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摘要:目的探索一种在体外从人外周血单个核细胞(PBMC)扩增CD56^+淋巴细胞的方法。方法以干细胞培养基(SCGM)为基础培养基,设计IL-2/抗IL-2抗体(IL-2/抗IL-2抗体质量比为1/20)实验组以及IL-2+IL-15、相应因子浓度的IL-2和抗IL-2抗体三个对照组,从PBMC中诱导扩增CD56^+淋巴细胞,流式细胞仪检测第7、10天CD3/CD56表达率,四甲基偶氮唑蓝法检测CD56^+细胞对肿瘤细胞株K562的杀伤活性。结果培养第7、10天时,CD56^+细胞分别扩增了(24.67±3.14)和(31.63±5.01)倍,其中CD3^+CD56^+和CD3^-CD56^+细胞分别扩增(110.93±19.10)、(7.8±1.17)和(157.60±46.31)、(12.03±1.64)倍,实验组与对照组比较扩增倍数差别有统计学意义(P〈0.05)。培养第10天,效/靶比10:1时,实验组CD56^+细胞对K562细胞的杀伤率为(83.46±1.56)%,与对照组比较具有更强细胞毒性作用(P〈0.05)。结论在SCGM为基础培养基条件下,IL-2/抗IL-2抗体复合物能更有效地扩增CD56^+细胞毒性免疫效应细胞,为肿瘤过继免疫治疗提供了一种扩增外周血CD56^+淋巴细胞的新方法。
摘要:目的研究急性髓细胞白血病(AML)细胞P13K-Akt—mTOR信号转导通路各基因的表达及PI-103在体外对AML细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法RT-PCR法检测AML细胞P13K、Akt、mTORmRNA的表达;四甲基偶氮唑蓝法检测PI-103对AML细胞的增殖作用;流式细胞仪检测PI-103对AML细胞的凋亡率和细胞周期的影响。结果①81.25%的AML患者表达P13K基因,87.5%的患者表达mTOR基因,50%的患者同时表达此两种基因。②PI-103能明显提高PI3K—Akt-mTOR信号通路持续活化的AML细胞的增殖抑制率和凋亡率、阻滞细胞于G0/G1期(P均〈0.05),且与剂量显著相关(P均〈0.05)。结论大部分AML患者存在PI3K-Akt-mTOR信号转导通路的异常活化;PI-103可通过PI3K、mTOR信号通路抑制AML细胞增殖、促进其凋亡。
摘要:由于抗生素的广泛运用,葡萄球菌对多种抗生素产生耐药,已成为临床治疗颇为棘手的问题。本文对从血培养标本中分离的146株葡萄球菌进行耐药性分析,以了解其耐药情况,从而指导临床医师合理使用抗菌药物。
摘要:婴儿维生素B1缺乏症又称婴儿脚气病,主要表现为消化、神经及心血管系统疾病,临床易被误诊。现将我院1988年3月~2006年3月收治的86例婴儿维生素B1缺乏症误诊情况分析如下。
摘要:目的利用含红色荧光报告基因(DsRed)的pGCsi-U6/Neo/DsRed/质粒构建干扰人红系特异的γ-氨基-6-酮戊酸合成酶(eALAS)基因表达的短发夹RNA(shRNA)表达载体,并进行活性鉴定。方法根据GenBank中eALAS的序列,设计3条表达shRNA的互补DNA序列,分别克隆至质粒载体pGCsi-U6/Neo/DsRed中构建重组质粒,转化大肠杆菌DHSa菌株扩增后,提取质粒测序分析,以相同的方法构建并鉴定eALAS基因的真核表达载体pEGFP-N1-eALAS;将3种pGCsi-U6/Neo/DsRed/eALAS-shRNA分别与pEGFP-N1-eALAS共转染HEK293细胞株,通过流式细胞仪检测pEGFP-N1-eALAS融合蛋白的荧光强度,选择最佳RNA干扰(RNAi)靶点,并在基因和蛋白水平检测eALAS的表达,进一步验证最佳RNAi靶点的敲减效率。结果经测序,模板序列与设计序列完全正确,最佳RNAi靶点敲减效率达72.45%,eALAS在基因和蛋白水平显著下降。结论成功构建了eALAs特异性RNAi表达载体,为下一步研究铁效应元件eALAS在铁代谢异常所致红系统疾病的机制奠定了基础。
