HepG2细胞电转染条件的优化
摘要：目的优化HepG2细胞电转染条件，进一步提高HepG2细胞的转染效率。方法采用电穿孔方法将pcDNA3．1-EGFP导入HepG2细胞中，在500μL电转染体系中，在不同电场强度、细胞数目、脉冲频率、脉冲时间、电转质粒数目、电转缓冲液、培养基血清浓度条件下，分别将pcDNA3．1-EGFP质粒电转染HepG2细胞，检测不同条件下细胞存活率和转染率。结果电转前4℃孵育电转体系混合液10min，方波电转条件在1个电脉冲、电压270V、细胞数为2×10^6个、质粒20μg、脉冲时间20ms、电转缓冲液为优化缓冲液、电转后置于37℃、含15％FBS的DMEM高糖培养基中培养48h，可获得高转染率（60．68±1．87）％。结论优化电穿孔法的电转染条件能够有效提高HepG2细胞的电转染效率。本研究为外源基因电转染HepG2细胞提供了可靠的试验参数。过量氟致骨相损伤的早期诊断指标分析
摘要：目的探讨过量氟致骨相损伤早期监测和诊断的参考指标。方法将48只Wistar大鼠随机分为四组各12只。染氟低、中、高剂量组分别饮用氟化钠浓度为50、100、150mg／L的自来水，对照组饮用普通自来水。8周后麻醉处死大鼠取切牙及股骨，HE染色观察切牙成釉细胞和骨组织形态学改变；放射免疫法测定血清骨钙素（OC）水平；生化法测定血清碱性磷酸酶（ALP）活性；氟离子选择电极法测定血氟浓度。结果各染毒组切牙成釉细胞排列不规则呈多层，高柱状细胞结构变矮或消失，少量细胞发生扭曲，随氟浓度增加以上病理学改变加重；骨组织出现骨小梁增多，排列致密等骨硬化性表现，骨骺板增厚，增殖层软骨细胞排列紊乱，随浓度增加以上病理学改变加重；血氟含量显著高于对照组（P〈0．05），且随饮用水氯化钠浓度浓度增加而增加（F=11．234，P〈0．01）。中、高剂量组血清OC水平显著高于对照组（P〈0．01），亦呈浓度依赖性（F=3．801，P〈0．05）。各染毒组ALP活性均呈上升趋势，呈浓度依赖性；但低、中剂量组与对照组比较无统计学差异；高剂量组明显高于低、中剂量组（F=5．759，P〈0．01）。结论血清氟、ALP和OC水平可作为氟致骨相损伤早期诊断的参考指标。人参皂苷Re对糖尿病大鼠的心肌保护作用及其机制探讨
摘要：目的探讨人参皂苷Re对糖尿病大鼠的心肌保护作用及机制。方法取40只Wistar大鼠高脂高糖饲料喂养，腹腔注射链脲佐菌素（STZ）35mg／kg制作糖尿病模型，将34只造模成功大鼠随机分为模型组12只，人参皂苷11只，吡格列酮组11只，分别予以相应量纯净水、人参皂苷Re25mg／（kg·d）、吡格列酮10mg／（kg·d）灌胃，连续给药4周；另取10只正常大鼠予标准饲料喂养4周作为对照组。干预4周后处死各组大鼠，分别检测血糖、血脂，血清和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平，并行心肌组织病理学观察。结果人参皂苷组和吡格列酮组空腹血糖和血清总胆固醇水平高于对照组，（P〈0．01），低于模型组（P〈0．01），两组间无统计学差异；人参皂苷组和吡格列酮组SOD活性低于对照组，MDA水平高于对照组（P均〈0．05）；血清和心肌组织中SOD活性均高于模型组（P〈0．01）、MDA水平均低于模型组（P〈0．05），但两组间无统计学差异。人参皂苷组和吡格列酮组心肌组织结构损伤明显轻于模型组，心肌细胞排列较模型组整齐。结论人参皂苷Re对糖尿病大鼠具有心肌保护作用；抗脂质过氧化作用是其作用机制之一。Cox-2、Topo-Ⅱ在结直肠癌组织中的表达及对奥沙利铂化疗患者预后的影响
