培美曲塞敏感与耐药胰腺癌细胞株生物学行为观察及机制探讨
摘要：目的观察胰腺癌培美曲塞敏感株Patu8988和耐药株Patu8988/P生物学行为的差异,并探讨其可能的机制。方法取对数生长期的Patu8988、Patu8988/P细胞,分别采用双层软琼脂实验检测细胞集落生成能力、流式细胞仪检测细胞周期分布、Transwell小室检测细胞侵袭及转移能力,采用RT-RCR法、流式细胞仪检测胰腺癌细胞中的CD44mRNA及其蛋白。结果与Patu8988细胞比较,Patu8988/P细胞的克隆形成能力增强,G1期的细胞比例增加,S期减少,而侵袭转移能力减弱,CD44mRNA及其蛋白均表达增高,P均〈0.05。结论 Patu8988/P、Patu8988细胞的生物学行为有不同程度的差异,主要表现在前者集落生成能力增强,侵袭、转移能力减弱等;CD44表达升高可能是造成这种差异的原因之一。含hTERT启动子、PE38KDEL片段质粒构建及其对人胰腺癌细胞凋亡的影响
摘要：目的构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响。方法采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10%FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数。结果重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致。A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%。B~E组与A组比较,P均〈0.05;E组与D组比较,P〈0.05。结论成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡。纤维喉镜下声带小结、息肉摘除术患者的护理
摘要：2005年1月～2039年12月，我院应用纤维喉镜行声带小结、息肉摘除术232例，效果满意。现将护理方法介绍如下。临床资料：本组232例，男106例、女126例，年龄18—75岁，职业以教师、服务行业及管理干部为主。单侧声带小结35例，双侧对称性小结94例，单侧息肉84例，SELDI-TOF-MS技术在结直肠腺瘤血清蛋白质指纹图谱筛查模型建立中的应用
摘要：目的应用表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术建立结直肠腺瘤（CRA）患者血清蛋白质指纹图谱筛查模型。方法随机选取CRA 42例、结直肠良性疾病（CBD）36例及正常人（HC）44例的血清标本组成建模组,应用SELDI-TOF-MS检测其蛋白质指纹谱,采用Biomarker Wizard及Biomarker Patterns软件分析建模组中各类人群血清中的差异蛋白后,建立CRA筛查最优分类树模型;另随机抽取血清标本70例（CRA及CBD各20例、HC 30例）组成测试组,盲法验证该模型对CRA的筛查效能。结果成功建立了结直肠腺瘤筛查分类树模型。测试模式下,该模型的诊断准确率87.70%、灵敏度71.43%、总特异度96.25%、阳性预测值90.91%。盲法验证该模型诊断准确率88.57%,灵敏度60.0%,总特异度100.0%,阳性预测值100.0%。结论应用SELDI-TOF-MS技术成功建立了CRA筛查模型,该模型敏感性与特异性较高。老年腹股沟疝无张力疝修补术后患者的护理
摘要：2006年1月一2007年12月，我院对214例老年腹股沟疝行无张力疝修补术，现将术后护理方法介绍如下。临床资料：本组中，男209例、女15例，平均年龄70．2岁，病程3个月～33a；单侧斜疝161例，单侧直疝34例，双侧斜疝6例，双侧直疝5例，股疝5例，直疝合并斜疝3例，新疆地区遗传性非息肉病性大肠癌临床病理特点分析
