两种分析miRNA相对表达量方法的比较研究
摘要：目的基于实时反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）基因表达相对定量的分析方法：GenEx软件分析与2（-△△CT）法，建立一种简便、准确的miRNA相对定量方法。方法以HK-2细胞系cDNA为模板，进行PCR扩增，确定最佳退火温度；再倍比稀释该模板，用荧光定量PCR测定的ct值作miR-122和miR-16的标准曲线，计算出相应miRNA的扩增效率。用荧光定量PCR测定健康者和乙型肝炎患者血清中内参miR-16和靶基因miR-122的表达，分别采用GenEx软件分析与2（-△△CT）法来评价相对表达量。结果系列稀释法制作的标准曲线呈现较好的线性相关性，两种miRNA的标准曲线r2值均为0．999，miR-16的扩增效率为97％，miR-122扩增效率为107％。2（-△△CT）法分析乙型肝炎患者血清中miR-122的表达较健康者增高了44．3倍，而GenEx软件分析为54．1倍。结论GenEx软件分析考虑了更多的影响因素，其结果比（-△△CT法更可靠，适用于临床分析。动脉粥样硬化性肾动脉狭窄介入治疗与药物治疗的临床分析
摘要：目的动脉粥样硬化性肾动脉狭窄（ARAs）与心血管疾病等密切相关，介入治疗能解除动脉狭窄，但其临床疗效却受到质疑，本实验通过严格把握介入治疗指征，分析ARAs患者单纯药物优化治疗与药物合并介入治疗的临床疗效。方法选择2010年1月至2011年1月确诊为ARAS，其肾动脉狭窄程度大于或等于70％的患者，通过综合评价肾脏情况（肾脏大小、肾动脉狭窄程度、患侧肾小球滤过率、动脉狭窄处血流压力阶差等）、临床并发症等，选择药物优化治疗组（拒绝行介入治疗患者）或药物优化合并介入治疗组，记录患者治疗前后血压、血清肌酐、心功能、心血管事件、再入院次数等，随访1年，评价单纯药物优化治疗与介入合并药物治疗的临床疗效。结果共入选120例患者，介入组48例，药物组72例，两纽基础资料差异无统计学意义，介入纽治疗前后血压下降明显，其中3例治愈，24例血压改善，21例无效，服用降压药物数量前后比较差异无统计学意义，平均肌酐轻度降低；药物组需要服用更多降压药物控制血压，平均肌酐轻度升高。在ARAs合并心衰患者分组中，介入合并药物治疗能改善心衰患者心功能，减少1年内因心衰、心绞痛、肺水肿及再住院次数。结论介入合并药物治疗能更好地改善ARAS患者心功能，两者对血清肌酐改善均无明显影响。尿免疫球蛋白转铁蛋白α1-微球蛋白与尿肌酐比值参考区间的建立与评价
摘要：目的建立重庆地区健康成人尿免疫球蛋白（尿Ig）、尿转铁蛋白（TRF）、尿α1-微球蛋白（α1-M）与尿肌酐（Cr）比值的参考区间，并进行评价。方法从健康体检者筛选符合条件的受试者135例，测定尿Ig、尿TRF、α1-M、cr值，并计算尿Ig、尿TRF、α1-M与尿Cr比值的参考区间；并对42例确诊为肾病患者和42例无肾病对照的尿Ig、尿TRF、α1-M与尿Cr比值的结果进行评价。结果建立的重庆地区尿Ig、尿TRF、α1-M与尿Cr比值参考区间分别是：尿Ig／Cr为14．1～130．8mg／g；尿TRF／Cr为9．72～81．3mg／g；尿α1-M／Cr为23．0～280．2mg／g。与单纯的随机尿相比较，其明显提高特异性和正确度。结论建立了重庆市主城区尿Ig、尿TRF、尿α1-M与尿Cr的比值的参考区间，该参考区间能用于临床肾功能损害的评价。乳头瘙痒症患者血清中部分瘙痒介质的检测与研究