摘要：目的探讨结直肠癌组织中环氧合酶-2（Cox-2）与拓扑异构酶-Ⅱ（Topo-Ⅱ）的表达变化及其对奥沙利铂化疗患者预后的影响。方法随机选取69例大肠癌患者手术切除的癌组织、癌旁组织标本各69份，另取正常大肠组织标本20份，采用免疫组化sP法检测上述标本中Cox-2、Topo-Ⅱ表达。大肠癌患者术后均采用含奥沙利铂方案化疗。采用，检验、Log-rank分析和Cox风险模型分析Cox-2、Topo-Ⅱ表达对患者生存期的影响。结果癌组织Cox-2表达阳性率为88．4％（61／69），明显高于癌旁和正常组织（P〈0．01）；Topo-Ⅱ表达阳性率59．4％（41／69），与癌旁组织（56．5％）及正常组织（55．0％）表达差异无统汁学意义；癌组织中Cox-2与Topo-Ⅱ表达呈正相关（r=0．254，P〈0．05），Cox-2表达、Topo-Ⅱ表达是影响患者预后的独立因素。结论大肠癌组织中Cox-2、Topo-Ⅱ均呈高表达，二者可能在肿瘤MDR发生中起重要作用；其表达水平升高是影响患者术后生存期的重要因素。颈动脉粥样硬化与血管性痴呆的相关性分析
摘要：目的探讨颈动脉粥样硬化对血管性痴呆发生、发展的影响。方法对61例血管性痴呆（VaD）患者（VaD组）及70例健康体检者（对照组）行高频超声检查，测定其颈总动脉、颈内动脉内-中膜厚度（IMT）及内径，颈动脉粥样硬化斑块的发生情况及斑块性质，采用全自动生化分析仪测定血TC、TG、HDL—C及LDL-C水平。结果VaD组颈总动脉IMT及颈内动脉IMT均明显大于对照组，颈总动脉及颈内动脉内径均明显小于对照组（P均〈0．05）；VaD组斑块发生率明显高于对照组（P〈0．05）；TC、TG、LDL-C水平均明显高于对照组、HDL-C明显低于对照组（P均〈0．05）。结论颈动脉粥样硬化形成与VaD的发生密切相关。制霉菌素、氟康唑外用治疗口腔真菌感染效果比较
摘要：大剂量糖皮质激素冲击疗法是治疗问质性肺炎的重要方法，但可导致口腔等部位真菌感染。2011年1月～2012年12月，我们观察了制霉菌素及氟康唑外用治疗口腔真菌感染的临床效果，现报告如下。临床资料：问质性肺炎口腔真菌感染患者60例，男34例、女26例，年龄38～82岁。均符合间质性肺炎的诊断标准，有口腔真菌感染临床表现，如口咽部疼痛、口腔黏膜和（或）舌体出现乳白色斑点、斑片状附着物，经咽拭子涂片培养确诊为真菌感染。随机分为制霉菌素组和氟康唑组各30例。米托坦逆转P-gP介导的人卵巢癌细胞的耐药作用及机制探讨
摘要：目的探讨米托坦对人卵巢癌细胞耐药的逆转作用及机制。方法采用10．0μM的阿霉素（ADM）体外高浓度反复间歇诱导法建立人卵巢癌细胞OVCAR-3／ADM耐药模型，观察其对紫杉醇、米托蒽醌、长春新碱、丝裂霉素、顺铂的耐药情况；MTT法检测不同浓度米托坦以及不同浓度米托坦联合ADM对OVCAR-3／ADM的生长抑制作用；Westernblot法检测OVCAR-3／ADM的P-gp蛋白表达情况。结果OVCAR-3的IC50为10．0μM；OVCAR．3／ADM的IC50为164．65μM，耐药指数为16．3。OVCAR-3／ADM对上述六种化疗药均产生了耐药性。10．0μM的ADM对OVCAR-3／ADM细胞的生长抑制率为4．78％。米托坦在高浓度时（≥30．