BAG-1基因沉默对非小细胞肺癌放射敏感性的影响及机制
摘要：目的探讨BAG-1基因与非小细胞肺癌放射敏感性的关系，为非小细胞肺癌个体化治疗提供理论依据。方法对A549肺腺癌细胞、H460大细胞癌及NCL-H520鳞癌细胞三株非小细胞肺癌细胞株及人胚肾细胞株HEK293行细胞放射敏感性试验，采用Western blot法检测各细胞株中BAG-1蛋白表达情况。选择其中对放射线相对较抗拒、BAG-1蛋白表达最高的A549细胞株，构建干扰载体pGCsi-BAG-1并筛选BAG-1基因沉默细胞株，用shRNA-2转染，酶标仪检测细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞凋亡率，放射敏感性试验观察细胞对放射线的敏感性。结果shRNA-2转染的细胞株生长受到抑制，且随时间延长抑制作用明显，而阴性对照质粒转染的A549细胞株生长无明显变化；6Gy射线照射后24h，shRNA-2转染细胞凋亡率为（49．6±4．23）％，未转染的A549细胞为（15．3±2．11）％，阴性对照质粒转染细胞为（14．8±3．55）％，shRNA-2转染细胞凋亡率较未转染细胞增加了3．2倍（P〈0．01），而阴性对照转染细胞与未转染细胞间相比差异无统计学意义；亲本A549细胞和阴性对照转染细胞之间的放射敏感性无差异（P〉0．05）。而shRNA-2转染细胞的放射敏感性明显增加，与前二者比较差异有显著性（P〈0．05）。结论BAG-1基因沉默可增强非小细胞肺癌放射敏感性，可能机制为BAG-1基因沉默后抑制细胞生长，抗凋亡作用减弱，细胞内BAG-1分布发生改变，细胞对射线更敏感。百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立
摘要：目的探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法。方法以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因，设计探针和引物，构建质粒标准品；建立FQ-PCR体系，优化反应条件，并进行方法学评价。结果成功构建了重组质粒pCR2．1-BP283；建立了检测BP283基因片段的FQ—PCR方法：标准曲线相关系数为0．998，最低检测浓度为10^2copies／μL，对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线，批内及批间变异系数均〈4％。结论FQ—PCR方法可成功检测百日咳鲍特菌BP283基因，该方法具有敏感性好、特异性高及重复性好等优点。Maspin在非小细胞肺癌组织中的表达及意义
摘要：目的探讨Maspin在非小细胞肺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测99份非小细胞肺癌组织中Maspin蛋白的表达情况，分析其临床病理意义。结果肺癌组织中Maspin的阳性表达率显著低于正常肺组织（P〈0．05）；Maspin表达与肺癌病理类型、组织学分化程度、淋巴结转移及临床分期有关。Cox回归生存分析显示Maspin蛋白表达及临床分期是非小细胞肺癌的独立预后影响因素（P〈0．05）。结论Maspin蛋白表达在非小细胞肺癌的侵袭、转移过程中起重要作用，Maspin蛋白可作为预测非小细胞肺癌预后的参考指标。非小细胞肺癌中CCR7和CD62L表达及与淋巴结转移的关系
摘要：目的探讨CC趋化因子受体7（CCR7）和L-选择素（CD62L）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化法检测80份NSCLC癌组织和20份癌旁正常肺组织标本中CCR7和CD62L表达，比较二者在淋巴结转移者与无淋巴结转移者中的阳性表达率。结果NSCLC癌组织中CCR7和CD62L表达阳性率均明显高于癌旁正常肺组织（P均〈0．05），且CCR7表达与CD62L表达有明显相关性（P〈0．05）。有淋巴结转移者CCR7和CD62L表达阳性率均明显高于无淋巴结转移者（P均〈0．05）。结论NSCLC癌组织中CCR7和CD62L表达均上调，二者可能共同参与了NSCLC的淋巴结转移过程。“做”与“作”的推荐用法