摘要：目的探讨乳头瘙痒症与血清中白细胞介素-2（IL-2）和白三烯B4（LTB4）水平有无关联。方法挑选经“视觉模拟标尺评分（VAs）”评估近2周内有乳头瘙痒症状的受检者38例，用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分析其血清IL-2和LTB4水平，对照组为38例健康者。结果乳头瘙痒症患者血清IL-2与对照组的平均值分别为（1738．13±281．96）pg／mL和（106．93±17．35）pg／mL，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；乳头瘙痒症患者血清LTB4与对照组的平均值分别为（94．21±15．28）ng／L和（3．17±0．50）ng／L，两组比较差异有统计学意义（P〈O．05）。乳头瘙痒症患者血清IL-2水平与“痒感程度”和“痒感指数”两项指标的相关系数分别为0．718和0．689，差异有统计学意义（P〈O．05）；乳头瘙瘁症患者血清LTB4水平与“痒感程度”和“瘁感指数”两项指标的相关系数分别为0．706和0．636，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-2和LTB4在乳头瘙痒症患者体内可能作为致痒介质，参与瘙痒的发生和发展。B型脑钠肽在冠状动脉旁路移植术后的变化规律及临床意义
摘要：目的研究B型脑钠肽在冠状动脉旁路移植手术后的变化规律，并找到其对冠心病患者术后心功能、循环指标、预后评价的客观依据。方法选取2010年10月至2012年3月行冠状动脉搭桥手术的患者共90例，根据其手术前第3天心脏彩超检测的左心室射血分数（LVEF）水平分为二组，A组LVEF≥45％；B组LVEF％45％，测定两组在不同时间的血浆B型脑钠肽浓度及心脏相关生物学指标，并进行分析。结果两组的主动脉阻断时间及体外循环时间的差异无统计学意义。冠状动脉旁路移植术后患者的BNP浓度自术后6h开始上升，术后24h达到高峰后逐渐下降，至术后36h仍维持在较高水平。在术前及术后时间二组间患者BNP水平差异有统计学意义，术前BNP水平与LVEF明显负相关，说明心脏功能越差，LVEF水平越低，BNP水平越高，患者的BNP水平可反映心脏功能状态。在术后时间A组较B组的肾上腺素用量、呼吸机应用时间、监护室滞留时间、心房纤颤的发生率有明显差异，说明BNP水平越高，患者心脏功能越差，应用大剂量的血管活性药物的剂量和强度越大，同时提示心房纤颤的高发生率。结论冠状动脉旁路移植患者围术期的BNP水平可反映患者的心脏功能状态．对术后患者的预后评估及康复治疗具有重要意义。蒙古族人群载脂蛋白（a）五核苷酸重复序列基因多态性与脑梗死的关系
摘要：目的研究载脂蛋白（a）[apo（a）]5’调控区（TTTTA）n五核苷酸重复序列（PNR）基因多态性在内蒙古地区蒙古族脑梗死患者中的分布特点。方法采用聚合酶链反应一聚丙烯酰胺凝胶电泳（PCR-PAGE）方法检测66例蒙古族健康人群及67例蒙古族脑梗死患者的apo（a）的PNR基因多态性。结果脑梗死患者血浆脂蛋白（a）[Lp（a）]、三酰甘油（TG）水平明显高于健康对照组，高密度脂蛋白一C（HDL-c）水平明显低于健康对照组；脑梗死患者组检测出（TTTTA）序列重复次数为5、8、9共3种等位基因，5／5、5／8、5／9、8／8、8／9、9／9共6种基因型；健康对照组检测出（TTTTA）序列重复次数为5、7、8、9共4种等位基因，5／8、5／5、7／9、8／8、8／9、9／9共6种基因型。两组人群均以重复次数为8和基因型8／8分布频率最高；脑梗死组与健康对照组apo（a）PNR比较发现各等位基因及基因型频率间差异无统计学意义；脑梗死组基因型S／8与8／9间的血浆I。p（a）水平比较差异无统计学意义。结论蒙古族人群apo（a）PNR基因多态性可能与脑梗死发生不存在直接的相关性。同型半胱氨酸联合D-二聚体对肝癌血栓前状态监测的研究
