自限性和慢性HBV感染患者IFN-ω1、IFNGR基因的单核苷酸多态性观察
摘要：目的观察自限性和慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者干扰素ω1（IFN-ω1）、干扰素γ受体（IFNGR）基因的单核苷酸多态性（SNP）。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测206例自限性HBV感染者（对照组）和210例慢性HBV感染者（病例组）IFN-ω1基因上4个SNP位点、IFNGR基因上4个位点,比较两组基因型和等位基因频率。结果病例组、对照组IFNGR基因的rs9376267位点CT基因型频率分别为48.4%、60.3%,两组比较,P=0.012。两组IFN-ω1、IFNGR基因其他SNP位点基因型和等位基因频率比较差异无统计学意义。结论自限性HBV感染患者IFNGR基因上的rs9376267位点CT基因型频率较慢性HBV感染患者高。一些常用词汇可直接用缩写
mM-CSF及其剪切体重组逆转录病毒表达载体的构建
摘要：目的构建膜结合型M-CSF（mM-CSF）及其胞内区截短30个氨基酸的剪切体（mM-CSF-Δ）重组逆转录病毒表达载体。方法用DNA重组技术构建并鉴定mM-CSF和mM-CSF-Δ的重组逆转录病毒表达载体MSCVPGK-GFP-mM-CSF、MSCV-PGK-GFP-mM-CSF-Δ,与空载体对照MSCV-PGK-GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒,并感染HEK293细胞,通过流式分选术获得3种阳性细胞。结果经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染HEK293细胞,获得了稳定表达细胞株HEK293-M、HEK293-M-Δ和对照细胞株HEK293-V。RT-PCR以及Western blotting法检测发现HEK293细胞中有mM-CSF和mM-CSF-Δ的表达,HEK293-M细胞和HEK293-M-Δ细胞经流式抗体标记后均能检测到膜蛋白的表达。结论成功构建了mM-CSF及其剪切体的重组逆转录病毒表达载体。LBH589对肾癌细胞株OS-RC-2增殖的影响及机制探讨
摘要：目的观察LBH589对肾癌细胞株OS-RC-2细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法将人肾癌细胞株OS-RC-2细胞分为DMSO组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组、LBH589组和NAC＋LBH589组,NAC组加入5 mmol/L NAC刺激2 h,LBH489组加入50 nmol/L LBH589刺激48 h,NAC＋LBH589组先加入5 mmol/L NAC预处理2 h,洗脱后再以50 nmol/L LBH589刺激48 h。Ed U法测算细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧簇（ROS）,Western blotting法检测细胞p-STAT3、Cyclin D1蛋白。结果 DMSO组、NAC组、LBH589组、NAC＋LBH589组Ed U染色阳性细胞比例分别为53%±4%、52%±5%、7%±3%、29%±6%,细胞凋亡率分别为0.25%±0.13%、0.18%±0.15%、11.35%±2.40%、1.92%±0.63%,ROS分别为0.60%±0.26%、0.33%±0.25%、12.2%±2.65%、5.33%±1.05%,DMSO组、NAC＋LBH589组与LBH589组比较,P均〈0.05。DMSO组、NAC组、LBH589组、NAC＋LBH589组p-STAT3相对表达量分别为1.00±0.07、1.02±0.07、0.49±0.04、0.52±0.05,Cyclin D1相对表达量分别为1.00±0.08、1.03±0.08、0.45±0.04、0.49±0.03,DMSO组与LBH589组比较,P均〈0.05。结论LBH589对OS-RC-2肾癌细胞生长有抑制作用,其可能与诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖、升高ROS水平有关。LBH589能抑制STAT3信号通路,进而使Cyclin D1表达下降,而LBH589诱导ROS升高不是通过抑制STAT3信号通路从而使肾癌细胞生长抑制。甲状腺乳头状癌组织Bag-1、Bcl-2蛋白表达变化及意义