下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌分离株氨基糖苷类耐药相关基因分析
摘要：目的探讨分离自下呼吸道感染患者的氨基糖苷类耐药铜绿假单胞菌的耐药机制。方法从下呼吸道感染患者痰液中分离出52株对氨基糖苷类耐药的铜绿假单胞菌，PCR法检测6种氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因，并检测其中泛耐药菌的6种16SrRNA甲基化酶基因（以下简称甲基化酶基因）。对阳性产物测序加以证实。结果52株铜绿假单胞菌中检出4种AMEs基因[aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰb、aac（6′）-Ⅱ和ant（2″）-Ⅰ]，AMEs基因总检出率为92．3％。泛耐药菌中检出1种甲基化酶基因（rmtB）。16株高水平泛耐药菌中rmtB基因的检出率为81．3％。结论分离自下呼吸道感染患者的氨基糖苷类耐药铜绿假单胞菌中AMEs基因携带率高，其对氨基糖苷类耐药与aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ib、aac（6′）-Ⅱ和ant（2″）-Ⅰ有关；对氨基糖苷类高水平泛耐药主要与甲基化酶基因rmtB有关。异丙酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机制
摘要：目的探讨异丙酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及可能机制。方法将25只雄性SD大鼠随机分为5组各5只，N组尾静脉注射0．9％氯化钠注射液10mL；另四组注射脂多糖（LPS）10mg／kg，制作脓毒症急性肺损伤模型。制模后L组不用药，D组注射地塞米松0．1mg／kg；P组注射异丙酚5mg／kg，继以异丙酚5mg／（kg·h）的速度持续缓慢静脉泵注4h；PD组注射地塞米松0．1mg／kg和异丙酚5mg／kg，继以异丙酚5mg／（kg·h）的速度静脉泵注至4h。各组均于造模后4h麻醉处死，行动脉血气分析，测定肺组织湿／干重量比值（W／D），RT—PCR法检测肺组织水通道蛋白1（AQP1）mRNA表达水平。结果与L组比较，D、P、PD组肺组织W／D值明显降低，AQP1 mRNA表达水平明显升高，动脉血气指标明显改善；PD组各指标较D、P组改善更明显。结论异丙酚及地塞米松对早期脓毒症大鼠急性肺损伤有协同保护作用，其机制可能为上调肺毛细血管内皮AQP1 mRNA表达水平，提高肺间质内水肿液的跨内皮转运速率。高频震荡通气治疗先天性心脏病术后重症ARDS 32例效果观察
摘要：目的探讨高频震荡通气（HFOV）对小儿心脏手术后重症ARDS的治疗效果。方法对32例心脏手术后常频通气（CMV）治疗无效的重症ARDS患儿行HFOV治疗，设置相应的参数并行氧合、通气管理，每次吸痰后行肺复张。观察治疗前后血气指标变化、HFOV治疗时间、肺复张期间循环指标变化、整体治疗期间并发症发生情况及患儿存活情况。结果HFOV治疗后通气及气体交换在较短的时间内改善，12—48h血气相关指标PaO2、PaCO2、吸入氧浓度（FiO2）、氧合指数（PaO2／FiO2）均明显改善且稳定。HFOV治疗时间43—238（128．5±67．49）h，肺复张期间循环指标未出现异常变化，末梢血氧饱和度快速恢复至吸痰前水平，呼吸机的吸氧浓度快速降低。整体治疗期间出现气胸9例，均安置胸腔闭式引流。本组患儿存活21例（65．6％），死亡11例。结论HFOV对CMV治疗无效的重症ARDS能在较短时间内改善通气及气体交换，可作为小儿心脏术后重症ARDS的重要抢救措施。苦参碱对人肺腺癌A549细胞增殖及HIF-10α、VEGF表达的影响
