含不同浓度（0、5、10、20、40、80、160μmol/L）芒柄花黄素的培养基分别培养人鼻咽癌细胞株HONE1 24、48、72 h,采用MTT法观察芒柄花黄素对HONE1细胞活性的影响。采用Hoechst33258荧光染色从形态学上观察芒柄花黄素处理的HONE1细胞凋亡情况。用Western blotting检测不同浓度（0、5、10、20、40μmol/L）芒柄花黄素处理的HONE1细胞的p-Akt、Akt、BAX和Bcl-2蛋白。结果 Hoechst33258荧光染色结果显示,芒柄花黄素处理较未处理的人鼻咽癌细胞株HONE1凋亡细胞数明显增加。0、5、10、20、40μmol/L芒柄花黄素处理48 h后HONE1细胞p-Akt/Akt值分别为0.311±0.035、0.169±0.029、0.116±0.038、0.143±0.012、0.082±0.015,5、10、20、40μmol/L与0μmol/L比较,P均〈0.05。0、5、10、20、40μmol/L芒柄花黄素处理48 h后HONE1细胞BAX/Bcl-2值分别为1.445±0.167、1.678±0.257、2.637±0.619、3.292±0.339、4.285±0.899,10、20、40μmol/L与0μmol/L比较,P均〈0.05。结论芒柄花黄素可诱导人鼻咽癌细胞株HONE1细胞凋亡,这可能是通过下调p-Akt/Akt、上调BAX/Bcl-2实现的。Akt抑制剂与利妥昔单抗联合应用对伯基特淋巴瘤细胞株Daudi增殖及凋亡的影响
摘要：目的探讨Akt抑制剂（AZD5363）与利妥昔单抗联合应用对伯基特淋巴瘤（BL）细胞株Daudi增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法培养人BL细胞株Daudi,将其分为对照组（只含等量溶媒）、AZD5363组（加入40μmol/L AZD5363）、利妥昔单抗组（加入50μg/m L利妥昔单抗）、联合用药组（加入40μmol/L AZD5363＋50μg/m L利妥昔单抗）,置于培养箱中培养24-72 h。分别采用CCK8法、流式细胞术测算AZD5363、利妥昔单抗及两者联合对Daudi细胞的增殖抑制和凋亡率,采用Western blotting法检测细胞磷酸化Akt（p-Akt）和总Akt（T-Akt）蛋白。结果与AZD5363组、利妥昔单抗组相比,联合用药组在24、48、72 h时Daudi细胞增殖抑制率高（P均〈0.05）。AZD5363组、利妥昔单抗组、联合用药组与对照组相比,联合用药组与AZD5363组、利妥昔单抗组相比,干预Daudi细胞48、72 h后细胞凋亡率高（P均〈0.05）。对照组、AZD5363组、利妥昔单抗组、联合用药组细胞p-Akt相对表达量分别为0.59±0.06、0.33±0.03、0.45±0.04、0.18±0.04,AZD5363组、利妥昔单抗组、联合用药组与对照组相比,联合用药组与AZD5363组、利妥昔单抗组相比,P均〈0.05。结论 AZD5363与利妥昔单抗联合应用可增强对BL细胞株Daudi的增殖抑制作用,促使细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制Akt磷酸化,阻断PI3k/Akt信号转导通路,从而发挥抗肿瘤效应。非小细胞肺癌组织中p-mTOR、p70s6k的表达变化及其临床意义
摘要：目的观察非小细胞肺癌组织中磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-m TOR）及核糖体40s小亚基S6蛋白激酶（p70s6k）蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法非小细胞肺癌患者82例,手术切除肿瘤组织作为肺癌组,取患者肺癌同侧远端的肺泡正常组织46例份作为对照组1,正常支气管黏膜组织50例份为对照组2。免疫组化方法检测3组组织中的p-m TOR及p70s6k蛋白,并分析其与非小细胞肺癌临床病理参数的关系。结果肺癌组、对照组1、对照组2 p-m TOR蛋白表达阳性率分别为68.29%、17.39%、32.0%,p70s6k蛋白表达阳性率分别为85.37%、21.74%、32.00%,肺癌组与对照组1、对照组2相比,P均〈0.01。非小细胞肺癌低分化p-m TOR蛋白表达阳性率高于中高分化（P〈0.01）。肺癌组织中p-m TOR和p70s6k蛋白的表达呈正相关（r=0.21,P=0.003 2）。结论p-m TOR、p70s6k蛋白在非小细胞肺癌组织中高表达,可作为早期诊断肺癌的指标或抗癌药物作用的新靶点。基于房颤患者CYP2C9和VKORC1基因型、年龄、身高建立并评价华法林给药剂量计算公式