摘要：目的观察甲状腺乳头状癌组织Bag-1、Bcl-2蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测120例份甲状腺乳头状癌及癌旁配对正常甲状腺组织中Bag-1与Bcl-2蛋白,并分析两种蛋白表达与甲状腺乳头状癌临床病理参数的关系。结果甲状腺乳头状癌及癌旁配对正常甲状腺组织中Bag-1表达的阳性率分别为72.5%、9.2%,Bcl-2表达的阳性率分别为81.7%、11.7%,两者比较,P均〈0.05。不同肿瘤直径、淋巴结转移情况甲状腺乳头状癌肿瘤组织Bag-1、Bcl-2蛋白表达比较,P均〈0.05。甲状腺乳头状癌组织中Bag-1与Bcl-2蛋白阳性表达呈正相关（r=0.797,P〈0.01）。结论甲状腺乳头状癌Bag-1与Bcl-2蛋白高表达,且二者表达密切相关,与肿瘤发生发展有关。miR-222基因转染对人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭的影响
摘要：目的 miR-222基因转染对人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-222在A549、16HBE细胞中的表达;将miR-222 mimics、scramble、TIMP3-siRNA与si-control分别转染于A549细胞（设为实验1组、实验2组、实验3组、实验4组）,Western blotting法检测细胞中的TIMP3蛋白,MTT法和Transwell侵袭实验分别检测细胞增殖与侵袭能力。结果 miR-222在A549、16HBE细胞的表达分别为0.767±0.086、0.405±0.034,两者比较,P〈0.01。实验1组、实验2组、实验3组、实验4组A549细胞中TIMP3蛋白表达分别为0.416±0.023、0.732±0.019、0.430±0.020与0.803±0.025,实验1组与实验2组比较,实验3组与实验4组比较,P均〈0.05。在A549细胞中过表达miR-222或沉默TIMP3 48、72、96 h后,细胞的增殖能力明显增强（P均〈0.05）。实验1组、实验2组、实验3组、实验4组A549细胞48 h后穿过基质胶的细胞数分别为（104±5）、（204±8）、（99±4）、（188±7）个,实验1组与实验2组比较,实验3组与实验4组比较,P均〈0.05。结论 miR-222基因转染的人非小细胞肺癌细胞增殖与侵袭能力增强,其可能与miR-222靶向调控TIMP3作用有关。抑郁与稳定期COPD患者肺功能、生活质量的关系
摘要：目的探讨抑郁与稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺功能、生活质量的关系。方法稳定期COPD患者80例,采用医院焦虑抑郁量表中抑郁量表部分（HAD-D）对所有受试者进行抑郁状态评估,根据HAD-D评分分为非抑郁组（〈8分）与抑郁组（≥8分）。观察两组肺功能、6分钟步行距离（6MWD）、MRC呼吸困难指数（m MRC）评分、COPD评估测试（CAT）量表评分等方面的差异。结果抑郁组9例、非抑郁组71例。抑郁组与非抑郁组的肺功能、6MWD、m MRC评分比较无统计学差异。抑郁组CAT总分、活动能力、精神状态得分分别为（21.11±5.46）、（7.44±1.51）、（4.78±2.39）分,均高于非抑郁组的（13.87±6.33）、（4.07±2.87）、（2.90±2.36）分。COPD患者HAD-D评分与CAT总分呈正相关（r=0.495,P=0.000）。结论抑郁与稳定期COPD患者肺功能无关,与生活质量有关。磷酸化PKC-δ对地塞米松诱导大鼠成骨细胞凋亡的影响
