Rho激酶抑制剂Y-27632对人气道平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响
摘要：目的观察Rho激酶抑制剂Y-27632对人气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖的影响，为哮喘防治提供新思路。方法组织块贴壁法培养人ASMCs，对数传代后随机分为4组，A组加入含10％FBS的DMEM培养基，B、C、D组分别加入浓度为0．4、2．0、10．0μmol／L的Y-27632＋含10％FBS的DMEM培养基，非放射性细胞增殖（MTS）／吩嗪甲酯硫酸盐（PMS）法检测各组细胞增殖情况（490nm处A值），流式细胞仪分析细胞周期。结果C、D组A值均显著低于A组（P〈0．05、0．01）；C、D组G0／G1期细胞比例显著高于A组，S、G2／M期细胞比例显著低于A组（P〈0．05、0．01）。结论Rho激酶抑制剂Y-27632可抑制人ASMCs增殖，阻滞细胞周期于G0／G1期；本研究为哮喘防治提供了新的选择。双醋瑞因胶囊联合针灸、推拿疗法治疗强直性脊柱炎38例疗效观察
摘要：2007年2月-2008年12月，我们采用双醋瑞因胶囊联合针灸、推拿疗法治疗强直性脊柱炎（AS）患者38例，效果满意。现报告如下。c—KIT、PDGFR-α及PDGFR—β蛋白在肺神经内分泌癌组织中的表达及临床意义
摘要：目的探讨c-KIT、血小板衍生生长因子受体-α（PDGFR-α）和PDGFR-β蛋白表达在肺神经内分泌癌发生中的作用及与预后的相关性。方法采用免疫组化方法检测80例肺神经内分泌癌组织中c-KIT、PDGFR-α及PDGFR-β蛋白表达情况，分析三项指标间及与肿瘤临床病理参数、患者预后（Kaplan-Meier生存分析）的关系。结果c-KIT、PDGFR-α和PDGFR-β蛋白阳性表达率分别为45．00％、58．75％和66．25％，两两比较P均〉0．05；三项指标与患者年龄、性别及肿瘤直径、分期均无明显相关性（P〉0．05）；除小细胞癌与类癌外，PDGFR-α蛋白在四种类型肺癌中的表达阳性率均有显著差异（P均〈0．05）；PDGFR-β蛋白在不典型类癌和大细胞癌中的表达有显著差异（P〈0．05）；PDGFR-α蛋白在大细胞癌、c-KIT蛋白在类癌、PDGFR-β蛋白在不典型类癌中表达阳性与阴性者中位生存期有显著差异。结论c-KIT、PDGFR-α及PDGFR-β蛋白表达在肺神经内分泌癌发生中具有一定作用，并与预后有关。维生素C对AS2O3抑制肺癌A549细胞增殖、诱导细胞凋亡作用的影响及机制
摘要：目的探讨维生素C对三氧化二砷（AS2O3）抗癌作用的影响及其可能机制。方法将体外培养的肺腺癌A549细胞随机分为6组，其中对照组不行特殊处理，AS2O3 1—3组分别加入0．4、4．0、40μg/ml的AS2O3，维生素C组加入400μg／ml的维生素C，联合组加入400μg／ml维生素C＋0．4μg／ml AS2O3。采用缩胆囊素八肽（CCK-8）法及克隆形成实验检测细胞生长情况（A值），用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率，用RT-PCR方法检测Caspase-3 mRNA、多药耐药相关蛋白基因1（MRP1）mRNA、多药耐药基因1（MDR1）mRNA表达情况（维生素C组）。结果联合组及AS2O3 2、3组A值均显著低于对照组及AS：O3组、维生素C组，且随作用时间延长逐渐降低（P〈0．05）；联合组细胞集落显著少于其他五组，G0／G1期所占比例及凋亡率均显著高于其他五组（P〈0．05）；维生素C组Caspase-3 mRNA、MDR1 mRNA表达升高（P〈0．05）、MRP1 mRNA表达无明显变化（P〉0．05）。结论维生素C对As2O3抗肺腺癌A549细胞的作用具有协同性，可能机制为上调Caspase-3表达；两者联用可望成为低毒高效的化疗组合。PVL基因阳性与阴性MRSA对坏死性肺炎的致病性比较及机制
摘要：目的研究Panton—Valentine杀白细胞素（PVL）基因对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）在坏死性肺炎中致病能力的影响及机制。方法取18只小鼠随机分为模型1组、模型2组及对照组各6只，分别通过气管灌注MRSA标准菌株ATCC43300、铜-23菌悬液及生理盐水，实验后24h及48h分别检测三组外周血白细胞计数。实验后48h光镜观察肺组织病理结构，收集支气管肺泡灌洗液（BALF）脱落细胞以电镜观察形态变化、流式细胞术检测凋亡率和坏死率。结果与对照组比较，实验后24h和48h外周血白细胞计数模型2组下降、模型1组升高；模型2组肺组织炎细胞浸润及支气管上皮细胞破坏情况重于模型1组、BALF中脱落细胞坏死率高于模型1组。结论PVL基因阳性CA—MRSA对坏死性肺炎的致病性强于PVL基因阴性MRSA，可能机制为前者能够分泌PVL基因并可编码PVL毒素。血管紧张素I转换酶基因I／D多态性与特发性肺纤维化的相关性研究