摘要:目的研究N-(4羟基苯基)维生素甲酰胺(4HPR)对人宫颈癌细胞形态与增殖的影响。方法应用显微镜观察4HPR对宫颈癌细胞形态的影响;磺酰罗丹明B法观察4HPR对宫颈癌细胞增殖的影响。结果4HPR可使宫颈癌细胞的形态发生改变,电子显微镜和激光共聚焦显微镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等细胞凋亡特征,荧光显微镜下可见凋亡小体;4HPR可抑制人宫颈癌细胞增殖及其对裸鼠的致瘤作用。结论4HPR可使人宫颈癌细胞的形态发生改变,并抑制该细胞增殖。
摘要:面肌痉挛(HFS)是神经科常见病,目前该病治疗首选显微血管减压术(MVD)。2004年6月~2007年6月,我科采用MVD手术治疗48例HFS患者,疗效满意。现报告如下。
摘要:目的探讨Vav3基因在子宫内膜癌组织中的表达及其与雌激素受体(ER)和临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测正常子宫内膜组织、非典型增生子宫内膜组织、子宫内膜癌组织中Vav3蛋白表达,并对其及ER与临床病理特征的关系进行分析。结果①Vav3在正常子宫内膜、非典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中阳性表达率逐渐增高,三组间差异有统计学意义(P〈0.01),而在非典型增生组织中与子宫内膜癌组织中差异无统计学意义。②非典型增生子宫内膜中Vav3与ER表达无明显相关,而在子宫内膜癌中二者表达存在相关性(rs=0.225,P〈0.05)。③Vav3表达在I、Ⅱ型子宫内膜癌之间无明显差异,Vav3在I型子宫内膜癌中的表达与患者FIGO分期、组织学分级、肌层浸润呈正相关(rs=0.276、0.238、0.237,P〈0.05),而与是否绝经、淋巴结有无转移无明显相关。结论Vav3基因在子宫内膜癌的发生发展中可能起重要作用,与ER可能存在交联对话。
摘要:目的研究癌胚抗原(CEA)蛋白、CEAmRNA在大肠癌、胃癌患者血清、癌组织中的表达,为大肠癌、胃癌的早期诊断提供理论依据,并探讨最佳诊断方法。方法选取21例大肠腺癌、20例胃腺癌住院患者和20例胃肠道良性疾病患者,检测其术前血清CEA蛋白表达;用免疫组织化学法和实时荧光定量RT—PCR法检测癌组织、癌旁组织及良性胃肠道疾病组织中CEA蛋白和CEAmRNA表达。结果大肠癌、胃癌组织CEA蛋白及CEAmR-NA的表达均高于癌旁组织及良性胃肠道疾病组织(P〈0.01,或〈0.05),胃癌组织CEAmRNA表达与血清及组织中CEA表达比较有统计学差异(P〈0.05);大肠癌组织CEAmRNA表达与血清CEA表达比较有统计学差异(P〈0.05)。结论应用实时荧光定量RT—PCR法检测组织CEAmRNA在大肠癌和胃癌早期诊断中有重要价值。
摘要:近年轻症和不典型风湿热病例呈逐渐上升趋势,特别是瓣膜病风湿活动的诊断难度更大。国内已有实验室将A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)的检测应用于典型或不典型风湿热病例的诊断试验中,但是对慢性风湿性心脏病风湿活动的诊断少见报道。2004年6月~2008年5月,我们检测了92例慢性风湿性心脏病患者的ASP,以探讨其诊断价值。
