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摘要:目的 探索一种快速建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的方法。方法 取新生1d~3d SD乳鼠,原代心肌细胞培养,观察连二亚硫酸钠(Na2S2O4)不同浓度(1,2,4mmol/L)分别缺氧1h/复氧24h及在4mmol/LNa2S2O4的终浓度下,缺氧30min,观察不同复氧时间(1h,2h,3h,4h,5h,6h),利用MTT法检测心肌细胞存活率及化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放,并进行细胞形态学观察。结果 乳鼠心肌细胞给予不同浓度Na2S2O4进行缺氧1h/复氧24h处理后,发现Na2S2O4浓度为4mmol/L时,MTT的OD值与正常对照组相比有显著性差异,同时上清液中LDH含量升高,差异具有统计学意义(P〈0.01)。在Na2S2O4终浓度为4mmol/L的基础上,给予缺氧30min,复氧1h~6h,心肌细胞存活率显著降低,上清液中LDH释放显著增加,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论 使用Na2S2O4建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型方便、快捷、高效。
摘要:目的 研究阿司匹林对肿瘤相关M2型巨噬细胞分泌YKL-40的影响。方法 分别培养肿瘤相关M2型巨噬细胞和胶质母细胞瘤U87MG;采用Transwell小室共同培养肿瘤相关M2型巨噬细胞与胶质母细胞瘤U87MG并用不同浓度的阿司匹林(0m M;2m M;4m M;8m M)进行干预,24h后收集样本。采用免疫组化方法检测与胶质母细胞瘤U87MG共同培养M2型巨噬细胞YKL-40的表达,并用酶联免疫吸附法(ELISA)检测收集样本中M2型巨噬细胞YKL-40的分泌,并分析实验结果。结果 与胶质母细胞瘤U87MG共同培养M2型巨噬细胞可以表达YKL-40,而且当用阿司匹林干预其浓度达到4m M以上时,可以明显抑YKL-40的分泌量,且呈浓度依赖性,具有明显的统计学意义。结论 与胶质母细胞瘤U87MG共同培养M2型巨噬细胞可以表达YKL-40,并且阿司匹林可以抑制M2型巨噬细胞分泌的成血管因子YKL-40。
摘要:目的 探讨腺病毒KLF7对大鼠脊髓半横断损伤后酪氨酸激酶A(Trk A)和酪氨酸激酶B(Trk B)表达、损伤灶形态及运动功能恢复的影响。方法 制作大鼠脊髓半横断损伤模型,分别将腺病毒2(AAV2)、腺病毒2-KLF7(AAV2-KLF7)用微量注射器注射到脊髓损伤灶,实验大鼠随机分为正常组、AAV2对照组及AAV2-KLF7组。术后4周,通过HE染色观察脊髓损伤灶面积,Western Blot检测KLF7、Trk A和Trk B蛋白表达,BBB行为学评价运动功能恢复。结果 与对照组比较,AAV2-KLF7组脊髓半离断损伤灶面积比显著缩小(P〈0.05),KLF7、Trk A、Trk B蛋白相对表达显著增高(P〈0.05)。AAV2-KLF7组BBB评分显著高于对照组(P〈0.05)。结论 KLF7通过上调神经营养因子受体Trk A和Trk B表达,改善大鼠脊髓损伤灶形态,促进运动功能的恢复。
摘要:目的 探讨胱硫醚β-合成酶(CBS 844ins68)基因多态性与牡丹江地区汉族朝鲜族原发性高血压的相关性研究。方法 运用PCR的方法检测牡丹江地区汉族高血压患者107人,汉族正常对照组101人,朝鲜族高血压患者105人,朝鲜族正常对照组96人的血浆Hcy水平及其CBS 844ins68基因型,并进行测序验证。结果 未发现CBS 844ins68基因杂合突变型和纯合突变型。结论 CBS 844ins68多态性与本地区汉族、朝鲜族原发性高血压的发生无相关性。
