甲型流感病毒H1N1亚型HA基因的克隆及序列分析
摘要：目的克隆甲型流感病毒H1N1亚型血凝素HA基因，并对其进行序列分析。方法利用TRIzolRea．gent法提取甲型流感病毒H1N1亚型的总RNA，RT·PCR后以其cDNA为模板PCR扩增HA基因，经酶切、连接后，构建pET28a（＋）-HA重组质粒。利用生物信息学工具对HA的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果成功构建了pET28a（＋）·HA重组质粒，经序列比对，与GenBank上公布的HA基因序列同源性达到99％。结论对HA基因进行克隆及生物信息学的分析，为深入研究HA在病毒侵入细胞及抗原变异中的作用机制及后续HA抑制剂的体外筛选奠定基础。丝裂霉素水凝胶对兔晶状体摘除术后后囊浑浊的防治作用
摘要：目的评价丝裂霉素（MMC）水凝胶防治兔晶状体摘除术后后囊混浊的作用和安全性。方法将56只新西兰大白兔随机分为7组，行透明晶体囊外摘除术；其中A组为对照组，术中不注入MMC水凝胶；B～G组为治疗组，分别在囊袋内注入浓度为0．2、0．4、0．6mg／mL的MMC水凝胶0．1mL，分别作用3min及5min后吸出。结果各组术后前节炎症和角膜水肿反应显著，1周左右逐渐消失。后囊混浊发生率治疗组低于对照组（P均〈0．05），高浓度组低于低浓度组（P均〈0．05）；房水蛋白含量术后第1天、1周各治疗组高于对照组（P均〈0．05），各组间比较同浓度的长时间组（5min）高于短时间组（3min），P均〈0．05。术后1周，除B组外，其他治疗组角膜厚度均大于对照组（P均〈0．05），且作用时间越长，角膜越厚（P〈0．05）；术后个1个月，各组间角膜厚度无显著差异。术后1周、1个月角膜内皮细胞计数治疗组均低于对照组（P均〈0．05）；术后3个月各组间无差异。组织病理学和透射电镜观察显示，术后1个月角膜结构基本恢复正常，治疗组晶状体上皮细胞不同程度体积变小，细胞表面微绒毛消失。结论丝裂霉素水凝胶虽可导致轻度的角膜毒性反应和血房水屏障的破坏作用，但可显著抑制晶体上皮细胞的增生，从而有效预防晶状体摘除术后后囊混浊的发生。T—bet、GATA-3、FoxP3及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在AA发病机制中的作用
摘要：目的探讨转录因子T-bet、GATA-3和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其转录因子F0xP3在再生障碍性贫血（AA）发病机制中的作用。方法选择AA患者27例（AA组）、体检健康者25例（对照组），采用RT—PCR技术检测两组外周血单个核细胞（PBMCs）中Thl、Th2细胞及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞特异性转录因子T—bet、GATA·3、FoxP3mR-NA的表达，运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群，ELISA法检测血浆中Thl和Th2类细胞因子IFN-γ、IL-4水平。结果与对照组相比，AA组的血浆T—betmRNA相对表达量升高（P〈0．01），GATA-3与FoxP3mRNA相对表达量降低（P〈0．05，P〈0．01）；AA组外周血中CD3^＋、CD3^＋CD8^＋T细胞占淋巴细胞的百分比较对照组升高（P均〈0．05），CD3^＋CD4^＋、CD4^＋CD25^＋T细胞占淋巴细胞的百分比和c珑／C联值较对照组降低（P〈0．05或P〈0．01）；AA组血浆中IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4高于对照组（P均〈0．01）。结论AA患者存在CD4^＋CD25^＋调调节性T细胞及其特异性转录因子FoxP3mRNA表达下调，调节性T细胞的减少及由此引起免疫抑制效应不足可能是AA发生的重要原因之一。可溶性髓样细胞触发受体-1与严重多发伤后MODS的相关性
