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基因组学与应用生物学 2007年第B06期杂志 文档列表

基因组学与应用生物学杂志生物技术专栏

同源片段大小对板栗疫病菌同源重组频率的影响1-6

摘要：低毒病毒／板栗疫病菌系统是一个具有独特优点的、崭新的研究病毒与宿主相互作用的模型系统。以同源重组为基础的基因打靶是研究基因功能和病毒与宿主相互作用分子机制的重要手段。为了研究在板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小对同源重组频率的影响，利用一段5．4kb板栗疫病菌染色体DNA序列，构建了以潮霉素抗性基因为遗传转化筛选标记的3个同源双交换片段以及3个同源单交换质粒，分别转化板栗疫病菌EPl55原生质体，检测筛选同源重组转化子并计算发生同源重组频率。结果表明，在板栗疫病菌中3个同源双交换片段FHA1（1．7～2.0kb）、FHA2（1.0～1.2kb）和FHA3（0.5kb）的同源重组频率分别为3．73％、2。06％和0；3个同源单交换质粒pFHl（1．76kb）、pFH2（1．23kb）和pFH3（O．54kb）的同源重组频率分别为0.95％、0和0。这些结果为板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小的设计提供了依据。

G418抗性筛选标记在板栗疫病菌中的应用7-11

摘要：板栗疫病菌一低毒病毒系统．是一个优良的研究植物病原真菌致病和病毒一宿主相互作用分子机制的模型。随着研究的深入，原有的苯菌灵和潮霉素两个遗传转化筛选标记已不能满足研究需要。文章报道构建一个由构巢曲trpC启动子驱动的G418抗性Neo基因盒，并成功应用于板栗疫病菌的遗传转化研究。

丘状乳杆菌中二醇脱水酶激活因子pduGH的克隆与功能鉴定12-15

摘要：以丘状乳杆菌（Lactobacilluscollinoides）基因组DNA为模版，通过PCR方法得到二醇脱水酶激活因子基因pduGH，连接到表达载体pET30a上，得到重组质粒pET—pduGH。将此重组质粒转化到Escherichia．coliRosseta（DE3）中进行表达，重组菌株SDS—PAGE结果显示有明显的64．5ku和12．4ku两条特异性蛋白。表达的目的蛋白大多为不溶性的包涵体，经变性、复性后得到部分可溶性蛋白。在辅酶B12，ATP，Mg^2＋或Mn^2＋存在下，以Clostridiumpasteurianum甘油脱水酶为对象进行激活实验，结果证实，重组质粒pET—pduGH的表达产物具有甘油脱水酶激活活性。

产L-乳酸的大肠杆菌基因工程菌的构建16-21

摘要：含有质粒pKD46的菌株BW25113．在L-阿拉伯糖诱导后，表达λ噬菌体的3个重组蛋白Exo、Bet和Gain，宿主菌就具有了同源重组的能力。利用λ噬菌体的Red重组系统构建了D-（＋）-乳酸脱氢酶基因（1dhA）、乙醇脱氢酶基因（adhE）双突变的大肠杆菌BW25113C工程菌株和乙酸激酶基因（ackA）单突变的大肠杆菌BW25113工程菌株。将表达牛链球菌L-乳酸脱氢酶基因（1dhL）的pSE380质粒转化到BW25113C菌株中发酵培养35h，用HLPC检测产物，尚未发现L-乳酸。

一株产邻苯二酚假单胞菌的筛选及其发酵条件的优化22-26

摘要：从土壤中筛选到44株产邻苯二酚的菌株．其中X16菌株转化苯甲酸钠产生邻苯二酚的活性最高，根据其形态特征观察、16SrDNA序列同源性比较．初步鉴定为假单胞菌（Psudomonas sp．）。经过发酵条件优化后，发现该菌最适发酵的碳氮源分别为苯甲酸钠6g／L和聚蛋白胨2g／L；最适温度为32℃；最适pH为6.7；最适发酵时间为22h。在上述发酵条件下，该菌产邻苯二酚的能力达到1mg／mL，比条件优化前提高了25％o。

