Livinα特异性shRNA表达载体的构建与克隆的鉴定
摘要：目的：构建livinα的shRNA表达载体，验证livin靶向RNA干扰重组质粒是否构建成功并成功转化入大肠杆菌。方法：用DNA重组技术将人livinα基因及它对应的靶点shRNA克隆到表达载体pGenesil-1中，构建livinα的shRNA表达载体。然后通过酶切电泳、测序对获得的克隆进行鉴定。结果：经限制性酶切电泳及部分序列分析证明目的基因插入正确。结论：livinα特异性shRNA表达载体的构建成功，可进一步研究该shRNA对该细胞株内源目的基因的干扰作用及对细胞的影响，为体外研究与livinα相关的癌症的治疗探索新的生物途径。慢性肺源性心脏病患者外周血中Th17的初步研究
摘要：目的：观察慢性肺源性心脏病（chronic pulmonary heart disease，CPHD）患者外周血中Th17细胞的表达。方法：搜集34例CPHD患者。20例健康志愿者，采用流式细胞技术分别对患者加重期组、缓解期组及健康对照组外周血Th17细胞进行检测。结果：CPHD患者急性加重期外周血Th17／CD4＋T细胞的比例明显高于缓解期及对照组。结论：CPHD患者外周血Th17细胞比例增高可能参与疾病的发生发展。托吡酯对海人酸致痫大鼠海马组织P-糖蛋白和核转录因子表达的影响
摘要：目的：探讨P-糖蛋白（P-gp）和核转录因子（NF-κB）与难治性癫痫耐药机制的关系及托吡酯（TPM）对其表达的影响。方法：84只Wistar大鼠随机分成对照组24N；海人酸组（KA组）30只；TPM治疗组30只。应用KA前每天给TPM治疗组大鼠灌胃一次，至第14d灌胃后2h注射KA。分别于注射KA后6h、24h、3d处死大鼠，以免疫组化方法检测各组大鼠海马组织中P—gp和NF-κE；表达变化。结果：①KA组P-gp的表达较对照组明显增高（P〈0．01）。P-gp的表达在KA注射6h后升高（P〈0．01），24h时达高峰（P〈0．01），3d时下降但仍然高于6h组（P〈0．01）。TPM组与KA组与比较无显著差异（P〉0．05）；②KA组NF-κB的表达比对照组明显增高（P〈0．01），NF-κB的表达在KA注射6h后升高，24h时达高峰（P〈0．01），3d时仍维持较高水平。TPM组与KA组与比较无显著差异（P〉0．05）。⑧KA组海马组织中NF-κB与P—gp的表达呈正相关（r=0．86，P〈0．01）。结论：KA致痫大鼠海马组织P—gp表达异常增高，其可能参与介导RE的多药耐药。TPM不上调P—gp的表达，P-gp的过度表达可能是癫痫发作的结果。NF-κB与P—gp在癫痫模型表达呈正相关，提示NF-κB可能参与了P—gP介导的多药耐药。云南白药对大鼠脑出血后TNF-α、IL-1β的影响
摘要：目的：是探讨云南白药对大鼠脑出血后TNF-α、IL-1β的作用，降低脑水肿。方法：采用未肝素化的心脏自体血制备Wistar大鼠尾状核脑出血模型。模型成功后2h给治疗组大鼠喂食云南白药治疗，12h、ld、2d、3d、7d定时抽血，经离心后提取血清，用ELISA法先检测TNF-α、IL-1β，观察TNF-α、IL-1β的变化，判断云南白药对大鼠脑出血后TNF-α、IL-1β的影响是否显著。经Bederson神经功能评分，评价云南白药对脑出血大鼠疗效是否显著。结果：所有大鼠在头部注射自体血12h后，神经功能评分均〉2分。出血组和治疗组从12h到3d神经功能缺损评分呈现依次增高，3d后下降。治疗组TNF-α、IL-1β在12h～3d升高，3d后下降。治疗组在术后7d与3d评分比较有统计学意义（P〈0．05），而7d治疗组与出血组比较神经功能缺损评分呈现明显减低（P〈0．01）。结论：云南白药的抗炎作用对TNF-α、IL-1β有影响，云南白药可通过抑制TNF-α、IL-1β的表达，减少血脑屏障的破坏。治疗脑水肿。同时改善大鼠脑出血后神经功能，促其好转。急性冠脉综合征患者血清PAPP-A和IL-18的临床表达与相关性分析
