骨髓增生异常综合征的免疫表型和SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因表达
摘要：目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）特征性免疫表型,SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因表达程度,及其与临床病情进展的关系。方法抽取50例MDS患者骨髓细胞,用流式细胞学技术检测免疫表型;抽取单个核细胞,用RT-PCR方法检测SURVIVIN、P15INK4B、TRF1基因mRNA表达程度。结果与对照组相比,MDS患者骨髓细胞原始群CD7和CD34表达增多;粒细胞群CD34表达增多,CD13、CD33、CD11b表达下降;单核细胞表达CD117和CD34。与对照组相比,MDS患者骨髓单个核细胞SURVIVIN和TRF1基因mRNA表达增加,P15INK4B基因mR-NA表达下降（P均〈0.05）。从低危组到高危组,SURVIVIN和TRF1基因mRNA表达增加,P15INK4B基因mRNA表达下降（P均〈0.05）。结论 MDS免疫表型有其特征性,SURVIVIN、P15INK4B和TRF1基因表达可能与其发病进展有关。低危骨髓增生异常综合征免疫表型分析
摘要：目的探讨低危骨髓增生异常综合征（MDS）分型诊断及鉴别诊断的临床意义。方法选用多种单克隆抗体,应用直接免疫荧光流式细胞术CD45/SSC设门提取骨髓的原始细胞对27例低危MDS患者进行免疫表型检测,并与对照组及再生障碍性贫血（AA）组进行比较分析。结果与对照组、AA组比较,低危MDS患者CD34＋表达明显增高（P均〈0.05）,各系免疫表型多重表达异常发生率增高。结论 MDS骨髓原始细胞免疫异常表型检测有利于MDS的诊断和鉴别诊断;流式细胞术可检测到MDS免疫表型的微小变化,比细胞遗传学检测更敏感。肺炎支原体感染合并过敏性紫癜24例临床分析
摘要：肺炎支原体（MP）是近年来小儿呼吸道感染的常见病原微生物,不但可以引起呼吸道疾病,而且可引起呼吸道之外的其他器官的病变。2007年1月～2010年12月,我院收治MP感染合并过敏性紫癜患儿24例。现报告如下。临床资料：本文24例,男14例、女10例,年龄3～15岁。呼吸道症状：咽部疼痛、不适16例,咳嗽、咳痰16例（11例为阵发性、痉挛性咳嗽）,闷喘、呼吸困难9例,发热12例（体温37.5～39℃）,两肺可闻及干湿性啰音9例。急性髓细胞白血病患者NGF及p75NTR测定的临床意义
摘要：目的探讨急性髓细胞白血病（AML）患者神经生长因子（NGF）及其低亲和性NGF受体（p75NTR）表达及临床意义。方法运用ELISA测定24例AML患者血清NGF水平,流式细胞术测定骨髓白血病细胞群p75NTR的表达水平;同时选择15例健康者作为对照组。结果①AML患者血清NGF水平与对照组比较明显升高（P〈0.05）,骨髓白血病细胞群表面p75NTR表达水平较对照组明显降低（P〈0.05）。②AML完全缓解（CR）者化疗前p75NTR较未缓解（NR）者明显高表达（P〈0.05）,NGF变化不明显（P〉0.05）。NR者化疗后NGF和p75NTR表达水平与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）,且p75NTR较CR者明显低表达（P〈0.05）。③AML患者NGF以及p75NTR高表达和低表达3年总体生存率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 AML患者血清NGF高水平以及骨髓白血病细胞群p75NTR低表达可能参与AML发生发展,且可能是判断近期疗效的有效指标。硫酸镁治疗重症哮喘患儿38例疗效观察
