江苏农业科学杂志 统计源期刊

江苏农业科学 2016年第11期杂志 文档列表

江苏农业科学杂志专论

同源重组介导的重组病毒研究进展1-6

摘要：病毒同源重组是以同源臂为基础的将目的基因整合到病毒基因组中的技术。将表达盒串联到转移载体,通过同源重组构建重组病毒从而实现病毒基因改造、外源基因表达以及重组活载体疫苗制备等。就重组病毒的优缺点、构建原理及应用进展进行了概述,对重组病毒构建的难点进行了分析,全面系统地阐述了重组病毒的构建模式,针对基因框(启动子-报告基因-目的基因-调控元件-终止子)给出具体的构建方案,同时对其未来发展前景进行了展望,以期为今后重组病毒的构建提供理论基础。

气候变暖对粮食安全的影响综述6-10

摘要：回顾梳理国内外有关气候变暖对粮食安全影响的文献,发现现有文献研究的角度主要有2个:一个是对作物产量的影响,一个是对农户经济收入的影响。这2种研究视角又大体对应着2类主要的研究方法:一类是生产函数法(productionfunction approach),一类是享乐评价法(hedonic approch)。现有文献关于气候变暖对粮食安全影响的判断往往因研究方法、地区、作物的不同而不同。最后指出现有文献的不足之处和值得进一步研究的地方。

果蔬贮藏加工过程中农药残留的研究进展11-14

摘要：果蔬贮藏加工过程中农药残留的变化会对果蔬安全性产生影响,大部分加工过程可降低果蔬中的农药残留,如清洗、去皮等;但也有一些加工如干制、腌制等,可能会提高农药残留水平。着重讨论了果蔬清洗、去皮、水煮、干制、腌制等加工处理对果蔬农药残留的影响,为确定合适的家庭处理方法提供参考,为膳食评估提供数据依据,以维护消费者健康。

适宜水稻种子贮藏环境参数的研究现状与分析15-18

摘要：为掌握水稻种子贮藏环境参数对种子贮藏的影响,对国内外水稻种子适宜贮藏的环境参数进行综述,分析种子含水量、环境相对湿度、温度和气体成分对水稻种子贮藏的影响以及贮藏参数间的优先级关系。结果表明:对多数水稻品种而言,适宜水稻种子短期贮藏的含水量为10%~12%,环境相对湿度为60%以下,温度为15℃以下;适宜水稻种子长期贮藏的含水量为3%~7%,温度为5℃以下;水稻种子气调贮藏最佳参数:充二氧化碳气调中二氧化碳浓度为35%~70%,氧气浓度为5%~7%;充氮气调中氮气浓度为95%左右。综合分析可知,水稻种子贮藏参数中优先级的顺序为种子含水量>相对湿度>温度>气体浓度。

固体壳聚糖盐制备方法及其应用研究进展19-22

摘要：壳聚糖盐是通过简单质子化改性得到的壳聚糖衍生物,保持了壳聚糖聚阳离子特点。水溶性固体壳聚糖盐能直接溶解于水中,稳定性好,而且具有许多独特的生理活性和功能性质,在食品保鲜、保健品、医药等方面得到广泛应用。疏水性固体壳聚糖盐具有极好的油脂吸附性能和药物缓释作用。综述了国内外固体壳聚糖盐的制备方法和应用研究进展,并展望了固体壳聚糖盐的潜在应用。

嗜热菌乙醇代谢途径研究进展22-25

摘要：微生物利用木质纤维素发酵生产乙醇是可再生能源发展策略之一。人们对常温菌发酵生产乙醇的代谢途径和机理进行了广泛深入的研究。目前天然高效发酵产乙醇菌不能利用五碳糖,因为能利用五碳糖的常温菌乙醇产率低。随着产乙醇嗜热微生物的深入研究,嗜热菌发酵产乙醇的发展为研究带来了契机。文中综述了发酵产乙醇嗜热菌的种类、代谢途径及其关键酶功能特性的研究进展。

中药茅苍术研究进展26-28

摘要：茅苍术是江苏省镇江市茅山地区的道地药材,中医临床使用历史悠久。近年来由于其优良种质资源的濒危、过度开垦、生存环境遭到破坏,茅苍术野生资源日益枯竭,受到广泛关注。本文对茅苍术的品种资源、遗传多样性、生物学、理化特性、育种、栽培管理、药理药性等方面的国内外研究进展作简要综述,以期为茅苍术的资源保护、合理栽培、应用提供依据。