转染方法对肌肉生长抑制素基因敲除载体转染效率的影响27-31

摘要：本研究主要探讨转染方法对不同细胞系的转染效果。实验采用电穿孔和脂质体转染方法，将线性化的绵羊肌肉生长抑制素基因（myostatin）药物正负筛选（PNS）打靶载体pLoxp-1．4K-4．3KDNA导人体外培养的绵羊胎儿和成年绵羊耳部成纤维细胞中，而后采用G418和GANC进行药物抗性细胞克隆筛选和培养。结果发现，脂质体法对myostatin基因敲除载体的转染效果明显优于电击法，但电穿孔法对细胞类型的依赖性较小；采用与载体基因型相同的细胞系，两种转染方法的转染效率均略高于对照成年绵羊成纤维细胞系。

基因组学与应用生物学杂志珍稀濒危生物专栏

广西防城港市金花茶组植物资源及其保育对策32-37

摘要：广西防城港市是珍稀植物金花茶的故乡，对该市金花茶组植物资源全面的调查研究，结果显示：（1）市域范围内分布金花茶组植物3种1变种．即金花茶（Camellianitidissima）、东兴金花茶（C．tunghinensis）、显脉金花茶（C．euphlebia）及长柱金花茶（C．nitidissimavar．10ngistyla）；（2）金花茶组植物分布点290个，分布总面积2117．5hm^2，总株数118万株．植株高度级以≤1．0m的株数占优势，各密度级（单位面积株数）面积的大小顺序是散生〉稀疏〉中等〉密集；（3）金花茶组植物主要分布于天然林。剖析了该市金花茶组植物资源保护中存在的主要问题，并提出相应的保育对策。

影响蒜头果离体胚乳愈伤组织培养的几种因子38-41

摘要：四种基本培养基（MS、B5、N6和SH）的试验结果表明，MS和N6两种基本培养基适宜蒜头果胚乳愈伤组织培养；在相同的2，4-D和6-BA激素配组中，附加低浓度的GAs（O．5mg／L）有利于胚乳愈伤组织的诱导；添加甘氨酸和椰乳（CM）对悬浮培养愈伤组织的诱导不适宜。愈伤组织继代增殖培养的适宜培养基为MS＋2，4-D2．0mg／L＋KT0．2mg／L＋GA30．2mg／L和N6＋2，4-D2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L＋GA30．6mg／L。

基因组学与应用生物学杂志动物科学·动物医学

甘油对山羊冻精效果的研究42-44

摘要：采用细管法冷冻保存山羊精液，以甘油作为冷冻保护剂．探讨了加入不同浓度的甘油以及在不同时间加入甘油对精液冷冻效果的影响。结果表明：（1）在稀释液中加入甘油6％和7%．精液的冻后活率与复苏率均显著高于加入3％和5％组（冻后活率：0．49±0．75，0．46±0．80VS0．20±0．56．0．31±0．86．P〈0．05；复苏率：0．65±0．80，0．61±0．56VS0．27±0．65．0．41±0．42，P〈0．05），以添加6％的甘油的精液冷冻效果较好。（2）在配液时加6％甘油的处理组在冻后活率与复苏率都显著低于在4℃平衡后加甘油处理组（0．28±0．82VS0．34±0．67；0．37±1．0vs0．45±0．95，P〈0．05）。说明在山羊精液冷冻保存中．加入甘油的时间为4℃平衡后冻结前为较好。