摘要：2005～2008年,我院采用硫酸镁治疗重症哮喘患儿38例取得较好疗效。现报告如下。临床资料：选取我院收治的重症哮喘患儿76例,均符合中华医学会儿科学分会呼吸组2003年制定的诊断标准,依据哮喘急性发作期病情严重程度的分级,均属于重症哮喘。其中男40例、女36例,年龄2～10岁。临床表现均有呼吸急促、口周发绀、烦躁、大汗淋漓、三凹征、心率增快、双肺均可闻及散在响亮哮鸣音。Allo-PBSCT患者CD4＋CD25＋调节性T细胞的体外研究
摘要：目的探讨异基因外周血干细胞移植（Allo-PBSCT）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Tregs）在协同刺激信号作用下的增殖反应、与CD4＋CD25-T细胞混合淋巴细胞反应及上述两种培养细胞的细胞因子分泌情况。方法对36例Allo-PBSCT患者离体CD4＋CD25＋Tregs在抗CD3-mAbs和抗CD28-mAbs的刺激下行CD4＋CD25＋Tregs培养和CD4＋CD25＋Tregs、CD4＋CD25-T细胞混合淋巴细胞培养72 h,然后加入CCK-8溶液孵育1 h,用酶标仪检测OD450值,同时测量上述两种细胞培养上清液中IL-10、TGF-β和IFN-γ的浓度。另以7例健康者为对照组。结果 CD4＋CD25＋Tregs细胞OD450值低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）。CD4＋CD25＋Tregs与CD4＋CD25-T细胞混合OD450值也低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）。有移植物抗宿主病（GVHD）和无GVHD患者离体CD4＋CD25＋Tregs在抗CD3-mAbs和抗CD28-mAbs的共刺激下分泌的IL-10、TGF-β和IFN-γ低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.01）,有GVHD和无GVHD患者的两细胞混合组分泌的这3种细胞因子均低于CD4＋CD25-T细胞（P〈0.05）,Allo-PBSCT患者分泌细胞因子情况与对照组类似。结论有效地利用Allo-PBSCT受者外周血CD4＋CD25＋Tregs的抑制功能,则有可能降低Allo-PBSCT后GVHD的发病率。实时定量RT-PCR检测PML-RARα融合基因诊断APL的临床价值
摘要：目的探讨一步法实时定量RT-PCR（RQ-RT-PCR）技术在急性早幼粒细胞白血病（APL）患者诊断及微小残留病（MRD）检测中的临床价值。方法应用一步法RQ-RT-PCR、Taqman探针技术检测42例APL初诊患者和30例完全缓解（CR）患者骨髓PML-RARα融合基因的两种常见异构体转录本mRNA的表达。同时采用多参数流式细胞术（FCM）对部分患者骨髓MRD进行检测,并比较两种检测方法的一致性。结果①42例APL初诊患者的PML-RARα融合基因转录本中位标准拷贝数（NCN）为61%（13%～284%）,其中L型34例,S型8例。L型和S型异构体中位NCN分别为56%（28%～278%）和70%（13%～284%）,两者比较,P〉0.05;②30例APL患者经标准诱导治疗CR后PML-RARα融合基因转录本中位NCN为4.00%（0.00%～8.26%）;③一步法RQ-RT-PCR和FCM同时检测结果有较好的一致性（χ2=0.278,P=0.598）,总符合率83.3%。结论一步法RQ-RT-PCR具有操作简便、特异性好、灵敏度高、结果可靠、直观等特点,有利于对APL的诊断和MRD检测。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子RNAi慢病毒载体的构建