摘要：目的探讨联合应用同型半胱氨酸（HCY）和D-二聚体（D-Dimer）对肝癌血栓前状态预测的临床应用价值。方法选取50例原发性肝癌患者（肝癌组），30例肝硬化患者（肝硬化组），30例健康对照组，检测血清HCY、血浆D-Dimer的水平，应用ROc曲线分析其对肝癌血栓前状态的预测价值。结果肝癌组与肝硬化组、健康对照组比较，血清HcY、D-Dimer水平均明显升高（P〈O．05）；肝硬化组与健康对照组比较，血清nDimer水平明显升高（P〈0．05），而HCY差异无统计学意义（P=0．912）。原发性肝癌患者的HCY、D-Dimer与两者联合检测在ROC曲线下的面积分别为0．902、0．846、0．941。HCY、D-Dimer对原发性肝癌血栓前状态的临床预测临界点分男11为13．28μmol／L、1451ng／mL。结论HCY和D-IDimer可以作为原发性肝癌血栓前状态的辅助诊断指标，两者联合应用可以提高对原发性肝癌血栓前状态的检出率。兔迷走神经压迫后对血液流变学的影响
摘要：目的通过手术造成兔颈总动脉对迷走神经稳定的压迫，检验血液流变学的变化。方法构建手术组动物模型，将25只新西兰兔的迷走神经与颈部结缔组织固定，造成颈总动脉对迷走神经的持续压迫。同时将25只未经手术处理的新西兰兔作为对照组，采血后用血液流变学分析仪进行检测。结果兔颈迷走神经被压迫后，全血黏度高切指数、全血黏度低切指数，红细胞聚集指数、纤维蛋白原等多项指标和非手术对照组比较，差异有统计学意义（P〈O．05）。结论兔颈总动脉的压迫刺激左侧颈部迷走神经，可以导致兔血液流变学指标发生异常的变化。分离培养和血清学试验诊断肺炎支原体早期感染的应用及评价
摘要：目的应用并评价肺炎支原体（MP）快速培养法、被动凝集法检测总抗体和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测免疫球蛋白M（IgM）抗体在MP感染早期诊断中的价值。方法应用MP快速培养法对该院2009年10月至2010年4月260例急性下呼吸道感染住院患者的咽拭子标本进行培养，同时用被动凝集法检测患者血清中MP的总抗体和ELISA检测MP的IgM抗体。结果260例急性下呼吸道感染患者咽拭子MP快速签定培养法培养阳性58例。阳性率22。3％。被动凝集法检测总抗体阳性83例．阳性率31．9％。ELISA检测IgM抗体阳性67例，阳性率25．8％。结论MPIgM抗体检测试剂因其方便，快捷，可作为优先检测试验。深圳盐田地区G6PD缺乏症发病率与基因突变调查
摘要：目的了解深圳盐田区G6PD缺乏症的流行现状、基因突变谱，探讨其诊断方法及流程。方法采用G6PD／6PGD定量比值法检测G6PD酶活性，反向点杂交及DNA测序检测G6PD基因突变。结果该区G6PD基因突变人群携带率为4．50％，基因突变以C．1388G〉A、c．1376G〉T和c．95A〉G为主。结论该区为包含其他罕见或少见突变类型的复杂G6PD基因突变谱，基于G6PD酶活性的表型筛查有明显的漏检率，基因检测结合表型筛查可大大提高诊断准确性与可靠性。siRNA抑制α乙酰辅酶A羧化酶基因表达促进前列腺癌干细胞凋亡
摘要：目的研究AcDaRNA干扰对前列腺癌干细胞增殖的影响。方法设计并合成ACCa基因的小干扰RNA（siRNA），转染前列腺癌干细胞系，通过Westernblot检测RNA干扰对ACC—α表达的影响，并使用MTT法检测RNA干扰对细胞增殖的影响，使用荧光染色法分析前列腺癌干细胞的凋亡状况。结果siRNA干扰96h后可见ACD-α表达显著下调，转染96h后前列腺癌干细胞增殖状况显著下降，通过荧光染色观察发现，s．RNA干扰造成癌细胞的大量凋亡。结论siRNA干扰ACC—α可以通过诱导凋亡显著的抑制前列腺癌干细胞的增殖，ACC—α是前列腺癌潜在的治疗靶点。中西医结合治疗恶性肺癌胸腔积液80例临床疗效研究