摘要:目的 构建人内皮细胞剪接因子-1真核表达载体pc DEF3-ESRP1,并观察其在He La细胞的表达。方法 以He La细胞c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增ESRP1全编码区基因片段,将其连接入真核表达载体pc DEF3,并通过酶切及测序进行鉴定;通过脂质体介导法将真核表达载体pc DEF3-ESRP1转染至He La细胞,Western blot检测外源性ESRP1蛋白在He La细胞中的表达。结果 RT-PCR扩增得到人ESRP1 c DN段,重组质粒经酶切鉴定和DNA序列分析确定得到真核表达载体pc DEF3-ESRP1;Western blot实验证实转染重组质粒的He La细胞存在外源性的人ESRP1表达。结论 成功构建人ESRP1真核表达载体pc DEF3-ESRP1,为进一步研究ESRP1的生物学功能奠定了实验基础。
摘要:目的 探讨西洋参茎叶皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)表达的影响及其相关机制。方法 SD大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、西洋参茎叶皂苷(50、100、200 mg·kg^-1)组5组,采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。造模前,西洋参茎叶皂苷治疗组分别灌胃给药,每日1次,连续7 d。脑缺血再灌注24h后以Longa's法进行大鼠神经功能损伤评分,分光光度计法检测脑组织中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性。结果 与模型组比较,西洋参茎叶皂苷(100、200 mg·kg^-1)组可明显改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能损伤(1.80±0.68 vs.2.30±0.51,P〈0.05;1.50±0.76 vs.2.30±0.51;P〈0.05),降低缺血脑组织NOS和i NOS的活性(3.82±0.41 vs.5.83±0.68,P〈0.05;3.13±0.38 vs.5.83±0.68,P〈0.01;1.49±0.9 vs.1.93±0.11,P〈0.05;1.13±0.8 vs.1.93±0.11,P〈0.01),进而减少NO的生成(30.11±3.91 vs.46.73±5.58,P〈0.01;27.18±3.38 vs.46.73±5.58,P〈0.01)。结论 西洋参茎叶皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其抑制NOS和i NOS表达而使NO含量降低,进而减轻大脑神经功能损伤有关。
摘要:目的 改良大鼠急性心肌梗死模型制作方法,提高模型成功率。方法 40只大鼠随机分组为乌拉坦组(A组)、乌拉坦联合利多卡因组(B组)、戊巴比妥钠组(C组)和戊巴比妥钠联合利多卡因组(D组),戊巴比妥钠和乌拉坦常规剂量,联合利多卡因组加2%利多卡因0.1ml/200g,行腹腔麻醉,记录各组麻醉时间、术中恶性心律失常发生率;麻醉后每组大鼠经口气管插管,开胸结扎冠状动脉前降支,记录大鼠死亡率及手术时间;术后48h随机取各组大鼠5只用Evans Blue和TTC染色检测心肌梗死面积。结果 麻醉时间A组(18.7±5.2h)和B组(18.2±6.1h)明显长于C组(3.7±1.3h)和D组(3.8±1.2h)(P〈0.05),A组和B组麻醉时间及C组和D组麻醉时间差别均无统计学意义(P〉0.05);恶性心律失常发生率A组(20%)和C组(20%)明显高于B组(0%)和D组(0%)(P〈0.05),A组和C组及B组和D组恶性心律失常发生率差别均无统计学意义(P〉0.05);死亡率A组(40%)和B组(40%)明显高于C组(20%)和D组(0%)(P〈0.05),A组和B组及C组和D组死亡率差别有统计学意义(P〈0.05),D组死亡率明显低于其他各组(P〈0.05);A组、B组、C组、D组心肌梗死面积分别为72±4%、73±4%、73±2%、73±3%差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 使用戊巴比妥钠联合利多卡因是较好的麻醉方法,改良后模型制作方法单人可独立完成、模型质量较高,值得推广。