摘要：目的：观察妊娠相关蛋白酶-A（PAPP-A）和白介素-18（IL-18）在急性冠脉综合征（ACS）中的变化及其相关性。方法：60例经冠状动脉造影证实的冠心病患者，其中稳定性心绞痛组20例、急性心肌梗死组20例、不稳定性心绞痛组20例。另选20倒正常健康人为对照组，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆PAPP—A水平。结果：在ACS患者中，血清PAPP—A和IL-18水平明显高于SAP及正常人水平（P〈0．01），PAPP-A与IL-18水平呈显著正相关（r0=0．881，P〈0．01）。结论：ACS患者PAPP—A、IL-18升高，提示两者均可作为急性冠脉综合征预-测预后的新的敏感的标志物。ACS组PAPP-A与IL-18g平呈显著正相关（r2=0．881，P〈0．01）。丙酮酸乙酯对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤中MMP-9表达的影响
摘要：目的：利用新生大鼠缺血缺氧脑损伤动物模型，检测MMP-9的表达，探讨丙酮酸乙酯对MMP-9表达的影响及对缺血缺氧性脑损伤的保护作用。方法：7日龄清洁级Wistar大鼠90只随机分为三组：阴性对照组；缺血缺氧组：腹腔注射生理盐水1．5mL；丙酮酸乙酯治疗组：腹腔注射丙酮酸乙酯溶液50mg／kg。HE染色观察缺血缺氧后大鼠脑组织病理改变，免疫组化法检测MMP-9的表达。结果：HE染色见阴性对照组脑结构完整细胞形态正常；缺血缺氧组脑内见液化坏死灶，细胞肿胀排列紊乱，胞质淡染，核固缩裂解；丙酮酸乙酯治疗组改变较缺血缺氧组减轻。免疫组化结果显示，缺血缺氧’组和丙酮酸乙酯治疗组MMP-9阳性细胞数明显多于阴性对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；丙酮酸乙酯治疗组MMP-9阳性细胞数较缺血缺氧组明显减少差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：缺血缺氧时新生大鼠脑组织中MMP-9表达增加；丙酮酸乙酯可以降低MMP-9的表达，具有脑保护作用。Livin及NF-kbp65在非小细胞肺癌中的表达及意义
摘要：目的：探讨凋亡抑制蛋白Livin和核转录因子NF-κBp65在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测40例NSCLC组织中Livin、NF-κBp65因子表达情况。结果：肺癌组织标本中，Livin与NF-κBp65的阳性表达率分别为70．4％、76．6％。Livin高表达与肺癌病理类型及有无淋巴结转移相关（P〈0．05），NF-κBp65高表达与肺癌淋巴结转移及分化程度相关（P〈0．05），Livin、NF-κBp65蛋白的表达之间存在显著正相关（r=0．265，P〈0．05）。结论：NSCLC中存在Livin、NF-κBp65蛋白的高表达。NSCLC组织中Livin与NF-κBp65表达的上调，对肿瘤的发生、发展起着重要作用。复方甘草酸苷对佐剂性关节炎大鼠血清中IL-4、IL-10和IL-17表达水平的影响
摘要：目的：通过检测佐荆性关节炎大鼠血清IL-4、IL-10和IL-17水平，来探讨复方甘草酸苷注射液对佐剂性关节炎的治疗作用。方法：将Wistar雌性大鼠随机分成正常组（Ⅰ组）、模型组（Ⅱ组）和治疗组（Ⅲ组），各15只。给Ⅱ组与Ⅲ组大鼠足跖部注射完全弗氏佐剂建立关节炎模型，Ⅰ组给予同剂量生理盐水。在建立模型后，Ⅲ组腹腔注射复方甘草酸苷干预．Ⅰ组和Ⅱ组给予同剂量等疗程生理盐水。用酶联免疫法对大鼠血清中IL-4、IL-10及IL-17水平进行检测。结果：Ⅲ组IL-4、IL-10水平明显高于Ⅱ组（P〈0．05），IL-17水平明显低于Ⅱ组（P〈0．05）。结论：复方甘草酸苷注射液可降低血清中IL-17的表达水平，升高IL-4、IL-10的表达水平，对佐荆性关节炎有一定的治疗作用。Axin蛋白在急性白血病患者外周血中的表达及其意义
