摘要:克隆转录因子SP1并构建其真核表达载体;在双荧光素酶基因检测报告系统下观察3种MAPK信号通路抑制剂调控SP1对不同长度的MEPE基因表达的调控作用,以分析转录因子SP1作用于MEPE基因的显著区段,并利用实时定量RT-PCR法分析SP1调控MEPE基因的表达。根据双荧光素酶基因检测报告系统的研究表明在小鼠前成骨细胞中,SP1可以抑制MEPE基因的转录活性,在(-1 081~66)1 147 bp片段区域内抑制作用较为显著,SP1可通过抑制JNK途径抑制MEPE基因的转录活性;实时定量RT-PCR法分析再次验证SP1抑制MEPE基因的表达水平。这表明转录因子SP1对MEPE基因表达具有显著的调节作用,从而表明转录因子SP1在骨形成发育过程中起到重要的生物学意义。
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