摘要:目的 研究探讨姜黄素对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤保护作用的机制。方法 本研究中阿霉素诱导的H9C2心肌细胞损伤模型是以8μmol/L的阿霉素作用于H9C2心肌细胞12h建立的。实验分正常组,阿霉素模型组,姜黄素低、中、高剂量组(10、20、40μmol/L),其中姜黄素低、中、高组先使用姜黄素预处理H9C2心肌细胞4h,后加入8μmol/L阿霉素共同孵育12h。MTT法测定细胞生存率;生化试剂盒检测MDA水平和SOD活性;Caspase-3活性检测试剂盒测定caspase-3活性。结果 与阿霉素模型组比较,姜黄素低、中、高剂量组(10、20、40μmol/L)呈剂量性显著提高细胞存活率(P〈0.05),降低细胞MDA水平和caspase-3活性(P〈0.05);姜黄素中、高剂量组剂量性显著提高SOD的活性(P〈0.05)。结论 姜黄素能够通过提高细胞生存率和SOD活性,降低细胞MDA水平和caspase-3活性而对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤起到抗氧化、抗凋亡的保护作用。
摘要:目的 探讨急性白血病患者PRAME、WT1基因的表达临床意义及其与疾病分型的关系。方法 所西南医科大学附属医院白血病初发患者58例,包括急性髓系白血病(AML)患者36例,急性淋巴细胞白血病(ALL)22例;AL完全缓解组(CR)20例,为同期血液科门诊白细胞或血小板正常或轻度减少,骨髓一致正常人20例为对照,采用Real-time PCR方法对PRAME、WT1基因的表达进行检测。结果 初治组患者的PRAME、WT1相对表达量均显著高于缓解组和对照组(P〈0.05),但缓解组和对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05),跟踪11例白血病初治患者,诱导化疗缓解后两种基因的相对表达量均显著低于诱导化疗前(P〈0.05),WT1阳性表达率为70.7%(41/58),PRAME阳性表达率为56.9%(33/58)。结论PRAME、WT1基因联合检测可提高阳性率,可用于监测白血病患者的微小残留病(MRD),并且PRAME、WT1基因的表达与白细胞的发生、疾病的分型密切相关,对白血病患者的化疗、预后判断以及监测微小病灶具有一定的意义。
摘要:目的 探讨分析防旋型股骨近端髓内钉治疗老年股骨粗隆间骨折的临床疗效;方法 选取78例股骨粗隆间骨折老年患者随机分为观察组和对照组,分别给予防旋型股骨近端髓内钉治疗和动力髋螺钉治疗,比较两组患者手术、术后指标、术后Harris评分、髋关节功能恢复情况及并发症发生情况;结果 观察组患者手术时间、伤口恢复时间、术后下床时间、骨折愈合时间及切口长度较对照组患者均显著缩短,出血量、术后引流量较对照组患者均显著减少,观察患者术后Harris评分为(83.92±4.93),较对照组患者的(71.26±5.28)显著提高,且观察组患者术后髋关节功能恢复优良率为87.18%较对照组患者的66.67%显著提高,观察组患者术后并发症发生率为10.26%较对照组患者的28.21%显著降低,差异均具有统计学意义(P〈0.05);结论 防旋型股骨近端髓内钉治疗老年股骨粗隆间骨折缩短手术时间、伤口恢复时间、术后下床时间、骨折愈合时间,减少出血量,减小切口,降低手术对患者的创伤,促进患者术后恢复,提高患者髋关节功能,降低并发症发生率,值得在临床上推广。