江苏农业科学杂志生物技术

木薯PHOR1基因的序列分析及其乙烯和茉莉酸甲酯诱导表达特性29-33

摘要：为研究木薯中PHOR1基因如何被逆境信号调控,根据杨树2个PHOR1同源基因搜索木薯基因组数据库,得到2个高度同源的木薯PHOR1基因,即Me PHOR11和Me PHOR12。序列分析表明,它们都具有E3泛素连接酶家族成员特征:含有U-box和armadillo重复序列。此外其启动子区具有乙烯响应元件和茉莉酸响应元件。以木薯品种华南八号悬浮培养细胞为材料,利用qRT-PCR检测Me PHOR11和Me PHOR12基因在乙烯利和茉莉酸甲酯处理后的表达特性。结果显示:在乙烯和茉莉酸甲酯分别处理后的细胞悬浮液中,2个PHOR1基因的表达变化呈现相似趋势,即乙烯处理后,2个基因的表达均出现先下降后缓慢上升的趋势;而对茉莉酸信号则呈现先上升后下降又上升再下降的波动性趋势,故推测2个PHOR1基因可被乙烯和茉莉酸信号调控,并可在后续的根生长和淀粉积累等一系列生理生化过程中发挥作用。

大米α-球蛋白的原核表达、抗体制备及检测34-37

摘要：大米α-球蛋白是大米胚乳中主要的盐溶蛋白,也是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米α-球蛋白的检测分析方法,将大米α-球蛋白的编码基因亚克隆到表达载体p QE30中,并在大肠杆菌中进行了重组大米α-球蛋白的表达。通过金属亲和层析法对重组大米α-球蛋白进行纯化,以纯化的重组大米α-球蛋白为抗原免疫白兔,制备出了抗大米α-球蛋白多克隆抗体。Western Blotting检测结果显示,该抗体能够特异性地与大米α-球蛋白进行免疫结合反应,抗大米α-球蛋白抗体与目标蛋白的结合呈现出一定的定量关系。并且,利用该抗体构建起了大米α-球蛋白的ELISA检测分析方法,并对3种大米样品中α-球蛋白的含量进行了检测分析。

鸡卵清蛋白启动子慢病毒载体构建及荧光定量PCR检测重组慢病毒滴度38-39

摘要：构建鸡卵清蛋白启动子(OV 2.8kb)与含有eGFP基因的慢病毒表达载体,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测重组慢病毒滴度。将鸡卵清蛋白启动子基因OV连接到慢病毒载体p LVshRNA-eGFP中替换质粒上CMV promoter元件,经酶切、测序鉴定获得携带OV与eGFP融合基因的重组慢病毒质粒,用QPCR检测病毒浓度滴定。结果显示,重组慢病毒质粒p LVshRNA-OV-eGFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的OV基因序列完全一致。在QPCR试验过程中,发现空白组和载体组的溶解曲线和扩增曲线较好,证明基因组抽提和QPCR过程无问题。最终测得病毒滴度约为1.6×10~7IU/m L。成功构建了携带OV与eGFP融合基因的慢病毒表达载体,为进一步研究卵清蛋白启动子基因的相关功能提供了优质的稳定转染载体。

高粱幼穗再生体系建立的研究40-43

摘要：高粱是重要的杂粮作物之一,其组织培养研究对高粱再生体系建立以及高粱转基因育种具有重要意义。以6个基因型的高粱幼穗为外植体,研究光照、激素、基本培养基以及基因型对幼穗愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明:对于高粱幼穗愈伤组织的诱导培养,光照有利于幼穗愈伤组织的诱导;2,4-D和KT混合使用的效果比2,4-D单独使用好;3种基本培养基对幼穗愈伤诱导影响差异不显著;不同基因型对幼穗愈伤诱导影响差异显著,且5种不同基因型材料的愈伤诱导能力大小为M81-E>07-27>BJ-285=考利>罗马。对于高粱幼穗愈伤组织的分化培养,3种培养基中只有MS培养基和NB培养基分化出再生苗;6种基因型中只有忻粱52分化出绿苗,分化率为11.49%。

桃甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术体系的建立43-45

摘要：为建立适合桃的甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplification polymorphism,简称MSAP）反应体系,以桃PCM-1R、PCM-1G为材料,对MSAP技术中的关键因素进行优化。结果表明,500 ng基因组DNA用EcoRⅠ、HapⅡ或MspⅠ各10 U（0.5μL,2 000 U/m L）,37℃保温12 h,即可酶切完全;25μL选择性扩增体系中,含有2μL10倍稀释的预扩增产物、各1μL上下游引物、2.5μL 10×Taq buffer、2.5μL d NTP mix（各0.2 mmol/L）、2.5μL25 mmol/L MgCl2、0.25μL Taq DNA聚合酶。在该体系下选用256对引物对桃叶片进行甲基化模式分析,经筛选获得23对扩增条带清晰、重复性好的引物,PCM-1R、PCM-1G总甲基化率分别为28.0%、25.7%。

不对称PCR的引物浓度优化及在柑橘基因型分析上的应用46-48

摘要：对柑橘不对称PCR的引物比例浓度进行优化筛选,并以不同柑橘品种的基因组片段为模板验证不对称PCR在柑橘品种基因型分析中的可行性。结果表明,不对称PCR双侧的引物最佳浓度因引物不同而不同,当浓度为10∶1时均能达到理想效果,可见不对称PCR可以用于柑橘基因型分析。