摘要：目的基于房颤患者细胞色素P450 2C9（CYP2C9）和维生素K环氧化物还原酶复合体1（VKORC1）基因型、年龄、身高建立华法林给药剂量计算公式,并进行评价。方法 122例房颤患者,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析CYP2C9（rs1057910）和VKORC1（rs9923231）基因型,采用多元线性回归分析法依据CYP2C9和VKORC1基因型、年龄、身高建立华法林给药剂量计算公式。另选择60例房颤患者,随机分为对照组和实验组各30例。实验组按照华法林给药剂量计算公式的剂量给予,对照组给予华法林2.5 mg/d,均7 d,后根据国际标准化比值（INR）调整,直至达到稳定的华法林维持剂量,比较两组达到稳定的维持剂量所需的时间。结果华法林剂量=0.438-0.014 3×年龄＋0.014 9×身高-0.324×CYP2C9×3＋0.209×VKORC1,R^2为0.564。实验组、对照组随访50 d,达到华法林维持剂量分别有26、19例,两组比较,P〈0.05。实验组、对照组患者达到华法林维持剂量所需时间分别为（25.8±1.7）、（33.1±1.9）d,两组比较,P〈0.05。结论建立了一个基于房颤患者CYP2C9和VKORC1基因型、年龄、身高的华法林给药剂量计算公式,根据该公式指导房颤患者的华法林治疗剂量能缩短达到华法林维持剂量所需的时间。《山东医药》对医学名词及术语的一般要求
摘要：医学名词应使用全国科学技术名词审定委员会公布的名词。中医临床诊疗术语、经穴部位、耳穴名称与部位等应遵循相应的国家标准。对于没有通用译名的名词术语,在文内第一次出现时应注明原词。中西药名以最新版《中华人民共和国药典》和《中国药品通用名称》（均由中国药典委员会编写）为准。英文药物名称则采用国际非专利药名。计算机导航经后路C2/3椎弓根螺钉内固定术治疗不稳定型Hangman骨折
摘要：目的观察计算机导航经后路C2/3椎弓根螺钉内固定术治疗不稳定型Hangman骨折的临床疗效。方法6例不稳定型Hangman骨折患者,均采用计算机辅助导航经后路微创C2/3椎弓根螺钉内固定术治疗。记录患者的手术时间,术中出血量,引流量,住院时间,术前、术后及随访时颈椎功能障碍指数（NDI）、视觉模拟评分（VAS）并评价手术满意度;采用CT根据Andrew法评价椎弓根螺钉置入精确性;采用动力位X线判断椎体融合情况及骨折愈合情况。结果 6例患者手术时间为120-150 min、平均135 min,手术出血量为20-50 m L、平均35 m L,住院时间为4-10 d、平均6 d。6例患者平均随访时间为13.6个月,随访时患者ASIA分级均恢复到E级,患者术前NDI为46、术后为14、随访时为8,患者术前颈部VAS为8分、术后为1分、随访时为0分。6例患者Macnab手术满意度评价均为优秀。6例患者共置入螺钉24枚,优22枚、良2枚。随访时动力位X线提示枢椎骨折部位愈合良好。结论计算机导航经后路微创C2/3椎弓根螺钉内固定术治疗不稳定型Hangman骨折安全有效。颅脑损伤后急性弥漫性脑肿胀的危险因素
摘要：目的观察颅脑损伤后急性弥漫性脑肿胀的危险因素。方法 98例颅脑损伤患者,其中发生急性弥漫性脑肿胀者22例（病例组）、无急性弥漫性脑肿胀者76例（对照组）。首先采用χ2检验分析两组患者年龄、性别、受伤至治疗时间等因素有无差异,对有统计学差异的变量纳入逻辑回归方程,采用二元Logistic回归方法分析颅脑损伤后发生急性弥漫性脑肿胀的独立危险因素。结果受伤至治疗时间〉3 h（OR=2.36,P=0.018）、低血压休克（OR=3.23,P=0.031）和原发性脑干损伤（OR=3.69,P=0.025）是颅脑损伤患者发生急性弥漫性脑肿胀的独立危险因素。结论受伤至治疗时间〉3 h、低血压休克和原发性脑干损伤是颅脑损伤后急性弥漫性脑肿胀的危险因素。贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织博尔纳病毒核蛋白检测