摘要：目的探讨血管紧张素I转换酶（ACE）基因I／D多态性在特发性肺纤维化（IPF）发病中的作用。方法应用PCR技术检测42例IPF患者（IFP组）和90例健康查体者（对照组）ACE基因I／D多态性，并分析不同基因型和等位基因者IPF发病危险性。结果IPF组DD基因型和D等位基因频率均显著高于对照组（P〈0．05）；与Ⅱ基因型比较，携带DD型和D等位基因个体发生IPF的风险分别增加2．97倍（95％CI为1．13—7．73）和1．96倍（95％CI为1．16—3．32），P均〈0．05。结论ACE基因I／D多态性与IPF发病有关，DD基因型和D等位基因可能增加IPF的患病风险。中西医结合疗法治疗小儿流感病毒性肺炎33例临床分析
摘要：流感病毒性肺炎属于一种严重的间质性肺炎，多发生于体弱小儿，集中于6个月-3岁年龄段。由于流感病毒性肺炎在小儿时期发病的临床表现缺乏特异性，治疗缺乏特效药物，国内文献报道较少。2006年6月-2009年6月，胎盘免疫调节因子对HepG2．2．15细胞毒性及HBV DNA分泌作用的影响
摘要：目的观察胎盘免疫调节因子（PF）在体外的抗乙肝病毒（HBV）作用及安全性。方法将质量浓度分别为0．032—20．000mg／ml的PF作用于体外培养的人肝癌细胞系HepG 2．2．15细胞，通过MTT比色法观察细胞增殖抑制率及半数毒性质量浓度（TC50），以荧光定量PCR法检测HBV DNA水平（以拉米夫定为阳性对照组）。结果PF处理后细胞增殖抑制率为0．75％～58．21％且呈浓度依赖性，作用72h后TC50为13．61mg／ml；PF作用72h和144h后，细胞上清液中HBV DNA拷贝量显著降低，与阳性对照组水平相似。结论PF在体外有显著抗HBV作用，且细胞毒性较小。风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化
摘要：目的 为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性；并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导时间对目的蛋白表达产量的影响。结果获得相对分子质量约为16．6kD的融合蛋白，Western Blot证明其具有良好的抗原性，并确定该蛋白在30℃、0．6mmol／L IPTG的条件下诱导表达4h可获得最佳表达量。结论本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础，亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据。双向凝胶电泳技术在胰腺癌蛋白质组学研究中的应用及条件优化
摘要：目的将双向凝胶电泳技术用于胰腺癌蛋白质组学研究并对其条件进行优化。方法对胰腺癌组织、癌旁组织、胰液等标本在组织研磨、裂解、蛋白抽提及双向凝胶电泳等各个环节进行调整和优化。结果液氮研磨法可得到更多的蛋白质点；超声方法去除组织中核酸效果较好；二硫苏糖醇（DTT）平衡时间12—15min，碘乙酰胺（IAA）平衡时间应等同或略长于DTT平衡时间时可得到高质量图谱；丙酮沉淀法可获得较多的胰液生物标志物蛋白点；将2—3根长度〈13cm的IPG胶条在1块凝胶上进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的方法（Msoc）使双向电泳的重复性和通量显著提高。结论本研究成功建立了双向凝胶电泳技术平台，所获得的电泳图谱分辨率高、重复性好，能够较好地用于胰腺癌蛋白质组学研究。腔内激光联合小切口股段大隐静脉剥脱术治疗下肢静脉曲张42例
摘要：2007年2月-2008年10月，我们采用腔内激光（EVLT）联合小切口股段大隐静脉剥脱术治疗下肢静脉曲张患者42例，效果满意。现报告如下。乳腺癌组织中p16基因甲基化与p16、ER蛋白表达的相关性及意义