摘要：目的观察磷酸化PKC-δ对地塞米松（Dex）诱导的大鼠成骨细胞凋亡的影响。方法取新生SD大鼠颅骨第3代成骨细胞,分为对照组、Dex组（1×10-7mol/L Dex）、PMA预处理组（1×10-7mol/L Dex＋100 nmol/L PMA）、Rottlerin预处理组（1×10-7mol/L Dex＋2μmol/L Rottlerin）,培养24 h后采用MTT法检测细胞增殖活性,采用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术和吖啶橙/溴乙锭（AO/EB）荧光染色法检测细胞凋亡,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3及磷酸化PKC-δ。结果与对照组相比,Dex组细胞增殖活性低,细胞凋亡多,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达高,Bcl-2表达低（P均〈0.05）。与Dex组相比,PMA预处理组细胞增殖活性低,细胞凋亡多,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达高,Bcl-2表达低（P均〈0.05）。与Dex组相比,Rottlerin预处理组细胞增殖活性高,细胞凋亡少,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达低,Bcl-2表达高（P均〈0.05）。结论磷酸化PKC-δ可促进Dex诱导的大鼠成骨细胞凋亡。TRAF2基因转染乳腺癌细胞MCF-7增殖情况观察
摘要：目的观察TRAF2基因转染乳腺癌细胞MCF-7增殖情况。方法转染h TRAF2p LPCX-HA-Flag/P874质粒于MCF-7细胞,以空质粒pc DNA3作为阴性对照。MTT法检测细胞增殖能力,Western blotting法检测细胞中NF-κB的核表达。结果转染空质粒、转染h TRAF2p LPCX-HA-Flag/P874质粒的MCF-7细胞48 h的吸光度值分别为0.313±0.019、0.606±0.007,72 h分别为0.708±0.193、1.332±0.075,96 h分别为0.936±0.203、1.462±0.231,两者比较,P均〈0.001。转染空质粒、转染h TRAF2p LPCX-HA-Flag/P874质粒的MCF-7细胞NF-κB的核表达分别为0.789±0.236、1.169±0.369,两者比较,P〈0.01。结论 TRAF2基因转染乳腺癌细胞MCF-7增殖能力增强。肺癌细胞株A549、H1650、DMS53中整合素α3的表达比较
摘要：目的比较整合素α3（ITGA3）在三种肺癌细胞株A549（肺腺癌）、H1650（肺泡细胞癌）、DMS53（小细胞肺癌）中的表达。方法应用基因芯片技术提取A549、H1650、DMS53细胞株的mRNA,反转录为c DNA,以32P标记c DNA,与整合素基因芯片进行杂交,经放射自显影后读取灰度值,并以基因表达的限制性分析（RAGE）和流式细胞仪技术进行验证。结果 ITGA3亚单位在A549、H1650、DMS53细胞株中的表达分别为7.58±1.37、8.10±1.51、2.38±0.20,A549、H1650与DMS53细胞株比较,P均〈0.01。RAGE结果显示,经AvaⅡ酶切后,A549、H1650、DMS53细胞株均出现ITGA3（69 bp）,分别为167.0、172.1、44.7,A549、H1650与DMS53细胞株比较,P均〈0.01。流式细胞仪检测结果显示,ITGA3在A549、H1650、DMS53细胞株中的表达分别为83.62±1.40、90.86±4.78、1.24±0.53,A549、H1650与DMS53细胞株比较,P均〈0.01。结论 ITGA3在A549和H1650细胞株中的表达上调,高于其在DMS53细胞株中的表达。缺血再灌注损伤大鼠脊髓神经元细胞凋亡、脊髓组织中内质网应激经典标志物的表达变化
摘要：目的观察缺血再灌注损伤大鼠脊髓神经元细胞凋亡、脊髓组织中内质网应激经典标志物的表达变化,并探讨其意义。方法将60只SD大鼠随机分为实验组、假手术组和空白组,各20只。实验组采用经典Zivin法复制模型,动脉夹结扎左肾下腹主动脉1 h,制备脊髓缺血再灌注模型;假手术组只做左侧肋骨下缘切口,不结扎腹主动脉;空白组不做任何处理。三组分别于缺血再灌注后6、12、24、48 h,电镜观察脊髓神经元细胞的凋亡情况,Western blotting法检测脊髓组织X-盒结合蛋白1（XBP1）及C-JNK氨基末端激酶（磷酸化JNK）蛋白。结果与假手术组及空白组相比,实验组缺血再灌注6、12、24、48 h神经细胞凋亡数量多。假手术组及空白组可检测到少量表达的XBP1及磷酸化JNK蛋白。实验组再灌注6 h后,缺血再灌注梗死灶周围可以观察到明显表达的XBP1及磷酸化JNK蛋白,缺血再灌注12 h后两种蛋白表达达到高峰,24 h稍有回落,48 h仍有较高表达。结论缺血再灌注损伤大鼠脊髓神经元细胞凋亡数量增加、脊髓组织中内质网应激经典标志物XBP1及磷酸化JNK蛋白的表达增加。内质网应激参与了脊髓缺血再灌注后的神经细胞凋亡,其机制可能与促进脊髓组织磷酸化JNK和XBPI蛋白表达有关。急性低血糖大鼠血清FT_3、FT_4、TSH水平及下丘脑组织TRH表达变化