摘要：目的观察贵州遵义地区蝙蝠脑组织博尔纳病毒（BDV）感染情况。方法采用Western blotting法检测贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织中BDV核蛋白。结果蝙蝠脑组织BDV核蛋白阳性率为12.2%（10/82）。结论贵州遵义地区健康蝙蝠存在BDV感染。七氟醚预处理对缺血再灌注损伤小鼠脑组织的保护作用及其机制探讨
摘要：目的观察七氟醚预处理对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其可能机制。方法 60只雄性健康昆明小鼠随机分为假手术组、模型组和预处理组,每组20只。假手术组和模型组输纯氧气60 min,预处理组输入氧气及2.4%七氟醚60 min,用纯氧洗脱10 min。模型组和预处理组利用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型,于再灌注24 h时,计算小鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积百分比,利用RT-PCR检测小鼠海马组织中的TREK-2、Caspase-3 mRNA。结果预处理组和模型组小鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积百分比较假手术组高,且预处理组较模型组低（P均〈0.05）。预处理组和模型组小鼠海马组织TREK-2 mRNA相对表达量较假手术组高,且预处理组较模型组高（P均〈0.05）。预处理组和模型组小鼠海马组织Caspase-3 mRNA相对表达量较假手术组高,且预处理组较模型组低（P均〈0.05）。结论七氟醚预处理对缺血再灌注损伤小鼠脑组织具有保护作用,可能与其增加海马组织TREK-2表达、减少Caspase-3表达有关。熊果酸对糖尿病大鼠肾组织的保护作用
摘要：目的观察熊果酸对糖尿病大鼠肾组织的保护作用。方法将45只SD大鼠随机分为对照组（NC组,8只）、造模组（37只）。造模组以高脂饲料喂养4周和一次性尾静脉注射链脲佐菌素（30 mg/kg）制备糖尿病大鼠模型。将造模成功的32只大鼠随机分为模型对照组（MC组）、二甲双胍组（MF组）、熊果酸高剂量组（Ur AH组）及熊果酸低剂量组（Ur AL组）。MF组按100 mg/kg灌胃二甲双胍,Ur AH组按100 mg/kg灌胃熊果酸,Ur AL组按50mg/kg灌胃熊果酸,MC组与NC组每天灌胃同体积纯水,每天1次,连续6周。分别于给药前及给药第2、4、6周测定各组大鼠血糖,给药6周后测定各组大鼠血清尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）,取双侧肾脏称重并计算肾脏系数,釆用HE染色法在光镜下观察大鼠肾组织病理变化。结果与NC组大鼠相比,MC组大鼠肾组织病理损伤重,肾系数大（P〈0.01）,血清UA、BUN、Scr水平高（P均〈0.01）。与MC组相比,MF组、Ur AH组大鼠肾脏病变减轻,肾系数小（P均〈0.05）,血清UA、BUN、Scr水平低（P〈0.05或〈0.01）。结论熊果酸对糖尿病大鼠肾组织有一定的保护作用。蟾衣提取物对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用