摘要：目的构建人细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）RNA干扰（RNAi）慢病毒载体。方法参照文献设计RNAi靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生RNAi慢病毒载体pGC-LV。PCR鉴定阳性克隆并测序,将测序正确的pGC-LV、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒经脂质体2000共转染293T细胞,获得重组慢病毒,用逐孔稀释法测定病毒滴度。结果合成的含EMMPRIN vshRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确;病毒包装后滴度为1×109 TU/ml。结论应用基因工程技术成功构建了可供感染的EMMPRIN基因RNAi慢病毒载体,此为进一步研究EMMPRIN在急性白血病中的作用奠定了实验基础。RANKL和M-CSF诱导THP-1细胞向破骨细胞样细胞分化的研究
摘要：目的探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法。方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞。结果 THP-1在RANKL和M-CSF的作用下分化为TRAP阳性的破骨细胞样细胞。结论 RANKL和M-CSF可联合诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞。食管癌患者抑郁程度与临床放疗疗效的关系
摘要：晚期食管癌患者精神压力较大,放疗过程中产生的严重不良反应更加重了患者的抑郁情绪,这种不良情绪降低了躯体的免疫功能和临床疗效。近年来,我们对食管癌晚期患者的抑郁程度和患者治疗疗效的关系进行了探讨。临床资料：2009年1月～2010年10月晚期食管癌患者42例,男33例、女9例,年龄47～80岁、平均56.7岁。均为初治患者,治疗前经细胞学或组织病理学检查确诊为食管癌,病理均为鳞癌。患者KPS评分均在70分以上,IL-2对COPD患者CD8~＋ T细胞频率及功能的影响
摘要：目的探讨IL-2在慢性阻塞性肺疾病（COPD）中的免疫调节作用。方法采集45例COPD急性发作期患者、33例COPD缓解期患者以及25例健康人外周血,采用ELISA检测血清中IFN-γI、L-2浓度。提取PBMC后分别设置IL-2刺激组和未刺激组,多色流式分析技术检测CD8＋T细胞频率,胞内细胞因子染色技术检测CD8＋IFN-γ＋T细胞的频率。结果 COPD患者急性发作期IL-2I、FN-γ浓度较临床缓解期和对照组显著增高（P均〈0.01）;与未刺激组相比I,L-2刺激组CD8＋T细胞频率及分泌IFN-γ显著增加（P〈0.05）。结论 IL-2可通过对CD8＋T细胞的免疫调节效应参与COPD的发生发展过程。血液透析治疗出血热并急性肾衰56例临床分析
摘要：2006～2010年,我院对56例重症出血热致急性肾衰竭患者采用血液透析治疗,取得良好疗效。现报告如下。临床资料：56例患者中,男40例、女16例,年龄25～60岁、平均43.5岁,发病至入院3～7 d。血清间接免疫荧光检测IgM抗体均阳性,血小板均减少（11×109～75×109/L）,尿蛋白（＋＋～＋＋＋）。56例患者中,消化道出血11例,心肝肾肺多脏器损害13例,高血容量12例,肺部感染10例,高钾血症10例;其中5例入院时处于休克状态,破骨细胞分化刺激因子在佐剂性关节炎大鼠滑膜中的表达及意义
摘要：目的探讨破骨细胞分化刺激因子在佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜中的表达与破骨细胞形成及软骨破坏的关系。方法 SD大鼠右足垫皮下注射完全弗氏佐剂,以诱发AA。30 d后,提取膝关节滑膜,用半定量RT-PCR法检测滑膜中破骨细胞分化刺激因子（ODF）及其配体骨保护素（OPG）、炎症因子IL-1、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的基因表达,并用免疫组织化学检测滑膜中ODF的表达,TRAP染色检测滑膜中的破骨细胞数量。结果在mRNA水平,模型组中的ODF、TRAP表达明显高于对照组（P均〈0.01）,ODF/OPG与TRAP的表达呈正相关（r=0.932,P〈0.01）,滑膜中TRAP阳性细胞数目与关节破坏呈正相关（r=0.941,P〈0.01）。结论 AA大鼠滑膜高度表达ODF,破骨细胞的形成及活化与ODF/OPG密切相关。肝素对烫伤鼠血浆TNF-α及门静脉内毒素的影响