摘要：目的探讨新疆地区遗传性非息肉病性大肠癌（HNPCC）的临床病理特点,并对中国人HNPCC诊断标准进行评价。方法新疆地区符合中国人HNPCC诊断标准的HNPCC 12家系63例（HNPCC组）,其中4家系同时符合AmsterdamⅡ标准为A组,其余为B组;随机选取同期收治的无家族遗传倾向的散发性大肠癌152例（散发组）。采用SPSS16.0软件,对HNPCC组、散发组间及HNPCC中A、B组患者的临床病理资料进行比较。结果 HNPCC组发病年龄〈50岁者23例,肿瘤位于右半结肠39例,低分化癌32例,多发癌12例,肠外恶性肿瘤22例,Dukes A期24例,黏液腺癌31例;散发组分别为26、50、38、6、5、34、43例。两组比较,P均〈0.05。HNPCC中A、B组患者临床病理特征比较,P均〉0.05。结论新疆地区HNPCC的特点是发病年龄早、右半结肠多见、病理分化差、多发癌常见,肠外恶性肿瘤发生率高;与AmsterdamⅡ标准比较,中国人HNPCC诊断标准更适用于新疆地区HNPCC的诊断。不同切肝量大鼠血清HSP70水平变化及其意义
摘要：目的观察不同切肝量大鼠血清HSP70水平的变化,并探讨其意义。方法将310只大鼠随机分为正常对照组10只、切肝组150只和谷氨酰胺（Gln）干预组150只。后两组又分为轻度、中度、重度切亚组各50只,分别建立不同切肝量手术创伤模型,干预组造模前经大鼠尾静脉注入Gln 0.75 g/kg。对照组只给予麻醉处理。检测对照组及其他两组术后2、8、12、24、48 h大鼠血清HSP70和肝功能指标。结果与正常对照组比较,切肝组和干预组血清HSP70于术后2 h开始升高,12 h达高峰,48 h仍较高;中、重度切肝组术后ALT、TB均增高,经Gln干预后均降低。结论手术创伤可导致大鼠血清HSP70水平明显升高;检测血清HSP70表达有助于诊断及预测手术创伤程度,术前诱导HSP表达对机体有保护作用。肝细胞肝癌组织中CXCL12及其受体CXCR4的表达变化
摘要：目的观察肝细胞肝癌（HCC）组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测60例HCC、10例肝硬化和10例正常肝脏组织中的CXCL12、CXCR4蛋白。结果 HCC组织中CXCL12、CXCR4蛋白阳性率（88.3%、53.3%）明显高于肝硬化组织（30.0%、10.0%）及正常肝脏组织（均为0）,P分别〈0.05、〈0.01;HCC组织中CXCR4蛋白表达与肝门淋巴结转移、侵犯门静脉分支、术后复发转移有关（P均〈0.05）,CXCL12、CXCR4蛋白表达呈正相关（r=0.715,P〈0.05）。结论 HCC组织中CXCL12、CXCR4蛋白高表达,二者共同参与了HCC的发生发展,可作为HCC预后评估的标志物。AFP/CEA双标记时间分辨荧光免疫分析试剂的研制及性能鉴定
摘要：目的研制甲胎蛋白（AFP）及癌胚抗原（CEA）的双标记时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂,并鉴定其性能。方法将抗AFP单克隆抗体（E014）与抗CEA单克隆抗体（3E6）混合包被96孔板,用钐标记抗AFP单克隆抗体（E010）,铕标记抗CEA单克隆抗体（S001）,用双抗体夹心一步法建立AFP/CEA TRFIA试剂,测定其线性相关性、灵敏度、精密度、回收率、特异性,并与对应的单标记进口试剂进行比较。结果 AFP分析灵敏度为0.3 U/ml,线性范围为0.3~800 U/ml,平均回收率为99.8%,分析内和分析间变异系数分别为2.1%~5.8%、4.1%~8.7%;CEA分别为0.2 ng/ml、0.2~400 ng/ml、100.3%、2.4%~5.6%、4.8%~9.8%。该试剂与对应的单标记进口试剂的相关系数分别为0.99、0.98。结论成功研制了AFP/CEA双标记TRFIA试剂,其性能均达到临床检测要求,可替代国内外的单标记试剂。小儿重型颅脑损伤143例治疗分析
