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摘要:目的 探讨不同化学发光检测系统测定人生长激素(hGH)水平的可比性。方法 对15例做人生长激素(hGH)激发试验的患儿采集75份静脉血标本(基础水平、激发试验后30、60、90、120min),使用3种化学发光系统:化学发光酶免疫分析系统(CLEIA)、电化学发光免疫分析系统(ECLIA)和微粒子化学发光免疫分析系统(CMIA),同时测定血清hGH水平,并计算各时间点hGH与其基础水平的比值(hGH-R),进一步使用Bland-Altman法对方法学间的一致性进行分析。结果(1)CLEIAECLIA间只有基础水平、ECLIA-CMIA间于激发试验后120min hGH水平具有较好一致性。其余任意2个检测系统间、于任何时间点hGH水平均不一致。(2)引入hGH-R后,只在ECLIA-CMIA间、于激发试验后30min具有较好的一致性,其余各时间点、任意2个检测系统间均不一致。结论 血清hGH水平仅偶尔在特定检测系统间、于激发试验特定时间点具有一致性;hGHR的引入,对提高hGH在各检测系统间的可比性帮助不大。
摘要:目的 探讨多发性骨髓瘤患者(MM)血清单克隆免疫球蛋白(M蛋白)轻、重链型别分布的规律,以及不同重链型患者血清或尿液中游离轻链的检出状况。方法 对采用免疫固定电泳对312例MM患者血清M蛋白进行分析的结果(不含非分泌型)进行回顾性分析。结果 在312例MM患者中,IgG型、游离轻链型、IgA型和IgM型分别占62.82%、20.51%、15.38%和1.28%。IgG和IgM重链型MM患者均分别以κ轻链为主,κ∶λ=1.55∶1.00和3.00∶1.00,而IgA以λ轻链为主,κ∶λ=0.71∶1.00。IgG型MM患者中,血液中检出游离轻链的患者占43.88%,显著高于IgA型的20.83%和IgM型的25.00%(P=0.003、0.004)。血液中检出游离轻链的IgA型MM患者,其尿液中有70.00%亦同时出现游离轻链,这一比例显著高于IgG型的16.28%(P=0.000)。结论 MM患者仍以IgG型为主,游离轻链型居于第2位。MM患者的重链分型,与血液或尿液中检出游离轻链的概率高低有关。
摘要:目的 探讨以Ref-1为靶点的基因治疗在大肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗增敏中的作用及其可能机制。方法 构建Ad5/F35-Ref-1小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒(siRef-1)敲低Ref-1蛋白表达,MTT法检测不同剂量5-FU作用LOVO细胞存活率的改变;TUNEL法检测LOVO细胞凋亡;Western blot检测Ref-1蛋白表达;EMSA测定核转录因子κB(NF-κB)的DNA结合活性。结果 感染siRef-1腺病毒较感染对照腺病毒的LOVO细胞对5-FU的敏感性明显增强,半数抑制浓度(IC50)分别为1.69、7.04μmol/L;且siRef-1显著增加5-FU诱导的细胞凋亡。5-FU呈剂量依赖性诱导LOVO细胞Ref-1蛋白表达,同时伴有NF-κB活性增强。siRef-1抑制5-FU诱导的LOVO细胞Ref-1蛋白表达以及NF-κB激活。结论 以Ref-1为靶点的治疗显著增强大肠癌细胞5-FU化疗敏感性,其机制可能主要是通过抑制大肠癌细胞NF-κB活性和碱基切除修复功能。
摘要:目的 建立一种检测血清25-羟维生素D2[25(OH)D2]和25-羟维生素D3[25(OH)D3]的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,以用于常规临床评价维生素D水平。方法 以稳定同位素标记的25(OH)D2-d3和25(OH)D3-d3作内标,血清标本和标准品采用饱和硫酸锌和乙腈沉淀血清蛋白,正己烷提取。采用HPLC-MS/MS技术进行分析,固定相为Poroshell 120EC-C18正向柱,电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式(MRM),干燥气温为275℃,干燥气流为10L/min,喷雾器压力为50psi,毛细管电压为5 000V。以甲醇(80%)和超纯水(20%)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,柱温为50℃,质谱采用高温ESI,以选择反应监测模式进行定量分析。结果 25(OH)D2和25(OH)D3内标峰面积比与对应的水平线性相关系数均大于0.995,检出限(LOD)均为1.0ng/mL,定量限(LOQ)分别为2.0ng/mL和1.5ng/mL,25(OH)D2批内和总变异系数分别为3.01%~5.23%和3.45%~8.72%,25(OH)D3批内和总变异系数分别为1.78%~3.43%和2.19%~4.16%,准确度分别为105.4%和98.0%~104.9%,加样回收率分别为99.67%~103.92%和98.72%~104.04%。结论 本研究建立的HPLC-MS/MS方法检测血清中25(OH)D2和25(OH)D3灵敏度高,准确性好,可用于常规临床评价维生素D含量。