蕨麻多糖对小鼠免疫功能的调节与体内自由基水平关系的实验察45-48

摘要：为观察蕨麻多糖（PAP）对免疫功能低下小鼠免疫器官组织内活性氧自由基和抗氧化能力的影响，用地塞米松（Dex）为免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型，测定了小鼠胸腺和脾脏指数、抗超氧阴离子（O2^-）能力、抑制羟自由基（·0H）能力、胸腺中还原型谷胱甘肽（GSH）含量，血浆中总抗氧化能力（T—AOC）、丙二醛（MDA）水平。结果表明：蕨麻多糖能显著提高免疫功能低下小鼠脾脏指数、胸腺指数、GSH含量、T—AOC、抗O2^-能力、抑制·OH能力，降低免疫功能低下小鼠血浆中MDA水平。表明蕨麻多糖能拮抗地塞米松引起的免疫抑制，可通过调节自由基水平而影响机体免疫系统的功能。

微量元素氨基酸螯合物对生长猪生产性能和血清微量元素含量的影响49-53

摘要：用微量元素氨基酸螫合物按不同比例替代生长猪饲粮中无机微量元素，研究其对生长猪生长性能和血清微量元素含量的影响。用0、12．5％、25．0％和37．5％的氨基酸螫合铁、铜、锌、锰分别替代基础日粮中的相应无机元素的0、25％、50％和75％，分4个处理，每处理3个重复，每个重复4只猪，实验期56d。实验结果表明：添加微量元素氨基酸螫合物对生长猪的生长性能有一定的改善作用，与对照组（1组）比较．2、3、4组的平均日增重分别提高9．85％（P〈0．05）、7．51％（P〉0．05）、1．34％（P〉0．05）饲料增重比（F／G）分别比对照组降低6．74％（P〈0.05），7．45％（P〈0．05）．1．42％（P〉0．05）；血清中微量元素铁（Fe）、锌（Zn）、铜（Cu）、锰（Mn）含量比对照组均有所增加。微量元素螫合物替代无机元素的适宜比例为25％。

α-亚麻酸对良凤花鸡生产性能、养分利用率及肉品质的影响54-57

摘要：试验选用120只5周龄雌性良凤花肉鸡，随机分成对照组（不加α-亚麻酸）和试验组（添加0．125%的α-亚麻酸），每组设3个重复．每个重复20只鸡．以研究α-亚麻酸对广西地方肉鸡生产性能及肉质品质的影响。经饲养试验、消化代谢试验、屠宰测定及肉品尝试验等，结果表明：饲粮中添加α-亚麻酸，鸡的增重、屠宰成绩及饲粮养分利用率等有所提高，但统计分析差异不显著（P〉0．05）；胸、腿肌含脂率却显著高于对照组（P〈0．01）。试验组鸡肉香味、口感等都优于对照组。从本次试验看．日粮中添加0．125％α-亚麻酸，能很好地改善鸡肉品质。

桂牧1号象草营养价值评定及PEG对其产气量的影响58-61

摘要：用体外产气法测定了桂牧1号象草不同月份、不同高度的产气量及添加聚乙二醇（PEG）对产气量的影响。结果显示：（1）桂牧1号象草各月份的干物质含量比较为：11月〉10月〉9月〉4月。其中，1．0m左右及1．0m以上的象草的干物质含量明显较高（P〈0．01）。（2）在体外产气法实验中添加PEG能显著增加样品12h和24h的产气量（P〈0．01），证明象草中所含有的抗营养因子对黑山羊瘤胃微生物活动有一定的制约作用。（3）9、11月份象草的最佳刈割高度应为1．5m左右，4、10月份象草的最佳刈割高度应为1．0m左右。（4）4月、9月份的象草，添加PEG后产气量提高率较高。利用此时期的象草喂食黑山羊时，适当做PEG处理可以提高象草的饲用价值。

不同单一饲料及其搭配对养殖中华真地鳖效果的对比研究62-65

摘要：采用单一饲料的玉米、麦麸、米糠以及由它们配制成的粗蛋白质含量分别为13．5％、15．1％和16．5％的三种配合饲料共六种饲料搭配投喂模式，研究其对养殖中华真地鳖效果的影响。结果表明：（1）中华真地鳖分别摄食三种配合饲料后的生长速度均比三种单一饲料的要快，其中以投喂粗蛋白质含量为15．1％组的生长速度最快。（2）分别投喂三种单一饲料的中华真地鳖，除玉米组外的其余两组，其饲料成本均明显低于三种配合饲料各组，并且以投喂麦麸组所取得的经济效益最显著。