摘要：目的本研究旨在分析中西医结合对治疗恶性肺癌胸腔积液的临床疗效，为临床中提高肺癌患者生存质量及减轻药物毒副作用提供一定指导。方法将在该院接受治疗的80例恶性肺癌胸腔积液患者按就诊时间及治疗方法的不同分为对照组及结合组各40例。对照组采用引流管引流胸腔积液后注入顺铂和乌体林斯注射液进行治疗。结合组则在对照组的治疗基础上，配合中药泻肺汤合苓桂术甘汤进行口服治疗（中西医结合）。治疗结束后对两组进行临床疗效及不良反应反应评价。结果中西医结合治疗组KPS分数升高率为75％，与对照组55％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；结合组不良反应阳性率为7．5%，与对照组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；临床病症缓解率结合组为70％，与对照组52．5％相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论中西医结合对恶性肺癌胸腔积液具有优异疗效，此法应该在临床进行推广，并值得进行下一步研究。肺隐球菌病临床病理分析
摘要：目的分析肺隐球菌病（PC）的临床病理特征及鉴别诊断，提高对PC的认识及诊断。方法应用HE染色、特殊染色（PAS和银染）及免疫组织化学染色对14例PC患者进行观察及分析。结果14例患者中男女均7例，年龄16～66岁，平均43岁。临床主要表现为咳嗽、咳痰、咳血、发热、胸闷及胸背疼痛。影像学检查：6例显示片状实变影；4例呈孤立性结节影；4例表现为多发低密度影，其中1例同时伴有胸椎、肝脏、脾脏多发病变。大体表现为瘤样肿块，切面灰褐色，中央区域可见坏死及囊性变。镜下为非干酪样坏死性肉芽肿伴大量炎细胞浸润。特殊染色巨噬细胞胞质及间质中可见具有诊断意义的圆形空泡状隐球菌孢子。结论PC客易与肺癌、结核及组织胞质茵病等混淆，其诊断主要依靠特殊染色，免疫组织化学及形态学分析。经椎旁肌入路手术治疗68例胸腰段骨折临床疗效观察
摘要：目的研究观察使用经椎旁肌入路手术对于治疗胸腰段骨折的临床疗效。方法选择2012年4月至2013年4月该院诊治的胸腰段骨折患者68例，将其作为观察组，实施椎旁肌入路术式。另选择2012年4月前68例采用传统入路术式患者作为对照组。对比两组不同治疗方式术后情况以及恢复效果。结果观察组术后患者卧床时间（10．0±2．5）d和术中出血量（90．5±30．1）mL明显低于对照组（26．0±3．5）d、（280．1±34．3）mL，差异有统计学意义（P〈O．05）。在手术时间和引流管置放时间方面，差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组术后JOA评分（24．2±0．7）分，而对照组为（18．6±0．8）分，差异有统计学意义（P〈0．05）。在Cobb角的矫正率和椎体塌陷的矫正率方面，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论对于胸腰段骨折患者实施椎旁肌入路术式，优点多、疗效满意，值得临床推广。小鼠主动脉平滑肌细胞Robo4膜蛋白的提取
摘要：目的优化小鼠主动脉平滑肌细胞膜蛋白提取方法，获得高纯度的Rob04膜蛋白。方法高速离心法选择性地分离提取总膜蛋白，BCA法测定总膜蛋白含量，Western—Blot检测目的蛋白条带。结果成功提取总膜蛋白，总膜蛋白浓度达1．47μg／μL，Western-Blot检测出Rob04膜蛋白条带。结论该提取方法简单、可靠、快速，获得的膜蛋白纯度高，可用于Western—Blot后续试验。不同手术方案对卵巢子宫内膜异位症囊肿患者卵巢储备功能的影响