摘要:目的探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达与宫颈癌生物学行为的关系及意义。方法用免疫组化S-P法检测12例正常宫颈、24例宫颈上皮内瘤变(CIN)、60例宫颈癌中STAT3与CyclinD1的表达。结果宫颈癌组织STAT3、CyclinD1的阳性表达率均明显高于正常宫颈组织与CIN组织(P〈0.01,〈0.05);STAT3和CyclinD1的表达呈正相关(r=0.327,P〈0.05);STAT3、CyclinD1异常表达率随着病理分级和临床分期的增加而增加,两者的表达均与淋巴转移有关(P〈0.01,〈O.05)。结论STAT3可能通过激活其下游靶基因CyclinD1,引起宫颈癌细胞异常增殖和分化失控。
摘要:肝豆状核变性是一种常染色体隐性遗传性疾病,由铜代谢障碍所致的一种以肝硬化和脑变性为主的疾病;由于其临床表现多样化,病情十分复杂,病死率很高,我们对我院收治的1例肝豆状核变性并发横纹肌溶解症进行了病例资料回顾。现报告如下。
摘要:目的探讨白细胞介素31(IL-31)在博莱霉素(BLM)致肺纤维化小鼠各时期肺组织中的表达及意义。方法将48只小鼠随机分为对照组和实验组。分别给予0.9%氯化钠注射液和BLM(5mg/kg)一次性气管内灌注后第7、14、21和28天处死小鼠,取肺组织,应用Western Blotting法测定其中IL-31蛋白表达水平。结果实验组肺组织中IL-31蛋白表达水平高于对照组(P〈0.05)。实验组中IL-31蛋白表达从第7天开始高于对照组,第21天达到高峰,第28天降低。结论IL-31在肺纤维化形成过程中存在高表达,尤其在介导中后期肺纤维化进程中发挥重要作用。
摘要:目的探讨肠安康胶囊对大鼠溃疡性结肠炎(UC)结肠组织细胞凋亡的影响。方法三硝基苯磺酸乙醇溶液大鼠灌肠建立UC模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组和肠安康大、中、小剂量组,原位末端标记染色法检测结肠组织细胞凋亡,免疫组织化学法检测Fas/Fas-L、Bas/Bcl-2蛋白,RT—PCR法检测Caspase-3和c-Myc基因mRNA。结果与正常组比较,模型组结肠组织凋亡细胞明显增多(P〈0.01),肠安康胶囊治疗后,捅亡细胞数目明显减少(P〈0.01),并明显降低了凋亡相关调控基因Caspase-3、c-MycmRNA及Fas/Fas-L、Bas/Bcl-2蛋白的表达(P〈0.01)。结论肠安康胶囊通过改善相关细胞凋亡蛋白及基因的表达对实验性UC有一定的治疗作用。
摘要:近年来,子宫内膜腺癌的发病年龄有年轻化趋势。尚未生育又希望保留生育功能的年轻患者常常不愿意接受子宫和附件切除的治疗方法;此外,40岁以下子宫内膜腺癌常有分化好、分期早和预后好的特征,且孕激素治疗疗效好。1991~2008年,我们采用孕激素治疗临床早期高分化子宫内膜腺癌年轻患者15例。现报告如下。
摘要:目的观察自发胰岛素抵抗的OLETF大鼠肝脏脂肪酸氧化代谢的异常以及非诺贝特对其的影响。方法以8周龄LETO大鼠为正常对照,将同周龄OLETF大鼠随机分为未治疗组和治疗组[非诺贝特20ms/(kg·d)],于17周龄及30周龄分批处死动物,使用实时定量RT-PCR法测定肝脏组织脂肪酸氧化相关基因过氧化物酶体增生物激活受体-α(PPAR-α)、丙二酰辅酶A脱羧酶(MCD)、脂酰辅酶A氧化酶(AOX)mRNA的表达。结果与唧0大鼠相比,未治疗组8周龄大鼠首先出现糖负荷后2h游离脂肪酸(FFA)水平升高(P〈0.05),17周龄出现空腹FFA以及血糖、胰岛素水平的升高;30周龄时肝脏组织PPAR-α、MCD、AOXmRNA表达均下调,甘油三酯含量升高(P均〈0.01)。治疗组空腹FFA水平明显降低,肝组织PPAR-α、MCD、AOXmRNA表达上调,肝组织甘油三酯含量下降(P均〈0.05)。结论非诺贝特可使OLETF大鼠肝脏脂肪含量下降,这可能与其降低血清FFA水平及上调肝脏组织与脂肪酸氧化相关酶的基因表达有关。