摘要：目的探讨多发伤患者外周血血清降钙素原（PCT）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）和可溶性髓样细胞触发受体-1（sTREM-1）与严重多发伤后多器官功能障碍综合征（MODS）的相关性。方法93例多发伤患者按治疗过程中有无发生MODS分为MODS组和非MODS组。MODS患者按照其预后分为死亡组与存活组。采用ELISA法测定伤后及20例健康对照者的血清PCT、TNF-α及sTRME-1的含量，并应用受试者工作特征曲线（ROC曲线）进行统计学分析。结果与对照组相比，多发伤患者血清PCT、TNF-α和sTREM-1伤后均出现不同程度的升高（P〈0．01）；MODS组与非MODS组比较，各项指标均有统计学差异（P〈0．01）。PCT、TNF-α和sTREM-1的ROC曲线下面积分别为0．904、0．687和0．907。死亡组与存活组比较，PCT和sTREM—1水平存在统计学差异（P〈0．01），而TNF—α含量无差异（P〉0．05）。PCT、TNF-α和sTREM-1诊断MODS的灵敏度分别为80．0％、77．1％、82．9％，特异性分别为79．3％、60．3％、87．9％。sTREM-1与PCT、TNF-α正相关（r分别为0．907、0．515，P均〈0．05）。结论sTREM-1对严重多发伤后预警MODS的诊断性能优于PCT和TNF-α，且对MODS的患者预后具有较好的预测价值。激动GHB受体对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨
摘要：目的观察激动γ-羟基丁酸（GHB）受体对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，并探讨其机制。方法成年清洁级雄性SD大鼠，体质量（250±20）g，随机分为5组，假手术组（sham组）、缺血再灌注组（IfR组）及NCS-356（GHB受体选择性激动剂）160、320、640μg/kg剂量组，采用改良的Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，分别进行损伤大鼠神经功能评分（5分制评分法），Westernblot法检测Gi蛋白。结果与模型组比较，640μg/kgNCS-356组能降低神经功能评分（P〈0．05），同时320、640μg／kgNCS-356剂量组能升高大鼠脑缺血皮层神经元细胞内Gi蛋白（P〈0．05）水平。结论激动GHB受体对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，其机制可能与升高Gi蛋白水平有关。高压氧对颅脑损伤患者认知功能的影响
摘要：目的探讨高压氧干预治疗下，不同治疗时间段颅脑损伤患者认知功能变化，对其疗效进行评定。方法重型颅脑损伤并发认知障碍患者60例，随机分为高压氧组（30例）和常规治疗组（30例），高压氧组在常规治疗基础上，正规高压氧治疗0、12、24、40、60d时，由独立的心理医师，对比改良长谷川痴呆量表（HDS）和临床痴呆量表（CDR）评分变化。结果高压氧组有效率96．7％，治愈率66．7％；对照组有效率90％，治愈率40％。治疗第12天起，高压氧组HDS评分高于对照组评分，治疗第24、40天差异最显著；治疗第12天起，高压氧组CDR评分均低于对照组评分，治疗第12～40天差异明显。HDS评分中定向力、记忆力、计算力及近期记忆经过SPSS检验比较均有显著统计学差异（P〈0．01），而日常知识项比较差异不显著（P〉0．05）。结论高压氧对颅脑损伤患者的定向力、记忆力、计算力及近期记忆均有康复作用，其中近期记忆改善最为明显，对长期记忆（13常知识）效果不明显。超纯透析对维持性血液透析患者炎症状态及营养状况的影响
