摘要:谷胱甘肽(glutathione,GSH)是生物体内的非蛋白巯基类化合物,具有抗氧化、抗衰老和重金属解毒等重要的生理功能。本研究从烟草(Nicotiana tabacum L.)中克隆到谷胱甘肽合成酶基因Nt GSH2,该基因编码555个氨基酸残基的蛋白质。氨基酸序列比对和进化树分析发现,Nt GSH2与其他植物同源蛋白具有较高的一致性,且与枸杞(Lycium chinense)Lc GSHS/Lc GS和番茄(Solanum lycopersicum)Sl GSH2归为一类,亲缘关系最近。组织表达模式分析表明,Nt GSH2基因在烟草的根、茎、叶、花和种子中均表达,其中在花中的表达量最高,在种子中的表达量最低。实时荧光定量PCR检测表明,Nt GSH2受Cd Cl2和Zn Cl2诱导表达。将Nt GSH2连接到原核表达载体p ET32a上,转化获得含有Nt GSH2基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌并成功表达目的蛋白。该研究结果为进一步分析Nt GSH2基因功能及谷胱甘肽的生物合成提供了一定的理论依据。
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