0μM）时才表现出强的抑制肿瘤细胞生长作用，而米托坦与ADM联合应用时在米托坦浓度大于1μM时便可呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞的生长，且抑制率明显高于单纯应用米托坦组及ADM组，100．0μM米托坦＋10．0斗MADM组细胞生长抑制率最高，达到50．24％，与ADM组比较，经米托坦处理过的OVCAR-3／ADM的P-gp蛋白表达下降。结论OVCAR-3／ADM为获得性多药耐药细胞系，米托坦可增强该细胞系对ADM的敏感性，其逆转耐药的机制可能与下调OVCAR-3／ADM的P-gp蛋白表达有关。广东珠海地区慢性胃炎患者幽门螺杆菌的体外多重耐药性研究
摘要：目的分析广东珠海地区幽门螺杆菌（Hp）临床分离株体外多重耐药特点，为临床根除Hp治疗提供依据。方法对珠海地区312例经胃镜确诊、活检快速尿素酶试验阳性的慢性胃炎患者行Hp分离及菌株培养，采用折点敏感试验方法测定Hp对甲硝唑、呋喃唑酮、阿莫西林、克拉霉素的单药及多药耐药情况。结果共获得95株Hp菌株，其对4种抗生素耐药率由高到低依次为甲硝唑、呋喃唑酮、阿莫西林、克拉霉素，双重耐药率为30．53％-58．95％，多重耐药率26．32％～37．89％。结论广东珠海地区Hp多重耐药情况严重，行根除Hp治疗时应尽量避免应用甲硝哗：府进行药敏试验，寻求个体化治疗方案。多西他赛治疗乳腺癌导致血糖升高1例报告
摘要：患者女，60岁。2011年3月发现右乳肿块，行钼靶X线检查示右乳密度增高影，边界不清，考虑乳腺癌。2011年3月24日于我院行右乳癌改良根治术，术后恢复良好。2011年4月7日开始行AC方案化疗：每周期第1天予表柔比星100nag＋环磷酰胺1．0g静滴，21d为一周期，共4个周期；化疗后胃肠道反应为I度。2011年7月2日开始多西他赛单药化疗：每周期第1天予多西他赛100mg静滴，21d为一周期，共2个周期；用药前1天、用药当天、用药后1天分别口服地塞米松7．5mg，2次／d；化疗后胃肠道反应为踱，无其他不适。多西他赛化疗2周期后患者出现口渴、多饮、多食等症状，复查空腹血糖发现异常升高（化疗前后空腹血糖分别为5．2、9．5mmol／L）；总胆红素值略有升高。β-细辛醚对小鼠急性毒性作用的初步研究
摘要：目的探索β-细辛醚对小鼠的急性毒性作用，为其临床应用提供依据。方法将60只小鼠随机分为六组各10只。均采用灌胃给药：对照组给予大豆油，β-细辛醚800、700、600、500、400mg／kg组分别给予800、700、600、500、400mg／kg的β-细辛醚；灌胃容积均为40mL／kg。观察小鼠灌胃后和毒性反应及死亡情况，Bliss法计算半数致死量（LD50）。对各组死亡小鼠及时解剖、给药后14d处死存活小鼠解剖，取心、脑、肝、肾行病理检查。结果给药后15min各药物组相继出现眼睑闭合、运动失调、震颤、抽搐等症状；随药物剂量增加，症状加重；给药后48h，400mg／kg组无死亡者；500mg／kg组死亡1例，600mg／kg组死亡7例，700mg／kg组死亡9例，800mg／kg组全部死亡。β-细辛醚LD50为577．0mg／kg，95％CI上限是619．9mg／kg，下限是529．4mg／kg。400mg／kg组1只病理检查示肝细胞水肿、门管区炎细胞浸润；500mg／kg组1只左肾表面呈轻度凹凸不平，病理检查未见异常。600mg／kg、700mg／kg及800mg／kg组死亡小鼠病理检查未发现明显异常。结论小鼠β-细辛醚灌胃后出现急性毒性反应可能涉及中枢神经系统、神经肌肉及自主神经；其毒性靶器官尚待进一步研究证实。载三氧化二砷PEG修饰的共聚物纳米粒的药代动力学研究