摘要：目的探讨超纯透析对维持性血液透析（MHD）患者血BUN、Scr、UA、Alb、Hb、Hct、CRP、β2-MG、Ca、P、iPTH水平的影响。方法选择本院52例血液透析（HD）患者，改造前使用一级反渗透及自配透析液，透析时间〉1年，检测其上述观察指标。随机分为两组，每组26例，纯水组：改造后使用二级反渗透系统，并使用厂家专供A、B透析浓缩液；超纯组：纯水透析的基础上，透析机后安置EF-020微粒子过滤器获取超纯透析液。跟踪观察纯水组及超纯组治疗3、6个月后各观察指标的变化。结果专供透析液及超纯透析液细菌菌落数少于自配透析液（P〈0．01）。纯水组及超纯组分别治疗3个月后，血Alb、Hb、Hct水平提高（P〈0．01），3、6个月治疗组间比较无统计学差异（P〉0．05）；血BUN、Scr、UA、Ca、P、iPTH及β2-MG水平无统计学差异（P〉0．05）。提高反渗水及透析液纯度后，CRP水平降低明显（P〈0．01）；3、6个月组间比较均有统计学差异（P〈0．01，P〈0．05）。纯水组及超纯组治疗6个月后，上述观察指标水平比较均无统计学差异（P〉0．05）。结论提高透析用水和透析液纯度可减少透析过程中的单核细胞的活化，降低促炎症介质的释放，并能持续降低炎症状态，低蛋白血症及贫血状况均有明显改善，有效提高透析质量。基因芯片技术在常见肠道致病菌感染检测中的应用
摘要：目的建立一种运用PCR结合基因芯片技术检测和鉴定引起腹泻的常见肠道致病菌方法。方法根据生物信息学技术以细菌16SrDNA和23SrDNA序列设计各细菌的特异型探针和引物，在基因芯片制备基础上，通过对靶基因的扩增、杂交和对杂交结果的分析，对常见肠道致病菌的检测和鉴定效果进行评价，同时对临床采集100份腹泻患者粪便标本通过细菌培养结果，比较基因芯片技术的灵敏性和特异性。结果100份临床粪便标本中，采用基因芯片技术共检出50份（50％）携带肠道致病菌；细菌培养鉴定出47份（47％）携带肠道致病菌，其中42份基因芯片与细菌培养结果一致，准确率为79．25％，与基因芯片比较差异无统计学意义（x^2=5．28，P〉0．05）。结论我们所建立的基因芯片系统具有高通量和高准确性，可以作为临床鉴定细菌的一个重要的工具，而且适用于流行病学调查研究。扁桃体鳞状细胞癌的治疗
摘要：目的分析扁桃体鳞状细胞癌不同治疗方案对患者生存率的影响，以期明确影响预后的因素并指导临床治疗。方法回顾性分析1990～2011年南京医科大学附属淮安第一医院耳鼻咽喉头颈外科和头颈放疗科治疗的经病理证实、无远处转移的扁桃体鳞癌40例患者临床资料。采用Kaplan．Meier法和Log—rank检验进行生存分析，多因素分析采用Cox回归模型。结果40例扁桃体鳞癌患者5年生存率为41．7％，Ⅰ～Ⅱ期5年生存率为74．2％，Ⅲ期为26．1％，IV期为0％，差异有统计学意义（r=4．258，P〈0．05）。单纯放疗组、综合治疗组（手术联合放化疗组和化疗联合放疗组）5年生存率分别为32．4％和30．2％，差异无统计学意义（r=0．409，P〉0．05）。有、无淋巴转移患者5年生存率分别为62．2％和8．4％，差异有统计学意义（r=9．987，P〈0．05）。Cox多因素分析显示TNM分期、病理分化和颈淋巴结是否转移为影响预后的独立危险因素（P〈0．05）。结论Ⅰ-Ⅱ期扁桃体鳞癌的治疗倾向于单纯放疗，Ⅲ～Ⅳ期扁桃体鳞癌的治疗模式和疗效仍需进一步研究。TNM分期、病理分化和淋巴结是否转移为影响预后的独立危险因素。内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用