摘要：目的观察急性低血糖大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）水平及下丘脑组织促甲状腺激素释放激素（TRH）表达的变化。方法 Wistar大鼠21只,根据血糖水平分为正常血糖组、轻度低血糖组、重度低血糖组3组,每组7只,后两组腹腔注射短效胰岛素诱导急性低血糖,轻度低血糖组血糖2.0~2.64mmol/L,重度低血糖组血糖〈2.0 mmol/L。化学发光免疫法检测各组大鼠血清FT3、FT4、TSH,Western blotting法、实时荧光定量PCR法分别检测各组大鼠下丘脑组织中的TRH蛋白及mRNA。结果正常血糖组、轻度低血糖组、重度低血糖组FT3分别为（5.05±1.40）、（4.82±1.22）、（4.92±1.08）pmol/L,FT4分别为（2.45±0.26）、（2.19±0.11）、（2.30±0.21）pmol/L,TSH分别为（0.16±0.10）、（0.05±0.03）、（0.04±0.04）μIU/m L,轻度低血糖组、重度低血糖组分别与正常血糖组FT4、TSH比较,P均〈0.05。正常血糖组、轻度低血糖组、重度低血糖组TRH蛋白分别为0.66±0.01、0.34±0.01、0.52±0.07,TRH mRNA分别为1.44±0.10、0.54±0.04、2.42±0.97,轻度低血糖组、重度低血糖组分别与正常血糖组比较,轻度低血糖组与重度低血糖组比较,P均〈0.05。结论急性低血糖大鼠血清FT4、TSH水平降低,FT3不变,下丘脑组织中TRH蛋白表达降低,TRH mRNA表达先降低后升高。不同浓度LBH589对人前列腺癌PC3细胞增殖、EZH2 mRNA及蛋白表达的影响
摘要：目的观察不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对人前列腺癌PC3细胞增殖、EZH2 mRNA及蛋白表达的影响。方法选择1、10、100 nmol/L的LBH589处理PC3细胞,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,实时定量PCR、Western blotting法分别检测细胞EZH2的mRNA和蛋白。结果随着浓度和时间的增加,LBH589对PC3细胞的抑制作用呈现明显的时间-剂量关系（P均〈0.05）。相同时间时,随着LBH589浓度的增加,PC3细胞EZH2的mRNA、蛋白表达逐渐降低（P均〈0.05）;相同浓度时,随着时间的延长,PC3细胞EZH2的mRNA、蛋白表达逐渐降低（P均〈0.05）。结论 LBH589可抑制PC3细胞的增殖,同时可使细胞EZH2的mRNA及蛋白表达降低,且随着浓度的增加作用增强。适量乙醇灌胃对急性心肌梗死大鼠心肌组织的保护作用观察
摘要：目的观察适量乙醇灌胃对急性心肌梗死大鼠心肌组织的保护作用。方法 70只Wistar大鼠,制备急性心肌梗死的大鼠动物模型,将模型制备成功的30只分成5组,每组6只。A组给予3.8 g/kg葡萄糖灌胃;B组给予0.5 g/kg乙醇、2.8 g/kg葡萄糖灌胃;C组给予1.0 g/kg乙醇、1.9 g/kg葡萄糖灌胃;D组给予1.5 g/kg乙醇、0.9g/kg葡萄糖灌胃;E组给予2.0 g/kg乙醇灌胃。各组灌胃1次/d,共42 d。计算各组左室质量指数（LVWI）,测算心肌Ⅰ型胶原蛋白/Ⅲ型胶原蛋白,放射免疫法测量血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮（Ald）。结果与A组相比,C组LVWI、Ⅰ型胶原蛋白/Ⅲ型胶原蛋白、AngⅡ含量、Ald含量低（P均〈0.05）;其他各组与A组相比差异无统计学意义。结论 1.0 g/kg乙醇灌胃对急性心肌梗死大鼠心肌组织具有保护作用。侧脑室注入网膜素对小鼠摄食量及其下丘脑组织NPY、AGRP、CRH、POMC mRNA表达的影响