摘要：目的探讨苦参碱对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及作用机制。方法将0、5、50、100、250、500μg／mL质量浓度的苦参碱分别作用于体外培养的处于对数生长期的A549细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，RT-PCR法检测细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）mRNA和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达。结果苦参碱呈时间、剂量依赖性抑制A549细胞生长（P〈0．05）；呈时间、剂量依赖性降低HIF-1α、VEGFmRNA表达（P〈0．05）；HIF-1α和VEGF之间表达呈正相关（r=0．994，P〈0．01）。结论苦参碱能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖，其机制可能为降低HIF-1α和VEGF表达，从而抑制肺癌组织血管生成。医学论文中“隔”与“膈”、“瘘”与“漏”的正确使用
摘要：“隔”与“膈” 隔《现代汉语词典》释义1对其解释为“遮断；阻隔。如隔河相望、隔着一重山等”。膈《现代汉语词典》的解释为“人或哺乳动物胸腔和腹腔之间的膜状肌肉。收缩时胸腔扩大，松弛时胸腔缩小。旧称横膈膜”。人鼻咽癌放射抗拒移植瘤模型的建立
摘要：目的建立稳定的人鼻咽癌放射抗拒移植瘤模型并观察其生长特性，为解决鼻咽癌放射抗拒提供良好的动物模型。方法将人鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R、人鼻咽癌细胞CNE-2分别注入裸鼠左右后肢皮下。移植瘤生长后，隔日测量肿瘤直径，计算肿瘤体积，绘制移植瘤体积生长曲线。肿瘤直径0．8—1cm时以X线隔日照射移植瘤，1600Gy分4次。计算移植瘤体积倍增时间和体积增长率。照射后2周取出移植瘤行常规病理检查，免疫组化检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果CNE-2R、CNE-2细胞的皮下成瘤率均为100％，建模成功。相对于CNE-2移植瘤，CNE-2R移植瘤生长速度慢，生长受照射抑制不明显；PCNA表达较低。结论相对于CNE-2移植瘤，CNE-2R移植瘤具有更强的放射抗拒性，CNE-2R裸鼠移植瘤模型是进一步研究鼻咽癌放射抗拒的有力工具。关于医学名词与统计学符号的应用说明
摘要：医学名词要以1989年及以后由全国自然科学名词审定委员会审定、公布，科学出版社出版的《医学名词》和相关科学的名词为准，暂未公布者仍以人民卫生出版社出版的《英汉医学词汇》为准。中文药物名称应使用1995年药典（法定药物）或卫生部药典委员会编辑的《药名词汇》（非法定药物）中的名称，英文药物名称则采用国际非专利药名，不用商品名。热刺激对体外培养的血管内皮细胞损伤及IL-6、TNF—α释放的影响
摘要：目的探讨中暑发生及发展的机制。方法取对数生长期人脐静脉血管内皮细胞HUEVC，对照组将细胞置于标准37℃、5％CO2浓度培养箱中，39℃组、41℃组、43℃组分别将细胞置于39℃、41℃、43℃细胞培养箱中，均分别培养0、1、3、5、7h。采用CCK-8法计算细胞存活率；撤除热刺激，各组更换100μL／孔完全培养基，继续培养24h，计算细胞增殖率。采用ELISA法测定热刺激后1h各组血浆IL-6和TNF-α水平。结果与对照组比较，39℃、41℃、43℃组各个时点细胞存活率均下降（P均〈0．001），并呈时间及温度依赖关系。撤除热刺激、培养24h时，与对照组比较，39℃组7h及41℃组和43℃组各时点细胞增殖率均显著下降（P均〈0．001），并呈时间及温度依赖关系。39℃、41℃、43℃组IL-6和TNF-α水平均明显高于对照组（P均〈0．001），41℃组和43℃组较39℃组显著上升（P〈0．01），43℃组和41℃组无显著性差异。结论热刺激对血管内皮细胞具有细胞毒效应，可抑制血管内皮细胞增殖，并促进细胞因子IL-6和TNF-α的释放，且呈温度及时间依赖性。本研究结果为中暑的发生及发展机制研究奠定了实验基础。一些常用词汇可直接用缩写