摘要：目的观察蟾衣提取物对大鼠佐剂性关节炎（AA）的治疗作用。方法将60只SD大鼠随机分为治疗组、模型组和对照组各20只。模型组和治疗组于每只大鼠右后足跖皮内一次性注射0.1 m L弗氏完全佐剂,对照组注射等量的生理盐水。治疗组造模3周后按2 m L/kg腹腔注射蟾衣提取物,1次/d,连续给药3周,模型组和对照组腹腔注射等量生理盐水。在造模当天及造模后第1、2、3、4、5、6、7周分别测量大鼠体质量、左右后爪体积,各组大鼠在治疗第4周后行四肢关节X线摄片检查及四肢关节病理检查,观察大鼠不良反应发生情况。结果与对照组相比,模型组造模后3、4、5、6、7周左、右后爪体积大（P均〈0.05）。与模型组相比,治疗组造模后5、6、7周左、右后爪体积小（P均〈0.05）。X线检查结果显示,治疗组大鼠后肢爪关节与对照组相似,较模型组骨质疏松、骨质破坏明显修复,关节面光滑,周围软组织影增厚减轻。HE染色结果显示,治疗组足趾关节面较光滑,增生不明显,炎症细胞浸润明显减轻,关节间隙出现,边缘骨质破坏不明显,与对照组相似。各组大鼠未见明显不良反应。结论蟾衣提取物可有效减轻并修复大鼠AA所致的损伤。尾静脉注射姜黄素对重症肺炎大鼠心肌损伤的防治效果观察
摘要：目的观察尾静脉注射姜黄素对重症肺炎大鼠心肌损伤的防治效果。方法将60只大鼠分为正常对照组、模型组及姜黄素治疗组各20只。模型组及姜黄素治疗组用1 m L注射器穿刺气管缓慢滴入0.3 m L新鲜配制的肺炎克雷伯菌混悬液制备重症肺炎模型,对照组滴入等量生理盐水。姜黄素治疗组大鼠尾静脉注射姜黄素液（100 mg/kg,1次/d）5 min,共3 d;对照组及模型组注射等量生理盐水。于姜黄素干预后72 h,检测各组大鼠血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、脑钠肽（BNP）,测算大鼠左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）,计算大鼠心肌病理积分。结果与对照组相比,模型组血清CK、CK-MB、LDH、BNP及心肌病理积分高,LVEF、LVFS低（P均〈0.01）。与模型组相比,姜黄素治疗组血清CK、CK-MB、LDH、BNP及心肌病理积分低,LVEF、LVFS高（P均〈0.05）。结论尾静脉注射姜黄素对重症肺炎大鼠心肌损伤具有防治作用。HPLC-UV切换波长法同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸
摘要：目的建立同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸的含量的评价方法。方法 3批复方甘草合剂（批号：130112、130113、130201）。制备甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸混合对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液（复方甘草合剂缺甘草的阴性样品）。采用Venusil XBP-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,0.4%冰醋酸-甲醇梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min,运用HPLC-UV切换波长法检测3种溶液。结果甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸分别在44.20-1 326、8.92-267.6、13.68-410.4和148.40-4 452 ng范围内线性关系良好（r分别为0.999 2、0.999 1、0.999 2、0.999 6）,加样回收率分别为98.63%（RSD=1.12%）、99.13%（RSD=1.04%）、98.65%（RSD=1.06%）和99.10%（RSD=0.90%）。批号为130112的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为67.22、17.00、24.82、2 881.93μg/m L,RSD分别为1.32%、0.87%、2.34%、2.17%;批号为130113的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为68.59、16.99、23.74、2 798.72μg/m L,RSD分别为1.99%、1.33%、1.69%、1.86%;批号为130201的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为67.91、15.98、24.16、2 824.55μg/m L,RSD分别为2.17%、2.21%、1.77%、0.97%。结论HPLC-UV切换波长法可用于同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸的含量。叶酸与八聚精氨酸双修饰脂质体的制备及其功效观察
