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摘要:目的 研制能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒细菌内同源重组系统。方法 将pBluescriptⅡKDR-tk、ptrack与ptrackCMV质粒转化感受态细菌后扩增,通过PmeI酶线性化穿梭载体ptrackCMV-tk,然后将线性化的穿梭载体ptrackCMV-tk与pAdeasy-1进行重组构建成重组腺病毒质粒;利用整合入重组病毒质粒中的绿色荧光蛋白分别筛选重组后的腺病毒质粒。结果 PCR和RT-PCR分析外源基因的表达证实tk基因在DNA和mRNA水平上均能有效表达;荧光显微镜下观察计数GFP阳性细胞数,计算病毒滴度为1.1×10^11pfu/L。结论 细菌内同源重组系统能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒;绿色荧光蛋白方便早期证实腺病毒的产生。
摘要:目的 探讨直肠癌新辅助化疗对凋亡相关基因bcl-2、bax的影响。方法 对43例局部进展期直肠癌患者,术前通过结肠镜活检证实为直肠癌,采用免疫组化SP法检测bcl-2、bax蛋白的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测直肠癌细胞的凋亡指数。新辅助化疗NCT采用FOLFOX-4两天方案,每2周重复1次,28天为1个化疗周期,完成2个周期进行临床疗效评价后行手术治疗,术后标本应用免疫组化SP法、TUNEL技术观察bcl-2、bax蛋白和AI的变化。结果化疗后直肠癌组织中bcl-2、bax阳性细胞率和细胞凋亡指数分别为(43.29±7.42)%、(72.9±9.18)%和(10.79±3.05)%,与化疗前(65.7±8.53)%、(54.8±7.86)%和(5.38±2.24)%相比较差异有统计学意义(P〈0.01);化疗后部分缓解(PR)病例bcl-2、bax阳性细胞率与无效(NC)病例相比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 新辅助化疗可明显促进直肠癌细胞的凋亡。而且这两种基因的表达水平与新辅助化疗疗效具有显著的相关性;而且这两种基因的表达水平有可能成为进展期直肠癌化疗疗效的预测指标。
摘要:目的 探讨延长针刺式空肠造口置管肠内营养在进展期胃癌术后辅助化疗中应用的可行性及其临床疗效。方法 将72例进展期胃癌术后辅助化疗患者随机分成A、B两组,每组36例;两组病例均于术中放置针刺式空肠造口管,A组延长空肠造口管留置时间至6个化疗疗程结束,每个化疗疗程经空肠造口管给予肠内营养液瑞能,每天1500ml,共7天,B组则于化疗前拔除空肠造口管,每个化疗疗程给予等热量普通饮食;观察A组延长空肠造口管留置及肠内营养并发症的发生率,比较两组化疗期间呕吐发生率及平均每日摄入量,比较两组化疗前后体重、血红蛋白、血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白及血清白介素-2、NK细胞活性、T淋巴细胞亚群(CD^3+、CD^4+、CD^8+)比例的变化情况。结果 A组延长空肠造口管留置及肠内营养无严重并发症发生;化疗期间A组呕吐发生率显著少于B组,平均每日摄入量显著多于B组;A组化疗前后体重、血红蛋白、血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、IL-2、NK细胞活性、CD3+、CD4+、CD8+比例变化显著少于B组(P〈0.001)。结论 进展期胃癌术后辅助化疗期间延长针刺式空肠造口置管肠内营养是安全可行的,并具有减轻化疗呕吐,提高患者摄入量等优点,可以减少化疗药物对患者营养及免疫状况的影响,提高患者术后辅助化疗的耐受性及治疗效果。
摘要:目的 检测结肠癌患者门静脉血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床价值。方法 采用实时荧光定量RT-PCR检测31例病理学确诊的结肠癌患者门静脉血和20例健康对照者外周血CK20mRNA的表达水平。结果 结肠癌患者中CK20mRNA阳性率为25.81%,而对照组阳性率为5%,两者相比差异有统计学意义(P〈0.025)。随着临床分期的具体化,患者门静脉血中CK20mRNA表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义(P〉0.05)。DukesLC期与D期患者中〉10拷贝/ml者高于A期与B期患者。结论 术中检测结肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达水平,对判断肝脏微转移有一定的提示意义。