摘要：目的探讨载三氧化二砷（As2O3）的PEG修饰的共聚物纳米粒（As2O3-PEG—PLGA，以下简称隐性纳米粒）的药代动力学特点。方法将10只家兔随机分为对照组与纳米组各5只，两组分别按体质量静脉注射相当于1mg／kg的As2O3溶液与纳米粒制剂，注射后0、15、30min及1、2、3、4、6、8、10、24、36h（共11个时问点）于耳静脉取血，分离血浆，采用原子荧光光度法测定As2O3浓度，并计算药代动力学参数。结果隐性纳米粒在家兔体内具有缓释作用，在循环系统内的滞留时间延长；与对照组比较，纳米组AUC显著增大，T1/2α与T1/2β显著延长，CL显著增大。结论隐性纳米粒具有缓释、延长半寿期与长循环的特征，有望发展成为一种理想的As2O3新型制剂。STZ诱导糖尿病大鼠胰岛细胞MHC-1表达的研究
摘要：目的探讨链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病的作用机制。方法将20只健康大鼠分为模型组及对照组各10只。模型组采用一次性注射STZ60mg／kg制作1型糖尿病模型，对照组不做任何处理。成模后3d两组各处死5只大鼠，提取胰腺组织做MHC-1免疫组织化学染色及HE染色；成模14d天处死剩余5只大鼠，同上处理。光镜下观察成模后3d及14d胰腺组织MHC-1表达，计数每张切片胰岛细胞表达MHC-1阳性细胞数。结果两组成模后3d及14d胰岛细胞MHC-1表达均为阳性，无异常表达；MHC-1阳性细胞数比较无显著差异。结论大剂量STZ诱导1犁糖尿病模型过程中对MHC—I表达无明显影响。复方杠板归胶囊的抗炎作用研究
摘要：目的观察复方杠板归胶囊对小鼠及大鼠的抗炎作用，为其临床用药提供实验依据。方法采用不同剂量的复方杠板归胶囊作用于小鼠，观察杠板归胶囊对二甲苯致耳肿胀、醋酸致腹腔毛细血管通透性升高的影响；采用不同剂量的复方杠板归胶囊作用于大鼠，观察复方杠板归胶囊对角叉菜胶致足肿胀、棉球致肉芽肿、羧甲基纤维素致局部白细胞数增多的影响。结果复方杠板归胶囊能显著抑制小鼠耳肿胀、减轻小鼠腹腔毛细血管通透性；显著抑制大鼠足肿胀以及棉球肉芽组织形成，减少羧甲基纤维素致大鼠局部白细胞数增多（P〈0．01，P〈0．05）。结论复方杠板归胶囊具有较强的抗炎作用。本研究为复方杠板归胶囊的临床应用提供了实验依据。大蒜素对人脑胶质瘤U251细胞侵袭与迁移的影响及其机制探讨
摘要：目的探讨大蒜素对人脑胶质瘤U251细胞体外迁移侵袭作用的影响及可能机制，为大蒜素在脑胶质瘤治疗中的应用提供依据。方法用高度纯化的大蒜素制剂处理人脑胶质瘤U251细胞（大蒜素组），应用划痕试验、Tran—swell迁移与侵袭试验、Westernblotting法测定药物处理后U251细胞迁移、侵袭能力变化以及侵袭相关蛋白MMP2、MMP9表达；并与未做干预的对照组比较。结果大蒜素能明显抑制细胞生长，抑制细胞侵袭与迁移，呈量效和时效关系（P〈0．001），大蒜素组较对照组明显增加（P〈0．001），有浓度依赖性。结论大蒜素能抑制U251细胞侵袭与迁移，该抑制作用具有时间、浓度依赖性。其作用机制可能为下调人脑胶质瘤U251细胞MMP2、MMP9表达。双环醇对肾间质纤维化大鼠肾组织Drp-1表达的影响