摘要:目的 评估血液检测microRNAs(miRNAs)表达水平对胰腺癌临床诊断的价值。方法 利用软件(Endnote/NoteExpress)和网页检索Pub Med、中国知网(CNKI)、万方数据库等获取miRNAs在胰腺癌患者血液中表达水平的相关文献,采用QUADAS评价系统对纳入文献进行质量评定;用Stata 13统计学软件对纳入数据进行Meta分析,获取miRNAs诊断胰腺癌的灵敏度、特异度等。结果 经过严格的纳入与排除条件,共筛选出7篇符合研究目的的高质量文献,7篇文献共涉及研究人数1801例。所有纳入文献的合并灵敏度、特异度分别是78%和77%,综合受试者工作特征曲线(SROC)下面积(AUC)为0.85(95%CI 0.81~0.87),诊断比值比(DOR)为12(95%CI 8~19)。结论 血液中miRNAs可作为诊断胰腺癌的分子生物学标志。
摘要:目的 观察参附汤血中移行成分对异丙肾上腺素所致心肌肥大大鼠心肌自噬及凋亡的影响。方法 大鼠连续3d以20,10,5 mg·kg^-1递减剂量皮下注射异丙肾上腺素,随后7 d以3 mg·kg^-1的维持剂量注射异丙肾上腺素,制造大鼠心肌肥大模型,大鼠随机分成空白对照组(KB)、模型对照组(MX)、阳性组(YX)、参附汤组(SFT)、参附汤血中移行成份组(YXCF),每组10只。阳性组:腹腔注射6m L/kg的参附注射液,参附汤组:每天以2m L/100g剂量灌胃给药。参附汤血中移行成份组:每天按2m L/100g灌胃给药。空白组及模型组给予同体积蒸馏水灌胃。给药7周后采用实时定量PCR法测定自噬相关基因Beclin1、Atg5和凋亡相关基因Caspase-3 mRNA在不同组中的表达情况。结果 与模型组相比较,参附汤组、参附汤血中移行成分组及参附注射液阳性对照组Caspase mRNA、Beclin1、Atg5mRNA的表达量均明显下降(P〈0.05)。结论 参附汤血中移行成分能抑制心肌肥大大鼠的细胞自噬和凋亡,保护心肌,作用机制是通过降低自噬相关基因Atg5、Beclin-1 mRNA及凋亡相关基因Caspase-3 mRNA的表达。
摘要:目的 对比分析盐酸氢吗啡酮与盐酸吗啡对前列腺电切术后硬膜外镇痛效果;方法 选取86例良性前列腺增生采用前列腺电切术治疗患者,随机分为盐酸吗啡组和盐酸氢吗啡酮组,比较两组患者手术结束时、术后2、4、6、12、24h VAS和Ramsay评分及术后不良反应发生情况;结果 两组患者手术结束时VAS、Ramsay评分差异无统计学意义(P〉0.05),手术结束到术后6h时间段盐酸吗啡组患者的VAS评分高于盐酸氢吗啡酮组患者,Ramsay评分低于盐酸氢吗啡酮组患者,术后6h到术后24h时间段盐酸吗啡组患者的VAS评分低于盐酸氢吗啡酮组患者,Ramsay评分高于盐酸氢吗啡酮组患者,差异均具有统计学意义(P〈0.05),术后6、24h两组患者VAS评分,术后24h两组患者Ramsay评分差异无统计学意义(P〉0.05),两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P〉0.05);结论 盐酸氢吗啡酮与盐酸吗啡对前列腺电切术后硬膜外镇痛均有效果,但是术后6h内盐酸氢吗啡酮的镇痛效果更显著,且未出现不良反应,安全性较高,临床上具有广泛应用的前景。
摘要:目的 探讨布地奈德雾化吸入联合小剂量阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的临床疗效。方法 选取2014年5月至2016年11月我院儿科收治的支原体肺炎患儿62例,按随机数字表法分为两组,对照组31例,给予小剂量阿奇霉素治疗,观察组31例,给予布地奈德雾化吸入联合小剂量阿奇霉素治疗,治疗1周后,比较两组用药效果,并评价其用药安全性。结果观察组退热时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间及住院时间均短于对照组(P〈0.05);观察组治疗总有效率高于对照组(P〈0.05);两组不良反应比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 对支原体肺炎患儿采取布地奈德雾化吸入联合小剂量阿奇霉素治疗的效果较好,改善患儿发热、咳嗽、喘息症状,且用药安全性较好。