摘要：目的观察侧脑室注入网膜素（omentin）对小鼠摄食量及其下丘脑组织神经肽Y（NPY）、刺鼠相关蛋白（AGRP）、促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、阿片-促黑素细胞皮质素原（POMC）mRNA表达的影响。方法 20只昆明小鼠随机分为实验组及对照组,两组侧脑室置管并保留72 h后分别于侧脑室注射omentin及生理盐水（1.2μg/kg）,观察注射后24 h小鼠摄食量有无变化,RT-PCR检测两组小鼠下丘脑组织AGRP、NPY、CRH及POMC mRNA。结果实验组、对照组摄食量分别为（4.63±0.17）、（4.51±0.12）g,两组比较,P〉0.05。实验组、对照组NPY mRNA相对表达量分别为0.47±0.24、0.48±0.29,AGRP mRNA分别为24.31±6.21、22.01±7.14,POMC mRNA分别为0.92±0.48、0.83±0.16,CRH mRNA分别为0.93±0.45、0.69±0.12,两组CRH mRNA表达量比较,P〈0.05。结论侧脑室注入omentin对小鼠摄食量及下丘脑组织NPY、AGRP、POMC mRNA表达无影响,但CRH mRNA表达增加。来自医院感染患者标本的鲍曼不动杆菌耐药性分析
摘要：目的分析来自医院感染患者标本的鲍曼不动杆菌的耐药性。方法对281株鲍曼不动杆菌进行药敏试验,药敏结果采用WHONET5.6软件进行回顾性分析。结果 2012年~2014年鲍曼不动杆菌对多黏菌素B敏感率一直为100%,对阿米卡星的敏感率分别为18.6%、37.1%和41.4%,对复方新诺明的敏感率分别为28.0%、38.1%和41.4%,3年对亚胺培南耐药率均高于69%,对美洛培南的耐药率均高于70%。结论来自医院感染患者标本的鲍曼不动杆菌对多黏菌素B敏感率高,对亚胺培南、美洛培南的耐药率高。2型糖尿病颈动脉硬化患者血清胱抑素C水平观察
摘要：目的观察2型糖尿病颈动脉硬化患者血清胱抑素C水平。方法 282例2型糖尿病患者,按颈动脉内中膜厚度分为无颈动脉硬化组（A组,颈动脉内中膜厚度〈1.0 mm）和颈动脉硬化组,并进一步将颈动脉硬化组分为B组（颈动脉内中膜厚度≥1.0 mm）、C组（颈动脉内中膜厚度≥1.5 mm）,比较三组血清胱抑素C水平。结果 A、B、C组分别为90、93、99例,胱抑素C分别为（0.88±0.18）、（1.02±0.16）、（1.21±0.34）μmol/L,三组比较,P〈0.01。Logistic逐步回归分析发现,胱抑素C水平（OR=39.543,95%CI：1.608~972.513,P=0.024）与颈动脉内中膜厚度有关。结论 2型糖尿病颈动脉硬化患者血清胱抑素C水平升高,胱抑素C为颈动脉硬化的危险因素。原发性高血压患者血清sPECAM-1水平与心肾靶器官损害的关系
摘要：目的探讨原发性高血压患者血清可溶性血小板内皮细胞黏附分子1（s PECAM-1）水平与心肾靶器官损害的关系。方法原发性高血压住院患者125例（高血压组）,并将60例同期门诊正常体检者作为对照组,检测两组血清s PECAM-1水平,常规测量两组SBP、DBP、MAP、空腹血糖、TC、TG、HDL、LDL、血肌酐、尿微量白蛋白,计算肾小球滤过率、左心室质量指数（LVMI）。结果高血压组血清s PECAM-1为（57.1±8.8）ng/m L,对照组为（43.6±7.3）ng/m L,两组比较,P〈0.01。高血压组血清s PECAM-1的中位数为52.7 ng/m L,其中s PECAM-1〈52.7 ng/m L者62例（低表达组）,〉52.7 ng/m L者63例（高表达组）。与s PECAM-1低表达组相比,s PECAM-1高表达组BMI、SBP、DBP、MAP、空腹血糖、TG、血肌酐、LVMI高,肾小球滤过率低,微量白蛋白尿和左心室肥厚患者多（P均〈0.05）。血清s PECAM-1与BMI（r=0.23,P=0.017）、TG（r=0.26,P=0.012）、血肌酐（r=0.41,P=0.005）、尿微量白蛋白（r=0.54,P〈0.001）和LVMI（r=0.37,P〈0.001）呈正相关,与肾小球滤过率（r=-0.47,P=0.003）呈负相关。结论原发性高血压患者血清s PECAM-1水平升高,与心肾靶器官损害有关。