摘要：2000年5月-2009年6月，我院共收治重型颅脑损伤患儿143例，现报告如下。临床资料：本组中，男82例，女61例；〈3岁8例，3—6岁48例，7—15岁87例；其中坠落伤53例，车祸伤28例，跌伤3l例，击打伤14例，其他伤17例；颅脑损伤为闭合性95例，内开放性38例，外开放性10例；临床表现均有不同程度的意识障碍，有颅内压增高症状128例；FAT10真核质粒的构建、转染及其蛋白的表达
摘要：目的构建类泛素基因FAT10的真核表达质粒,观察其蛋白在转染人胚肾细胞系293T中的表达。方法采用RT-PCR法扩增FAT10全长基因片段后,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FAT10克隆至pcDNA5-FRT表达载体并行酶切鉴定;用脂质体LipofectamineTM2000分别介导空质粒（空载组）及重组质粒（FAT10质粒组）转染293T细胞,以脂质体混合PBS（PBS组）及未加入脂质体（未转染组）作为对照。转染48 h后,收集细胞。采用Western blot法检测293T细胞中的FAT10蛋白。结果 pMD18-FAT10重组质粒经双酶切获得498 bp片段,对PCR产物及498 bp片段进行测序,结果与GenBank报道序列完全一致。FAT10质粒组、未转染组、空载体组和PBS组FAT10蛋白表达量分别为1.556±0.072、0.334±0.051、0.425±0.095、0.382±0.063,FAT10质粒组与未转染组、空载体组和PBS组比较,P均〈0.05。结论成功构建了FAT10的真核表达质粒pcDNA5-FRT-FAT10,FAT10蛋白在293T细胞中高表达。复方樟柳碱颞动脉旁皮下注射治疗中心性浆液性视网膜病变45例
摘要：2006年1月-2009年12月，我院采用复方樟柳碱注射液颞动脉旁皮下注射治疗中心性浆液性视网膜病变（CSCR）45例，取得良好疗效。现报告如下。5-杂氮-2′-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响及机制探讨
摘要：目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7细胞分两组,观察组用含5.0μM5-Aza-CdR的培养液处理4 d,对照组加入等体积的DMSO。采用细胞划痕实验观察细胞体外迁移能力,采用RT-PCR、甲基化特异性PCR（MSP）法检测CXC趋化因子受体-4（CXCR4）、乳腺癌转移抑制基因-1（BRMS1）mRNA及其启动子区甲基化状态。结果与对照组比较,观察组36、48 h细胞划痕愈合率明显升高,MCF-7细胞的CXCR4 mRNA表达量明显增加（P〈0.05）;5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化,BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR增强了MCF-7细胞的体外迁移能力,可能与其去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4表达有关。吴茱萸碱对人胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭的影响及机制探讨
摘要：目的观察吴茱萸碱对胃癌细胞增殖、侵袭的影响,并探讨其机制。方法采用不同浓度的吴茱萸碱处理人胃癌细胞SGC7901,用软琼脂集落培养试验检测癌细胞增殖情况,Boyden小室检测癌细胞侵袭能力;分别采用荧光实时定量RT-PCR法和Western blot法检测癌细胞中的中期因子（MK）mRNA及其蛋白。结果 SGC7901经吴茱萸碱处理后,恶性增殖和穿膜细胞数均明显下降,且呈剂量依赖性（P均〈0.05）;吴茱萸碱处理后,SGC7901的MK mRNA及蛋白表达均明显下调,且呈时间、浓度依赖性（P均〈0.01）。结论吴茱萸碱可明显抑制胃癌细胞的增殖及侵袭能力,其机制可能与下调MK基因表达有关。贵州地区宫颈上皮内瘤变和宫颈浸润癌患者HPV感染状态及其亚型分布