摘要:目的 观察活性氧类ROS在齐墩果酸(OA)诱导人白血病细胞株HL60细胞生长抑制中的作用。方法 ROS抑制剂NAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)2mmol/L预处理HL60细胞2h后,以80μmol/L OA处理正常与NAC预处理组细胞0、12、24、48h,通过CCK-8法检测细胞增殖,Westernblot法检测pRb蛋白表达。结果 OA处理后第48h,与对照组比较,OA干预组细胞增殖水平下降(P〈0.05);而NAC预处理组细胞的增殖水平与对照组细胞比较无明显差异(P〉0.05)。OA处理后第48h,Rb蛋白磷酸化水平下调(P〈0.05);而NAC预处理后,OA干预的各个时间组及对照组细胞的pRb水平没有显著差异(P〉0.05)。结论 OA可以通过诱导ROS的生成导致HL60细胞的生长停滞与增殖抑制。
摘要:目的 研究吻合器痔上黏膜环切钉合术(PPH)联合超声刀与传统外剥内扎术治疗重度混合痔的效果。方法选择我院2015年1月至2015年6月103例重度混合痔患者,根据患者意愿分为两组,观察组46例采用PPH联合超声刀治疗;传统组57例采用传统外剥内扎术治疗,比较疗效。结果 联合组疼痛持续时间、创面愈合时间和平均住院时间均短于传统组,止痛药物使用次数少于传统组,平均治疗费用高于传统组(P〈0.05)。联合组和传统组痊愈率分别为97.83%、96.49%(P〉0.05)。联合组伤口水肿、尿潴留的发生率分别为15.22%、12.28%,明显低于传统组的40.35%、28.26%(P〈0.05)。两组控便能力下降、肛门坠胀发生率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 PPH联合超声刀与传统外剥内扎术治疗重度混合痔均可获得好的疗效,但前者具有术后疼痛轻,创口愈合快等优点;后者的优势是手术方法简单,费用低廉,有一定的适应人群,可酌情选择。
摘要:目的 探讨微量泵输入小剂量氢化可的松对顽固性感染性休克患者血流动力学、血糖波动及预后的影响。方法将72例顽固性感染性休克患者随机分为观察组和对照组,观察组给予静脉微量泵入氢化可的松治疗,对照组给予静脉滴注氢化可的松,对比两组治疗前后血流动力学、血糖波动及预后情况。结果 观察组T3、T4和T5时刻的HR水平显著低于对照组,而T2、T3、T4和T5时刻的MAP和EF水平显著高于对照组(P〈0.05);观察组休克持续时间显著短于对照组(P〈0.05),而两组间各时期CVP水平以及MBG、GV、LAGE、高血糖时间窗、总住院时间、ICU住院时间和28d病死率差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 与静脉滴注相比,静脉微量泵入氢化可的松可有效改善血流动力学、稳定血糖波动和缩短休克时间。
摘要:目的 运用弥散张量成像(DTI)技术进行正常成人解剖学意义上的不同部位脑白质的结构进行分析,观测其不同年龄段变化特征的研究,为临床应用提供基础研究依据。方法 以年龄为基准将126名正常成人分成三组,第一组青年组(19岁~39岁);第二组中年组(40岁~59岁);第三组老年组(60岁以上),采用DTI检查技术,得到需要的表面弥散系数(ADC)图以及各向异性分数(FA)图,测量不同解剖部位白质的FA值及ADC值,充分运用统计学分析得出其特点。结果各年龄组FA值以胼胝体压部为最大,青年组、中年组和老年组分别为0.79±0.04、0.78±0.03和0.78±0.04,内囊前肢FA值最小,青年组、中年组和老年组分别为0.63±0.05、0.59±0.03和0.57±0.05。正常成人不同年龄段的脑白质FA值及ADC值存在差异(P〈0.05);正常成人的FA值及ADC值的变化具有一定的规律,FA值随年龄增加而减低,ADC随年龄增高而增高。结论 大脑内白质的结构的微小变化在DTI上可明确显示,FA能对正常成年人各部位的脑白质纤维各向异性进行定量测量。ADC能充分反映水分子扩散程度。