摘要:目的 探讨P-糖蛋白(P-gp)基因突变与乳腺癌多药耐药的关系。方法 本组自2004年3月至2006年4月采用MTT法检测52例乳腺癌标本对四种化疗药物的敏感性,PCR扩增P-gp基因中最常发生突变的250个碱基进行单链构象多态性(SSCP)分析,将其核苷酸序列与野生型P-gp基因进行比较。结果 52例乳腺癌组织中8例对四种抗癌药物均敏感,无P-gp基因突变;19例对一种抗癌药物耐受,其中仅一例P-gp基因发生点突变;16例对两种抗癌药物耐受,其中两例发生P-gp基因点突变;7例和2例分别对三种抗癌药物耐受和四种抗癌药物耐受,它们的P-gp基因都发生了点突变。P-gp基因突变位点分别为891gly位(GGC→GAC)asp和1145位his(CAC→TAC)tyr。结论 P-gp基因突变介导乳腺癌多药耐药,P-gp基因产物891位gly(GGC→GAC)asp和1145位his(CAC→TAC)tyr的突变与乳腺癌多药耐药密切相关。
摘要:目的 探讨直肠癌根治术中骶前大出血的原因及纱布填塞压迫法治疗骶前大出血的临床应用价值。方法 对我院2001年1月-2006年9月的直肠癌患者术中发生的5例骶前静脉大出血的原因及纱布填塞法压迫止血治疗的经验进行回顾性分析。结果本组患者1例因用手指分离至骶尾部时撕破骶前筋膜致骶前静脉破裂出血,2例为未进入正常解剖层次盲目钝性分离骶前筋膜而引起出血,2例因术中骶前静脉出血处理不当致大出血,均使用纱布填塞压迫法后很快止血成功,顺利完成手术。术后72小时去除纱布,无再次继发性出血发生,患者恢复好,随访无不良反应。结论 直肠癌根治术中未能掌握正确的解剖层次或操作方法失当是骶前静脉丛大出血主要原因.纱布填塞压迫止血是处理骶前静脉破裂大出血可靠的方法。
摘要:目的 探讨胰腺损伤的诊断及治疗方法。方法 回顾性分析1994~2005年收治的34例胰腺损伤患者的临床资料。Ⅰ级胰腺损伤11例,Ⅱ级12例,Ⅲ级7例,Ⅳ级3例,Ⅴ级1例,其中27例(79.4%)合并其它腹腔脏器损伤,21例(61.8%)合并休克。结果 全部34例均行手术治疗。全组仅12例(35.3%)术前确诊。治愈32例,治愈率94.1%;2例死亡,死亡率5.9%。结论 胰腺损伤早期诊断困难,应高度警惕。对怀疑或诊断为胰腺损伤者,应尽早手术探查,并根据损伤的部位及严重程度,选择合理的手术方式。
摘要:目的 通过Meta分析,探讨吉西他滨联合伊立替康治疗晚期胰腺癌的地位和价值。方法 通过MEDLINE、EMBASE、ASCO论文集等数据库检索国内外已发表和未发表的相关文献。选择治疗组为吉西他滨联合伊立替康化疗,对照组为吉西他滨单药化疗的晚期胰腺癌随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)。由2位评价者分别按上述检索策略收集资料,按纳入标准入选,主要对总生存率进行Meta分析,其次是客观缓解率和毒副反应。结果 共纳入3个RCT。吉西他滨联合伊立替康化疗与吉西他滨单药化疗比较,前者半年生存率及一年生存率均无差别(P值分别为0.88,0.97),客观缓解率提高9%(P=0.0009);同时WHO3/4度骨髓毒性(除中性粒细胞减少症外)及非骨髓毒性可能增加:血小板减少症增加2%(P=0.46)、贫血增加1%(P=0.58),恶心/呕吐增加6%(P=0.34)、腹泻增加10%(P=0.10),但均未取得统计学意义。结论 现有证据不推荐吉西他滨联合伊立替康一线治疗晚期胰腺癌。
摘要:目的 探讨对常规胆囊切除术困难病例行胆囊部分切除手术的适应症及治疗方法。方法 回顾性分析两院1998.6—2006.6年间行胆囊部分切除术的52例患者的临床资料。结果 术后47例效果良好。手术后发生并发症5例,其中胆囊残株炎2例,膈下脓肿1例,胆漏1例,继发胆总管结石1例;这5例术后并发症经治疗均获痊愈。结论 对胆囊坏疽、囊壁质脆、胆囊三角区水肿粘连严重,解剖不清的胆囊炎、胆囊结石患者行胆囊部分切除术是安全可行的。