摘要：目的探讨内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用和机制。方法雄性sD大鼠随机分为3组：链脲佐菌素（STZ）致糖尿病大鼠6周、12周模型组及正常对照组。采用腹腔注射STZ60mg／kg制备大鼠糖尿病模型，分批处死，处死前测量大鼠24h尿蛋白排泄量，取每只大鼠右肾用免疫组织化学法及半定量RT-PCR方法检测肾脏组织中GRP78、Caspasel2蛋白及mRNA的表达；应用TUNNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。结果GRP78、Caspasel2在正常大鼠肾脏组织中少量表达，主要分布于肾脏内肾小球及肾小管细胞，糖尿病6周组GRP78、Caspasel2在肾脏肾小球及肾小管细胞的表达量升高，糖尿病12周组表达量更高。结论内质网应激参与了糖尿病肾病的发病机制，肾脏细胞的内质网应激能力及相应的细胞凋亡随糖尿病病程延长而增强。RNAi沉默Notch1基因对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用
摘要：目的呆用RNA干扰（RNAi）技术抑制Notchl基因的表达，观察阻断Notch信号通路对人骨肉瘤细胞MG63的促凋亡作用及其机制。方法构建mNotch．1短发夹状RNA（mNotch-1shRNA），利用MTY增殖试验分析mNotch-1shRNA转染前及转染24、48、72h时MG63细胞的增殖情况；通过AnnexinV法染色和流式细胞术检测细胞凋亡率及与mNotch-1shRNA作用时间的关系；Westernblot检测细胞中Notchl、Bcl-2及Bax蛋白表达的变化。结果与对照组相比，mNotch-1shRNA转染MG63细胞后，细胞增殖水平明显下降。AnnexinV染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高。Westernblot结果分析显示mNotch．1shRNA转染MG63细胞后，细胞中Notchl基因表达明显降低，并且显著抑制Bcl-2基因和上调Bax基因的表达。结论RNAi沉默Notchl基因能明显抑制人MG63细胞增殖，促进细胞凋亡；其作用机制可能与调控Bcl-2及Bax蛋白表达有关。宫颈鳞癌组织中WWOX与Bcl-xl基因的表达及其意义
摘要：目的研究宫颈鳞癌中WWOX与Bcl-xl基因的蛋白表达及其相关性。方法应用免疫组化sP法检测50例宫颈鳞癌、10例宫颈上皮内瘤变、10例正常宫颈组织中WWOX与Bcl—xl蛋白的表达情况。结果WWOX、Bcl-xl在宫颈鳞癌中阳性表达率与正常宫颈及宫颈上皮内瘤变相比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。WWOX蛋白、Bcl-xl蛋白的表达与宫颈鳞癌的临床分期、病理学分级及淋巴转移均有关（P均〈0．05）；在同一宫颈鳞癌组织中WWOX蛋白表达与Bcl—xl蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论WWOX在宫颈鳞癌组织中低表达，Bcl—xl基因在宫颈鳞癌组织中高表达，二者可能在宫颈鳞癌的发生和发展中起重要作用。超长促排卵方案在子宫腺肌病患者IVF-ET治疗中的应用
摘要：目的观察超长促排卵方案在子宫腺肌病不孕症患者体外受精一胚胎移植（IVF—ET）治疗中的应用效果。方法回顾性分析67例子宫腺肌病患者的98个IVF周期，根据控制性超促排卵（COH）方案分为短方案组（31个周期）、长方案组（35个周期）和超长方案组（32个周期），对IVF助孕疗效进行分析。结果三组间注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）日血E：值、获卵数、受精率、优质胚胎数、平均胚胎移植数、周期取消率比较，P均〉0．05；超长方案组子宫体积在应用长效GnRH—a后明显缩小（P〈0．05），超长方案组促性腺激素（Gn）天数、Gn总量、移植日子宫内膜厚度、临床妊娠率（53．3％）高于短方案（26．7％）及长方案组（29．4％），P均〈0．05。结论超长促排卵方案可获得与短方案和长方案同样的获卵数、优质胚胎数，并可提高子宫腺肌病患者IVF-ET的临床妊娠率，降低早期流产率。输尿管子宫内膜异位症的手术方式探讨