摘要：目的探讨不同手术方案对卵巢子宫内膜异位症囊肿患者卵巢储备功能的影响。方法以该院2011年1月至2013年1月收治的90例卵巢内膜异位囊肿患者为研究对象，根据患者最终的手术方案，分为腹腔镜-电凝组（42例）、腹腔镜-缝合组（23例）和开腹手术组（25倒），比较3组患者术后内分泌激素指标、超声检查指标和卵巢功能预测指标之间的差异。结果在内分泌指标的比较中，电凝组和缝合组在卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）和FSH／黄体生成素（LH）方面均优于开腹手术组，电凝组和缝合组之间未见明显差异。在超声检查中，缝合组在卵巢间质血流检查和卵巢形态学检查中，缝合组患者阻力指数、搏动指数、窦卵泡计数和卵巢直径均得到了比电凝组更积极的结果。而在新型卵巢功能评估指标的比较中，缝合组患者血清抑制素B及抗缪勒管激素水平高于电凝组。结论腹腔镜-缝合法比腹腔镜-电凝法和开腹手术对卵巢储备功能的影响更小。呼气冷凝液中3种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值研究
摘要：目的对呼气冷凝液（EBC）中3种肿瘤标志物进行联合检测，研究其在肺癌诊断中的临床价值，探讨该方法在临床应用的可能性，为今后的肺癌诊断和治疗效果评估提供可靠的参考依据。方法选择2011年1月15日至2012年12月15日该院肿瘤科收治的肺癌患者30例作为肺癌组，另抽取同期健康体检者30例作为健康对照组，对肺癌组患者治疗前后和健康对照组进行EBC及血清中癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19的可溶性片段（CYFRA21—1）、血管内皮生长因子（VEGF）水平检测，并对比分析检测结果。采用标准EBC收集器收集EBC，CEA、CYFRA21—1采用化学发光法，VEGF用酶联免疫吸附法测定。结果肺癌组患者EBC及血清中CEA、CY—FRA21-1、VEGF检测水平明显高于对照组（P〈0．05），化疗后CEA、CYFRA21-1、VEGF水平较治疗前显著降低（P〈O．05），EBC中cEA、CYFRA21-1、VEGF水平较血清中低（P〈0．05）。结论对EBC中CEA、CYFRA21—1、vEGF水平进行检测对于肺癌的诊断、病理分型和疗效判断均具有重要的参考价值，EBC检测结果与血清结果联合可实现相互补充，提高阳性率，值得关注。白细胞介素17在大鼠纤维化模型中的作用及意义
摘要：目的研究白细胞介素17（IL-17）在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法健康SD大鼠64只随机分为健康对照组（N组）、肺纤维化模型组（B组）及地塞米松治疗组（D组）。分别于实验的第7、14、28天将N组、B组处死，D组于第14、28天处死，检测支气管灌洗液及肺组织中IL-17表达水平；观察其病理学改变并测定肺组织中羟脯氨酸水平。结果（1）B组肺组织病理切片表现为逐渐由肺泡炎至纤维化动态改变过程，肺组织内羟脯氨酸高于N组和D组（P〈O．05）。（2）在B组和D组中，肺组织和支气管灌洗液中的IL-17的表达趋势相同，都于第7天达到峰值，而在N组中IL-17呈低水平表达，B组和D组IL-17水平各时间点均明显高于N组（P〈O．05）；肺组织和支气管灌洗液中IL-17与肺组织中羟脯氨酸的表达趋势呈负相关（P〈O．05）。结论IL-17参与肺纤维化形成过程。