摘要:目的 探讨腹腔镜脾切除术在治疗特发性血小板减少性紫癜中的应用,手术方法及临床效果。方法 对我科于1999年6月-2006年6月期间的24例7特发性血小板减少性紫癜在腹腔镜下行脾切除术进行回顾性分析。结果 本组24例腹腔镜脾切除术中,22例是顺利完成脾切除术,2例是分别由于术中脾蒂出血.胃短血管出血而中转开腹脾切除术。22例腹腔镜脾切除中,平均手术时间为150rain,术中平均失血量为100m1.术后胃肠蠕动恢复时间为10—24h,平均住院时间为4d。术后未发现有并发症。结论 腹腔镜脾切除术是治疗特发性血小板减少性紫瘢安全可行的最佳方法之一。
摘要:目的 探讨ERCP与PTC辅助介入方法对肝移植术后胆道并发症治疗的临床价值。方法 2001年3月至2006年11月进行的肝移植45例中.术后出现胆道并发症16例.治疗方法主要包括经内窥镜逆行胆胰管造影(ERCP)或经皮肝穿刺胆管造影(PTC)辅助介入治疗。结果 经ERCP及PTC行胆道球囊扩张术、内支架植入术及内、外引流术分别治疗肝移植后单纯胆瘘1例、单纯胆道狭窄11例、胆道狭窄合并肝动脉狭窄2例及胆管狭窄并胆泥形成2例。所有病例均能有效改善患者症状。结论 ERCP及PTC辅助介入方法对于治疗肝移植术后胆道并发症治疗具有创伤少,安全有效,可重复性等优点,是肝移植术后胆道并发症较佳治疗方法。
摘要:目的 探讨新辅助化疗对乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67表达的影响。方法 通过免疫组化检测化疗前后38例乳腺癌ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67的表达。结果 新辅助化疗前后ER、PR状态各有9例发生变化,C-erbB-2状态各有8例发生变化,P53状态各有10例发生变化,比较差异均无统计学意义;Ki-67状态有17例发生改变,比较差异有统计学意义。结论 新辅助化疗对ER、PR、C-erbB-2、P53表达状态无显著影响,而能显著降低Ki-67的表达。
摘要:目的 探讨肠系膜静脉血栓形成(MVT)的早期诊断及治疗方法。方法 回顾性分析自1986年1月至2006年1月29例MVT患者的临床资料。结果 MVT29例患者中有21例为急性症状包括腹痛腹胀、恶心呕吐、便血等。彩色多普勒超声的检出率81.0%;腹部CT/MR的检出率为100%。非手术治疗包括抗凝、溶栓及对症等,治愈率81.3%;手术治疗13例,包括肠切除和切除肠系膜静脉血栓,手术并发症23.1%(3/13例),其中顽固性腹水2例,进食后腹痛1例。术后随访3个月至5年,复发6例,系出院后自行停用抗凝药物。结论 彩色多普勒超声和CT/MR扫描对MVT的早期诊断有较高的诊断价值;抗凝治疗和手术是MVT有效的治疗手段。
摘要:目的 探讨改良Alvarado评分系统在小儿阑尾炎诊断中的应用价值。方法 用改良Alvarado评分系统评估我院自2001年6月至2006年6月经手术证实并治疗14岁以下小儿阑尾炎患者共208例,对评分结果与病理诊断进行分析。结果 评分分值与病理分级成正相关(r=0.510,P〈0.01)。结论 提示改良Alvarado评分系统在诊断小儿急性阑尾炎与确定外科手术治疗上有一定价值。
摘要:目的 探讨平片在腹股沟疝无张力疝修补术中的应用。方法 对我科2003年10-2006年10月收冶的125例腹股沟疝患者采用平片无张力腹股沟疝修补术的疗效进行回顾性分析。结果 所有患者均治愈出院,术后无切口感染,除2例残留疝囊处血肿外无其他不良并发症,随访2个月~36月无复发。结论 平片应用于腹股沟疝的修补,具有易掌握,疗效好,费用低,值得广泛开展应用。
摘要:目的 评价无张力疝修补术在滑疝治疗中的疗效,探讨适应症,解剖学基础及术中应注意的问题。方法 回顾性分析我院2002年1月至2004年12月采用疝环充填式网塞和普里灵疝装置(PHS)行无张力疝修补术治疗滑疝8例。结果 除1例术后有轻度皮下积血外,其余7例无术后并发症发生,均在术后7—10天出院。随访8~20个月,无1例术后复发。结论 疝环充填式网塞和普里灵疝装置(PHS)无张力疝修补术均能较好地修补腹股沟滑疝;应根据患者的具体情况选择个体化修补方案,方可提高手术效果。
摘要:目的 探讨腔镜下甲状腺切除术的方法以及可行性。方法 对我院2005年3月至2006年3月收治的34例甲状腺疾病行经胸入路腔镜下甲状腺切除术的临床资料进行回顾性分析。结果 腔镜下成功完成手术33例,中转开放手术1例。手术时问60~240min,平均120min,术中出血量10~50ml。无神经、甲状旁腺损伤及其他并发症发生。31例随访3~15个月,复查B超均未复发。结论 经胸入路腔镜下甲状腺切除术是安全可行的,且具有良好的美容效果。