摘要：目的观察贵州地区宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈浸润癌患者人乳头状瘤病毒（HPV）的感染状态及其亚型分布。方法采用导流杂交技术对30例CIN（CIN组）、33例宫颈浸润癌患者（宫颈癌组）、60例自愿接受宫颈HPV感染筛查的妇女（对照组）进行HPV分型检测,所有受检者均来自贵州地区。结果 CIN组HPV阳性13例（43.33%）,宫颈癌组19例（57.58%）,对照组5例（8.33%）。CIN组、宫颈癌组与对照组比较,P均〈0.01。CIN组共检出7种亚型HPV,均为高危型（HR-HPV）,无多型HPV感染（M-HPV）。其中HPV16 7例,HPV31、52各2例,HPV18、33、53、58各1例。宫颈癌组检出5种亚型,亦均为HR-HPV,M-HPV3例。其中HPV16 11例,HPV534例,HPV58 3例,HPV18、59各1例。对照组检出7种亚型,HR-HPV中的HPV16、18、31、39、53、58和低危型HPV的HPV6各1例;M-HPV 1例。CIN组、宫颈癌组HPV16感染率明显高于对照组,P均〈0.05。HR-HPV感染与CIN（OR=8.412,95%CI为2.62~26.99）和宫颈浸润癌（OR=14.929,95%CI为4.74~46.98）紧密相关,且主要与HPV16感染有关（CIN：OR=17.957,95%CI为2.09~154.15;宫颈浸润癌：OR=29.500,95%CI为3.60~242.07）,P均〈0.05。结论贵州地区CIN和宫颈浸润癌与HR-HPV感染密切相关,HPV16为主要感染亚型。输卵管介入再通术联合中药口服、灌肠治疗输卵管阻塞性不孕症85例
摘要：输卵管介入再通术是治疗输卵管阻塞性不孕症的常用方法，但术后易发生再粘连，妊娠率较低。2006—2009年，我们采输卵管介入再通术联合中药口服、灌肠治疗输卵管阻塞性不孕症85例，效果较好。现报告如下。四种烤瓷合金与复合树脂粘接强度的对比观察
摘要：目的对比观察4种烤瓷合金与复合树脂的粘接强度。方法选择临床常用的4种烤瓷合金（金合金、银钯合金、钛合金、镍铬合金）,对其表面打磨、酸蚀后随机分为两组。实验组用硅烷偶联剂进行表面处理,对照组不处理,然后均用Voco Cimara崩瓷修复系统粘接修复。经37℃恒温水浴24 h后,用万能测试机测定合金与复合树脂的剪切强度,用扫描电镜观察剪切后的断面。结果实验组金合金、银钯合金、钛合金、镍铬合金与树脂粘接界面的剪切强度分别为（24.13±5.63）、（13.58±7.04）、（11.02±4.26）、（12.92±4.99）Mpa,对照组分别为（17.21±8.11）、（10.90±4.25）、（11.20±4.06）、（9.12±6.01）Mpa。两组比较,P均〈0.05;金合金与其他合金材料比较,P均〈0.01。电镜观察到所有合金与复合树脂的界面破坏,未发生复合树脂内聚断裂;在所有合金基底面可观察到打磨的浅沟纹状结构,除钛合金外均可观察到酸蚀的微孔。结论与银钯合金、钛合金、镍铬合金相比,金合金与复合树脂粘接强度最大。辽宁地区健康汉族人IL-6基因-572C/G多态性观察
摘要：目的观察辽宁地区健康汉族人群中白细胞介素-6（IL-6）基因-572C/G多态性。方法选择辽宁地区366例健康汉族人,采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性技术检测其血清中IL-6基因的-572C/G多态性。结果辽宁地区健康汉族人IL-6基因-572C/G基因型中CC、CG、GG型频率分别为63.93%、34.15%、1.92%。C等位基因与G等位基因频率分别为81.01%、18.99%。结论辽宁地区健康汉族人IL-6基因在-572C/G存多态性,其中CC纯合子最多见,CG杂合子次之,GG纯合子最少见;C等位基因为常见基因,G等位基因为少见基因。