脂肪细胞AMPK活性对NF-κΒ及炎症因子的影响
摘要：目的探讨肥胖启动炎症的分子机制。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞，取诱导分化第8天的脂肪细胞，分为空白对照组、激动剂组和抑制剂组。空白对照组将高糖DMEM培养基作用于诱导分化的脂肪细胞；激动剂组将含0．5mmol／L5氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸（AICAR）的高糖DMEM培养基作用于脂肪细胞1h；抑制剂组将含10μmol／L Compound C的高糖DMEM培养基作用于脂肪细胞1h，收集蛋白及培养液于-80℃保存。Western blot法检测磷酸化AMPK（p-AMPK）及p-NF—κB表达。酶联免疫吸附试验法测定IL-6与TNF-α水平。结果与空白对照组比较，激动剂组p-AMPK蛋白表达明显升高，p-NF—κB蛋白表达明显降低；而抑制剂组p-AMPK蛋白表达明显降低，p-NF-κB蛋白表达明显升高，P均〈0．05。与空白对照组比较，激动剂组TNF—α与IL-6表达均明显降低，而抑制剂组TNF—α与IL-6表达均明显升高，P均〈0．05。结论AMPK可抑制NF—κB信号及炎痱因子的分泌．肥胖导致炎症可能与肥胖时AMPK活性降低引发NF-κB信号活化增强有关。山东汉族骨髓供者HLA-A＊02组基因多态性DNA测序分型研究
摘要：目的研究山东汉族骨髓供者HLA—A＊02等位基因的分布特征，探讨其可能对临床供体选择的影响。方法采用聚合酶链反应-碱基序列直接测序（PCR—SBT）方法对随机抽取的750例中华骨髓库山东分库内山东汉族骨髓供者血样进行HLA—A＊02位点DNA测序分析。结果750例样本HLA—A的基因分布中HLA-A＊02基因频率为0．288。共检出6种HLA—A＊02基因，分属3种血清学特异性，其中以A＊0201和A＊0206为主，基因频率分别为0．137和0．066，累计构成比占全部A＊02的70．53％；以A＊0210所占构成比最小，基因频率为0．002。363例HLA—A＊02阳性样本的高分辨分型结果中A＊0201A＊1101分型结果最为常见。山东汉族HLA—A＊02等位基因的总体分布格局与香港、四川和台湾人群存在明显差异。结论本研究首次获得了山东汉族样本高分辨水平HLA—A＊02基因多态性分布特征；本研究结果有助于为临床患者寻找合适供者，并为移植免疫及本地区群体遗传学等方面的研究提供重要依据。常压吸氧对MCAO再灌注模型鼠神经再生的影响及机制
摘要：目的探讨常压吸氧治疗缺血性中风的效果及机制。方法取80只雄性SD大鼠，随机分成假手术组、模型组、低氧组及高氧组各20只。参照Longa改良线栓法制作中动脉闭塞（MCAO）再灌注模型，假手术组仅暴露相关动脉，不予结扎；造模后低氧组及高氧组均吸氧1h，氧浓度分别为30％、70％，清醒后四组均行神经功能缺损评分，计为第1天，之后低氧组及高氧组每天吸氧1h，共7d。观察四组行为学改变，免疫组织化学法观察细胞形态学变化并测定巢蛋白（Nestin）、低氧诱导因子（HIF-1）表达。结果低氧组、高氧组中风偏瘫症状明显减轻，Nestin蛋白表达明显升高，HIF-1表达明显降低。结论吸氧可促进MCAO再灌注模型鼠缺血半影区神经再生，其机制可能与Nestin蛋白表达升高、HIF-1降低有关。胰岛素产生细胞微囊化后的活力观察
摘要：目的观察胰岛素产生细胞经微囊化后活力变化，为糖尿病的治疗寻找可行方案。方法采用贴壁法获得纯化的BM-MSCs。制备RPE进行诱导分化，同时制备微囊并将诱导后的细胞包裹。观察细胞的形态并进行胰岛素分泌能力检测。结果经微囊包裹后的细胞呈聚集状态，并且培养一段时间后未发现微囊破裂、变形、囊内细胞溢出的现象。功能学检测结果显示，BM—MSCs不分泌胰岛素，未微囊化的IPCs和微囊化的IPCs均具有分泌胰岛素功能，且微囊不影响胰岛素的释放。结论胰岛素产生细胞经微囊化后活性依然良好，且RPE可诱导BM-MSCs分化为IPCs，此为糖尿病的治疗提供了新思路。