摘要：目的探讨治疗输尿管子宫内膜异位症的手术方式。方法回顾分析2002～2011年病理证实的23例输尿管子宫内膜异位症患者的临床诊治资料。结果23例患者中，3行输尿管粘连松解术，6例行输尿管狭窄段切除＋输尿管膀胱再吻合术，12例行输尿管狭窄段切除＋输尿管端端吻合术，2例行输尿管镜下病损电切术。术后病理诊断均为子宫内膜异位症。8例接受了术后激素辅助治疗。术后随访成功的20例患者均未出现复发。结论输尿管子宫内膜异位症是一种临床少见的疾病。对于伴有肾积水的患者，治疗上以手术治疗为主，内分泌治疗为辅。对于轻度的输尿管梗阻患者，推荐行输尿管粘连松解术治疗；对于中重度输尿管梗阻患者，推荐行输尿管狭窄段切除的手术治疗。新疆哈萨克族胃息肉内镜观察、病理学特征及其与胃癌的关系
摘要：目的分析哈萨克族胃息肉的内镜下观察、病理学特点及其与胃癌的关系。方法对在新疆生产建设兵团内窥镜中心行电子胃镜检查的哈萨克族927例患者中发现的胃息肉进行内镜下观察及病理学检查。结果检测出患胃息肉者286例，检出率为30．85％。山田I型及山田Ⅱ型为36．71％及30．07％，多发息肉105例（36．79％），单发息肉181例（63．21％）。30例随访观察1年后息肉复发9例（29．62％）。结论哈萨克族胃息肉的发生率较高，可能是导致哈萨克族胃癌高发的因素之一，胃镜下治疗是预防息肉癌变的有效方法。地屈孕酮治疗反复性早期流产效果观察
摘要：目的观察地屈孕酮治疗反复性早期流产的效果。方法选择反复性早期流产患者43例，均前次妊娠用黄体酮保胎治疗失败，再次妊娠后采用地屈孕酮治疗。结果本组治疗过程中，6例分别于孕第41—69天出现少量阴道流血，经地屈孕酮加量治疗后，4例继续妊娠，2例分别于孕第57、82天阴道流血增多，B超胎心博动消失，行流产术。其余33例均顺利分娩，新生儿均未发现异常。治疗过程中，患者均未出现明显不良反应。结论地屈孕酮治疗反复性早期流产效果较好。磁敏感加权成像在大面积脑梗死出血性转化中的临床应用价值
摘要：目的分析大面积脑梗死出血性转化（HT）在磁共振磁敏感加权成像（swi）与CT检查的影像学表现，探讨SWI在HT检查中的应用价值。方法收集经临床与影像检查确诊的HT患者28例。分析其在SWI扫描和CT扫描的影像学表现。比较两种检查方法对HT的检出率。结合ABCs测量法对出血面积进行测量，比较出血面积在不同检查方法中的大小。结果28例HT病例中，SWI检出28例（检出率为100％），CT检出18例（检出率为64．29％）。共同检出的18例病例中出血面积：SWI序列〉CT检查16例，SWI序列=CT检查2例。结论SWI序列扫描对于HT的检出明显高于CT扫描；SWI序列在对出血灶面积的判断上较CT扫描准确性高。SWI检查能够影响临床的治疗方案，可以指导临床对HT预后的判断，应作为脑梗死检查的常规序列来应用。严重脓毒症患者循环功能指标与血管外肺水指数的相关性探讨
摘要：目的探讨严重脓毒症患者循环功能指标与血管外肺水指数（ELWI）的关系，寻找降低ELWI的方法。方法回顾性分析2010年3月～2012年4月入住我院ICU的严重脓毒症患者33例，所有患者机械通气，应用PiCCO技术监测心脏指数（cI）、胸腔内血容量指数（ITBI）、ELWI、系统血管阻力指数（SVRI），每8h监测1次。以ITBI〉850mL／m2作为容量正常的标准，收集所有符合标准的患者数据共361组，分析ELWI与其他参数的相关性。根据CI是否正常分为心功能低下组和心功能正常组，比较两组间ITBI、ELWI、SVRI的差异性及相关性，并进一步分析ITBI和SVRI的变化对心功能的影响。结果心功能未分组前，ELWI只与容量参数ITBI有相关性，分组之后，心功能低下组中ELWI与ITBI、SVRI无相关性；心功能正常组中，ELWI与ITBI呈正相关，与SVRI呈负相关。SVRI及ITBI的变化对心功能有一定的影响，SVRI与CI呈负相关，ITBI在正常范围时，与CI呈正相关；而ITBI过量时，与CI无相关性。结论在严重脓毒症患者中，心功能的差异性不但影响着循环功能指标的变化，也与ELWI的变化明显相关。除了液体管理之外，早期改善心功能并积极应用血管活性药物，有利于降低血管外肺水。