摘要：目的探讨p16基因甲基化在乳腺癌发生、发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）联合测序检测58份乳腺癌及其癌旁组织中p16基因甲基化状态，应用免疫组化sP法检测p16及ER蛋白表达情况，对各指标间关系行Spearman相关分析。结果p16基因在乳腺癌中甲基化率为29，3％（17／58），有淋巴结及远处转移者显著高于无转移者（P〈0．05）；p16甲基化及非甲基化者p16蛋白表达阻性（失表达）率分别为82．4％（14／17）、43．9％（18／41），ER蛋白失表达率分别为76．5％（13／17）、24．4％（10／41），P均〈0．05。结论p16基因甲基化在乳腺癌发生、发展中具有重要作用，机制可能与调节p16和ER蛋白表达有关。角膜内皮细胞移植术16例围术期护理体会
摘要：角膜内皮移植术是近年开展的新型后板层角膜移植术，主要用于治疗各种原因所致角膜内皮功能失代偿，技术难度大、手术要求高，具有术后感染、新生血管、排斥反应发生率低及散光控制好、视力恢复较快等优点。2007年1月-2008年12月，我院共为16例患者施行角膜内皮细胞移植术，效果满意。现将围术期护理体会报告如下。高分子量角蛋白抗体表达在甲状腺乳头状癌与乳头状增生鉴别诊断中的价值
摘要：目的为甲状腺乳头状癌（PTC）与结节性甲状腺肿伴乳头状增生（NGWPH）的鉴别诊断提供可靠分子标志物。方法用免疫组化EnVision法测定50例PTC（PTC组）及50例NGWPH组织中（NGWPH组）高相对分子质量角蛋白抗体（34βE12）表达情况，计算34βE12用于鉴别诊断的评价指标。结果PTC组34βE12表达阳性46例（92．2％），NGWPH组表达均为阴性。两组阳性率比较有显著差异（P〈0．05）；3413E12用于PTC与NGWPH鉴别诊断的敏感度为92％，特异度为100％，准确度为96％，阳性预测值为100．00％，阴性预测值为92．59％。结论34βE12可作为鉴别PTC与NGWPH的重要参考标志物。己酮可可碱对人食管癌EC9706细胞增殖及NF—κB p65、COX-2、Ki-67蛋白表达的影响
摘要：目的探讨己酮可可碱（PTX）对肿瘤细胞的增殖抑制作用及机制。方法体外培养人食管癌EC9706细胞，用不同质量浓度的PTX进行干预，采用MTT法检测细胞增殖抑制率（IR），免疫组化染色SP法检测核转录因子-κB（NF—κB p65）、环氧化酶-2（COX-2）、Ki-67蛋白表达。结果PTX处理后EC9706细胞IR明显升高，NF-κB P65、COX-2蛋白及Ki-67蛋白表达明显下降（P〈0．05），且呈时间-浓度依赖性。结论PTX可抑制EC9706细胞增殖，可能机制为下调NF-κB、COX-2及Ki-67蛋白表达；此为PTX治疗食管癌提供了理论依据。安素在胃癌患者围手术期胃肠内营养支持中的应用
摘要：自2007年1月以来，我们对57例胃癌患者于围术期应用安素行肠内营养支持，效果满意。现报告如下。哮喘患者诱导痰中TSLP、IL-25水平测定及意义
摘要：目的探讨胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、IL-25在支气管哮喘（下称哮喘）发病中的作用。方法选择急性发作期及慢性期哮喘患者各15例（哮喘组）及健康查体者15例（对照组），采用超声雾化吸入4％高渗盐水法采集诱导痰标本，以ELISA法测定诱导痰中髑LP、IL-25水平，分析两者相关性。结果哮喘组诱导痰中TSLP及IL-25水平均显著高于对照组，且急性发作期显著高于慢性期（P均〈0．05）。结论TSLP、IL-25可能在哮喘发生、发展中具有重要作用，有望作为哮喘治疗的潜在靶点。青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞系HFL—I细胞增殖、凋亡的影响及机制
摘要：目的进一步探讨青蒿琥酯的抗纤维化作用及机制。方法取对数生长期人胚肺成纤维细胞（HELF）系HFL-I细胞株，随机分为观察1—4组及对照组，观察1-4组分别加入质量浓度为4、8、16、32mg／L的青蒿琥酯，对照组加入等体积培养液后继续培养。用CCK-8法检测细胞增殖情况（A值），流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率，RT-PCR法测定Survivin mRNA表达。结果观察1-4组G0＋G1期细胞所占比例及细胞凋亡率均显著高于对照组，细胞A值及Survivin mRNA表达均显著低于对照组，且各观察组间亦有显著差异（P〈0．05）。结论青蒿琥酯具有抗肺纤维化作用，可能机制为通过下调Survivin mRNA表达抑制HFL-I细胞增殖、促进HFL-I细胞凋亡。