摘要：目的制备叶酸与穿膜肽八聚精氨酸（R8）双修饰的脂质体,并观察其功效。方法采用注入法制备叶酸与穿膜肽R8双修饰的脂质体（FA-R8-LPs）,采用激光粒度分析仪对脂质体粒径和电位进行测定,采用琼脂糖凝胶电泳方法考察脂质体与VEGF siRNA的结合度,分别采用流式细胞计数法、激光共聚焦显微镜观察及Western blotting法观察载有VEGF siRNA脂质体对口腔癌KB细胞的抗肿瘤效果。结果叶酸与穿膜肽R8双修饰的脂质体粒径为（112.5±3.7）nm,电位为（3.23±0.88）m V。FA-R8-LPs已基本完全与VEGF siRNA结合（FA-R8-LPssiRNA）。FA-R8-LPs-siRNA对KB细胞的抑制率为44.5%,平均荧光强度值是未修饰脂质体的5倍左右。FA-R8-LPs与未修饰的脂质体相比明显提高了转染效率。结论成功制备了叶酸与穿膜肽R8双修饰的脂质体,该脂质体能增强VEGF siRNA的抗肿瘤效果。老年非ST段抬高型急性心肌梗死患者临床特征及预后影响因素
摘要：目的探讨老年非ST段抬高型急性心肌梗死（NSTEMI）患者的临床特征及预后影响因素。方法 135例老年急性心肌梗死患者,其中NSTEMI患者72例、ST段抬高型急性心肌梗死（STEMI）患者63例,比较NSTEMI与STEMI患者的临床资料,同时采用Cox回归模型分析影响老年NSTEMI患者预后的相关因素。结果 NSTEMI、STEMI患者中糖尿病分别为30、12例,高血压分别为49、31例,持续性胸痛分别为40、53例,心力衰竭分别为45、27例,肌酸激酶峰值分别为（829.55±125.64）、（2 354.45±351.01）IU/L,肌钙蛋白I峰值分别为（0.86±0.24）、（1.86±0.64）ng/m L,两者比较,P均〈0.05。出院后1年期间内,NSTEMI患者再发心绞痛发生率、心力衰竭发生率和病死率均高于STEMI患者（24.3%vs.11.7%,18.6%vs.6.7%,25.7%vs.8.3%）,P均〈0.05。高龄（〉65岁）（HR=2.13）、心力衰竭（HR=3.37）和入院时Killip≥3级（HR=1.79）为老年NSTEMI患者近期预后的危险因素,服用阿司匹林（HR=0.51）为老年NSTEMI患者近期预后的保护因素。结论与老年STEMI患者相比,老年NSTEMI患者合并糖尿病、高血压和心力衰竭更多,持续性胸痛更少,肌酸激酶峰值和肌钙蛋白I峰值更低。老年NSTEMI患者远期预后较差,高龄（〉65岁）、伴心力衰竭和入院时Killip≥3级老年NSTMEI患者预后风险增加,服用阿司匹林老年NSTMEI患者预后风险降低。长期口服不同剂量阿托伐他汀的颈动脉重度狭窄患者CAS后颈动脉再狭窄对比观察
摘要：目的比较长期口服不同剂量阿托伐他汀的颈动脉重度狭窄患者颈动脉支架置入术（CAS）后颈动脉再狭窄情况。方法 384例颈动脉颅外段重度狭窄CAS术后患者,院外长期口服阿托伐他汀10 mg、1次/晚193例（A组）,20 mg、1次/晚108例（B组）,40 mg、1次/晚83例（C组）。比较三组颈动脉再狭窄率,血清谷氨酰转肽酶（GGT）及肌酸激酶（CK）水平。结果 A、B、C组颈动脉再狭窄率分别为13.99%（27/193）、12.04%（13/108）、3.61%（3/83）,A、B组与C组比较,P均〈0.05。A、B、C组血清GGT水平分别为（58.36±18.91）、（60.79±18.94）、（60.36±19.36）U/L,血清CK水平分别为（135.38±34.65）、（136.19±33.75）、（139.38±24.53）U/L,三组血清GGT、CK水平比较,P均〉0.05。结论长期口服40 mg阿托伐他汀的颈动脉重度狭窄患者CAS术后颈动脉再狭窄发生率低,且安全性好。