摘要：目的探讨肝素对烫伤鼠血浆TNF-α及门静脉内毒素（LPS）的影响。方法雄性Wistar大鼠70只,随机分为无烫伤组10只,烫伤组及烫伤后使用肝素组（肝烫组）各30只。肝烫组于烫伤后即刻4、h、8 h皮下注射硫酸肝素100 U/kg,烫伤组和无烫伤组相同时相皮下注射等量生理盐水。烫伤组、肝烫组分别于烫伤后8、12、24 h处死动物,无烫伤组8 h全部处死。取门静脉血测LPS,取腹主动脉血测血浆TNF-α。结果与无烫伤组相比,烫伤后大鼠血浆TNF-α及门静脉LPS均显著升高（P均〈0.01）。使用肝素后,烫伤鼠血浆TNF-α及门静脉LPS均明显下降（P均〈0.01）。结论烫伤可导致大鼠血液LPS和TNF-α升高;肝素可能通过保护烫伤鼠肠黏膜屏障抑制LPS移位,使血浆TNF-α水平降低。siRNA沉默CLDN23基因后对仓鼠胰腺癌细胞解离及侵袭能力的影响
摘要：目的探讨CLDN23基因siRNA转染后对胰腺癌细胞解离及侵袭能力的影响。方法采用CLDN23特异性siRNA转染仓鼠胰腺癌低转移株PC-1细胞,RT-PCR半定量分析转染效率,用Papanicolaou’s染色法观察细胞解离状态,Transwell小室方法分析CLDN23基因siRNA转染后胰腺癌细胞侵袭能力的变化。结果经过CLDN23基因特异性siRNA转染后,PC-1细胞解离状态从岛样克隆生长改变为单个散在生长,其侵袭能力明显增强。结论 CLDN23的表达与胰腺癌细胞解离状态及侵袭能力密切相关,CLDN23表达降低可增强胰腺癌细胞的侵袭能力。LOX-1在糖尿病大鼠大血管病变中的表达及普罗布考的干预作用
摘要：目的探讨糖尿病大鼠大血管病变低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）的表达及普罗布考的干预机制。方法 50只健康SD大鼠随机分为4组,A组为对照组,给予普通饮食。B、C、D三组（糖尿病组）给予高糖高脂饮食。B组在造模前8周和造模后8周普罗布考全程干预,C组在造模后加普罗布考干预8周。采用免疫荧光法测定大鼠主动脉原位活性氧（ROS）,用RT-PCR和Western blot定量测定LOX-1 mRNA和蛋白水平。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠主动脉原位ROS水平及LOX-1 mRNA、蛋白水平明显增高（P均〈0.05）;普罗布考干预组糖尿病大鼠主动脉原位ROS水平及LOX-1 mRNA、蛋白水平较未干预组明显降低（P均〈0.05）。结论 LOX-1在2型糖尿病大鼠大血管病变早期表达增高,其增高与血管原位ROS水平增高有关;普罗布考可以降低2型糖尿病血管LOX-1的表达水平。血清鸟氨酸氨基甲酰转移酶在急性肾挫伤中的诊断价值
摘要：鸟氨酸氨基甲酰转移酶（OCT）是一种氨基转移酶,主要分布于肝细胞、胆囊上皮细胞的线粒体和肾细胞、脑细胞的核膜,是诊断肝胆疾病的敏感指标,但用于肾病诊断鲜见报道。2009年1～12月,我们对64例急性肾脏挫伤患者血OCT进行检测,以探讨其在急性肾挫伤中的诊断价值。临床资料：选择在我院住院的急性肾挫伤患者,排除肝胆疾病及伴有其他合并症者,共入选64例。其中,男32例、女32例,年龄20～70岁。同期选择我院健康体检者130例,新型TLM钛合金及涂层骨植入试验的生物相容性观察
摘要：目的探讨TLM钛合金及其涂层材料骨植入试验的生物相容性,为其进一步实验研究及临床应用提供依据。方法 40只家兔随机分为Ti-6Al-4V组、TLM组、含生物涂层的TLM组、含耐磨涂层的TLM组各10只,将受试材料植入各组家兔股骨内,在第1、2、4、8、12周观察取材,对植入物及其界面进行肉眼观察、X线检查、光镜检查及扫描电镜检查。结果新型TLM钛合金及其涂层材料的肉眼观察、X线检查、组织学评价及成骨效应均未出现异常。结论新型TLM钛合金及涂层均有良好的生物相容性。