摘要：目的探讨双环醇对单侧输尿管梗阻大鼠。肾问质纤维化中发动蛋白-1（Drp-1）表达的影响及对肾脏的保护作用。方法81只SD大鼠，采用UUO致单侧肾间质纤维化模型，随机分假手术组、模型组、治疗组各27只。治疗组予双环醇灌胃治疗；假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。于术后7、14、21d取动脉血分离血清测定肌酐和尿素氮水平，观察肾功能变化；取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色，观察肾脏病理学变化；采用免疫组化方法检测肾组织Drp-1表达。结果治疗组血清肌酐和尿素氮水平明显低于模型组（P〈0．01）；。肾小管间质损伤评分和肾间质纤维化相对面积及肾组织Drp-1蛋白表达均显著低于模型组（P均〈0．05）。结论Drp-1参与了大鼠肾问质纤维化的病理过程；双环醇可通过抑制Drp-1而延缓肾间质纤维化的进展。文后参考文献的著录方法
摘要：按GB／T7714—2005《文后参考文献著录规划》采用顺序编码制著录，依照其在文中出现的先后顺序用阿拉伯数字加方括号标出。参考文献中的作者1～3名全部列出，3名以上只列前3名，后加“，等”或其他与之相应的文字。外文期刊名称用缩写，以《IndexMedicus》中的格式为准；中文期刊用全名。论文题目后加文献类型及标识，如专著[M]、期刊文章[J]等。每条参考文献均须著录起止页。作者必须认真核对参考文献原文，无误后将其按引用顺序（用阿拉伯数字）排列于文末。不同剂量多奈哌齐治疗血管性认知障碍的Meta分析
摘要：摘要：目的评价不同剂量多奈哌齐治疗血管性认知障碍的临床疗效。方法计算机检索PubMed、EMBASE、CochraneLibrary等外文数据库、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、中文科技期刊全文数据库及数字化期刊全文数据库等资源，并手工检索有关期刊及会议论文，搜集关于多奈哌齐治疗血管性认知障碍的随机对照试验，采用Revman5．0软件进行Meta分析。结果最终共纳入6个研究，共计2448例患者，4篇属于高质量文献（≥25分），余2篇文献质量略低（20分）。Meta分析结果显示，多奈哌齐5mg／d组及10mg／d组简易智能精神状态量表（MMSE）评分、阿尔茨海默病评估量表认知部分（ADAS—cog）评分、临床痴呆量表（CDR）评分、日常生活量表（ADL）评分均优于对照组（服用安慰剂），5mg／d组与10mg／d组差异无统计学意义。不良反应方面，10mg／d组恶心发生率高于5mg／d组。结论多奈哌齐5mg／d、10mg／d治疗血管性认知障碍可改善患者的智能精神状态水平、认知水平及日常生活能力，减轻其痴呆程度，10mg／d剂量恶心发生率高于5mg／d者。Ommaya囊置入联合放疗及化疗治疗肺腺癌囊性脑转移临床观察
摘要：目的观察Ommaya囊置入联合放化疗治疗肺腺癌囊性脑转移的有效性和安全性。方法20例肺腺癌脑转移患者，影像学检查示脑部肿瘤呈囊性变，肿瘤直径为3．8～10．0em，均采用Ommaya囊置人联合放疗及化疗治疗。对治疗前后临床症状、体力状况、影像学表现等进行比较分析。结果20例患者肿瘤缩小率为30％～95％，平均65．5％，其中明显有效（肿瘤病灶缩小率≥80％）9例，有效（肿瘤病灶缩小率介于25％～80％）10例。KPS评分为60～90分，中位评分为80分，明显高于术前（P〈0．05）。结论Ommaya囊置入联合放化疗治疗肺腺癌囊性脑转移是一种有效并相对安全的治疗方法。