大菱鲆主要器官的组织学观察66-69

摘要：应用光学显微技术对大菱鲆（Scophthalmusmazimus）心脏、胃、肠、肝脏、胰脏、脾脏、肾脏的结构进行了组织学观察。结果显示，大菱鲆的心脏分为心内膜、心肌层和心外膜，其中以心肌层为最厚。胃、肠的管壁由内向外分为：黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜。胃腺内偶见含有嗜酸性颗粒的细胞。肠皱襞较高，黏膜上皮为单层柱状上皮．杯状细胞散在于柱状上皮细胞之间。肝细胞体积较大．呈多边形,肝细胞以中央静脉为中心，排列成凹凸不平的肝细胞索，相邻的肝细胞索互相吻合连接成网状。胰脏大部分附着于肠壁上，少部分埋藏在肝脏内。脾脏实质分为白髓和红髓，中央动脉数量较多。肾脏无皮质髓质之分，由肾小体和肾小管构成。

断奶仔猪多系统衰竭综合症的病理组织学观察70-73

摘要：断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）是由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的一种疾病。对来源于广西各区域15个猪场内经过PCR检测PCV2为阳性的PMWS病猪的器官组织进行病理组织学观察，结果显示：淋巴结和脾脏中的淋巴细胞明显减少，淋巴滤泡结构消失，其间有明显的组织细胞增生。脾小体结构不明显，有部分病例明显观察到嗜酸性细胞浸润；混合感染猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的病例其淋巴结尚见有局灶性坏死区以及明显的充血；肺里支气管周围炎及间质性肺炎变化，肺泡壁Ⅱ型细胞肿胀，变圆，巨噬细胞数量增多，继发细菌性感染的病例在支气管内尚见有明显的嗜中性粒细胞浸润；肝细胞变性坏死．尤其在肝小叶区．见多核聚集现象；肾小管不同程度萎缩、坏死，间质明显水肿。

速眠新Ⅱ对犬血流动力学和肝肾功能的影响74-77

摘要：采用颈动脉插管的方法，结合BL-410智能型生物学模块和血清生化学方法，探讨速眠新Ⅱ对杂种犬血流动力学和肝肾功能的影响，以便为临床上合理应用速眠新Ⅱ提供理论依据。结果表明：（1）动脉收缩压（SP），动脉舒张压（DP），动脉平均压（AP）左心室收缩压（LVSP），左心室舒张压（LVDP）．以及左心室终未舒张压（LVEDP）均呈现上升趋势（P〉0.05）；（2）左心室内压最大上升速率（dp／dtm）明显延长；（3）血清白蛋白（ALB）、血清总蛋白（TP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）和血清谷丙转氨酶（ALT）的含量均呈现下降趋势，其中TBIL和CRE下降幅度最大（P〈0．05）。由此表明，速眠新Ⅱ对犬的动脉血压有一定的影响，但对心脏的收缩和舒张功能无明显影响．对肝肾功能影响轻微。

基因组学与应用生物学杂志农学·园艺·植物保护

四种碱土金属元素对大豆初生根铝胁迫的影响78-81

摘要：在0．5mmol／LCaCl2的培养液（pH4．5）中，AlCl3对大豆初生根的伸长构成胁迫：以80μmol／LAlCl3处理24h，铝胁迫对大豆初生根伸长的抑制率超过50％。在80μmol／LAICI。的胁迫条件下，在培养液中添加不同浓度的钙、镁、钡、锶的氯化盐，结果表明：提高培养液中钙或镁的浓度可以缓解大豆初生根伸长的铝胁迫，而钡和锶在本试验条件下对大豆初生根的铝胁迫无明显影响。