瓠瓜类型砧木遗传作图群体双亲多态性分析48-50

摘要：以耐湿涝瓠瓜类型砧木材料JZS与不耐湿涝材料T2002为遗传作图双亲,利用随机扩增多态性DNA（random amplification polymorphicDNA,简称RAPD）法与瓠瓜及其他近源瓜类简单重复序列（simple sequence repeat,简称SSR）进行多态性分析。从供试1 678个RAPD、SSR标记中共筛选到26个多态性引物,其中包括14个RAPD、4个瓠瓜SSR、2个甜瓜SSR、5个黄瓜SSR、1个南瓜SSR,扩增出28个多态性位点。几种标记多态性检测效率不同,瓠瓜SSR引物揭示,双亲多态性比例最高（0.47%）,其次是RAPD（0.38%）,近源瓜类SSR选择效率最低,仅有0.14%0.15%。结果表明,尽管瓠瓜作图亲本表型差异大,但分子标记结果显示亲本遗传背景相近;甜瓜、黄瓜和南瓜与瓠瓜亲缘关系远,具有种属特异性的SSR引物在瓠瓜亲本JZS、T2002多态性分析中通用性不高。为了提高分子标记多态性分析效率,绘制高密度遗传图谱,下一步应尽快开展基于基因组测序技术检测单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,简称SNP）位点的研究。

蜻蜓凤梨AfERF109基因的克隆及响应乙烯的表达特性分析51-56

摘要：以热带观赏花卉蜻蜓凤梨(Aechemia fasciata)为材料,在分析蜻蜓凤梨转录组数据的基础上,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,简称RACE)技术克隆了APETALA2/乙烯反应元件结合蛋白(APETALA2/Ethylene Response Element Binding Protein,简称AP2/EREBP)家族的1个转录因子编码序列,并将其命名为AfERF109。AfERF109基因cDNA全长939 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长762 bp,编码的蛋白含253个氨基酸残基。AfERF109分子量为28.275 1 ku,理论等电点为5.24;AfERF109不含信号肽和跨膜域,预测其定位于细胞核;AfERF109含有1个典型的AP2结构域,该结构域的二、三级结构构象保守;系统进化分析该蛋白分属ERF亚族的B-4类。实时荧光定量PCR分析表明,AfERF109转录本的表达量随着植株年龄的增长上调,在开花后的花柄中表达量最高。此外,AfERF109转录本的表达量受外源乙烯处理呈现正调控趋势。研究结果初步证实AfERF109参与乙烯调控路径,可能参与蜻蜓凤梨营养生长到生殖生长的时期转换及花柄的发育,为进一步研究AfERF109基因功能、通过基因工程手段调控蜻蜓凤梨开花提供了理论依据。

退火温度、DNA聚合酶和扩增仪对水稻品种真实性SSR分子检测质量的影响57-60

摘要：SSR标记法已经被广泛应用到水稻品种真实性的鉴定中,此方法具有快速、稳定等特点。本研究对比了不同退火温度、DNA聚合酶以及PCR扩增仪等因素对水稻品种真实性SSR分子检测方法的影响,旨在探讨如何根据实验室自身情况选择适合的反应体系和反应条件来顺利地开展检测工作。结果表明,55℃退火温度的PCR产物较有利于水稻品种真实性SSR标记的检测;2种PCR仪性能比较一致,均适合水稻品种真实性SSR标记的检测;Ta KaRa及生工Taq DNA聚合酶均适合水稻品种真实性SSR标记的检测,天根Taq DNA聚合酶不适合水稻品种真实性SSR标记的检测。不同实验室,应选择以上3个适合实验条件进行组合,以提高水稻品种真实性和纯度分子检测的准确性。

光质、光强和外植体对虎杖愈伤组织增殖及白藜芦醇积累的影响60-63

摘要：研究了光质、光强、外植体来源对虎杖愈伤组织增殖及其白藜芦醇积累的影响。结果表明,绿光和黄光有利于虎杖愈伤组织增殖,蓝光最适合于愈伤组织中白藜芦醇的积累;长期培养条件下,弱光和中强光比强光更利于白藜芦醇的积累;以茎段作为外植体,虎杖愈伤组织的增殖速度和白藜芦醇含量都明显高于叶片和叶柄。

燕子掌电信号随光照度变化的分析64-66

摘要：光环境是影响光合作用最重要的因素。不同植物所需的最适宜光照条件不同,通过检测计算燕子掌(Crassula obliqua)电信号的时域和频域特性,研究不同光照度下燕子掌电信号时域峰峰值、均值、频域功率谱的变化,以及表征它们的特征值谱重心频率、谱边缘频率和功率谱熵,探究它们最适宜的光照度。试验证明,燕子掌电信号是一种微弱低频信号,其光合作用的强弱与其植物电信号密切相关,燕子掌最适宜的光照度为24 000~29 500 lx,在此光照度范围其光合作用较强。