摘要：目的：探讨急性白血病患者外周血中Axin蛋白的表达及其意义。方法：应用酶联免疫法检测41例急性白血病患者外周血及43例正常健康成人外周血中Axin蛋白的表达情况。结果：Axin蛋白的表达水平在急性白血病组（0．309±0．093）明显低于正常健康成人组（0．464±0．126）（P〈0．05）。Axin蛋白在急性白血病初治组（0．271±0．097）中表达水平低于经治组（0．341±0．079）（P〈0．05）。在急性淋巴细胞白血病组（0．313±0．092）和急性髓细胞白血病组（0．307±0．096）患者外周血中，Axin蛋白表达水平无明显差异（P〉0．05）。Axin蛋白低水平表达与急性白血病的发生相关（P〈0．05），Axin蛋白的表达水平与急性白血病的预后呈正相关（P〈0．05），其与急性白血病的分型无明显关联。结论：Axin蛋白的表达水平可为急性白血病的诊断及预后提供有价值的指标。西藏灵菇酸奶保健作用的研究
摘要：目的：研究西藏灵菇酸奶化学成分，为其保健作用提供科学依据。方法：采用纸色谱、试管试验法和薄层色谱法检测西藏灵菇酸奶化学成分。结果：检测出西藏灵菇酸奶中含有氨基酸、蛋白质、多糖、皂苷等化学成分。结论：西藏灵菇酸奶是一种健康饮品，长期服用具有提高机体免疫力，延缓衰老作用。H—FABP与GPBB早期诊断AMI的价值研究
摘要：目的：探讨H-FABP（心肌型脂肪酸结合蛋白）与GPBB（糖原磷酸化酶同工酶）在临床早期诊断急性心肌梗死（AMI）的应用指标及实用价值。方法：选取48例正常人与42例急性心肌梗死病人采用用双抗体夹心ELISA法对急性胸痛的病人在0～1h、1～3h、3～6h内快速检测H—FABP与GPBB。结果：本实验研究结果表明H—FABP、GPBB、MB、CK—MB、eTnI在0～1h的敏感性分别为38．10％、35．71％、3．62％、0，在1～3h分别为85．71％、83．33％、61．90％、33．33％、23．81％，在3～6h分别为100％、100％、90．48％、61．90％、57．14％f其特异性O～1h分别为100oA、100％、100％、100％、100％，其1～3h特异性分别为100oA、100％、91．67oA、97．92oA、97．92％，其3～6h特异性分别为100％、100％、87．5％、95．83％、95．83％。具有统计学意义（P〈0．05）。结论：从三组数据结果之中分析可知H—FABP与GPBB敏感性及特异性明显优于MB、CK—MB和eTnI,尤其在1～3h内H—FABP与GPBB对早期诊断AMI更具有诊断价值。骨化三醇对佐剂性关节炎模型大鼠血清中TNF-a、IL-4和IL-10的影响
摘要：目的：研究骨化三醇对佐荆性关节炎大鼠模型血清中TNF-a、IL-4和IL-10表达水平的影响，探讨骨化三醇对佐荆性关节炎的治疗作用及相关机制。方法：雌性大鼠45只，随机分为正常对照组，佐剂性关节炎模型组，骨化三醇治疗组，每组157,，2周后，处死全部大鼠，断头取血，检测血清中TNF-a、IL-4和IL-10表达水平。结果：模型组与正常组比较，血清TNF—a水平升高，IL-4、IL-10水平降低，治疗组与模型组比较血清TNF-a表达水平明显降低，IL-4、IL-10表达水平上调。结论：骨化三醇降低佐荆性关节炎大鼠血清TNF—a的表达，上调IL-4、IL-10的表达水平，对类风湿性关节炎的治疗有一定意义。非肾脏沉积性高尿酸血症大鼠肾脏模型的建立及评价
摘要：目的：建立及评价非肾脏沉积性高尿酸血症大鼠肾脏模型。方法：采用不同计量尿酸氧化酶抑制剂氧嗪酸（Oxonicacid OA）制备非肾脏沉积性高尿酸血症大鼠肾脏模型，于5周末观察大鼠的血尿酸、血肌酐、血尿素氮及尿蛋白定量，并观察肾脏组织学改变。结果：采用氧嗪酸750mg／kg、850mg／kg及950mg／kg，每日一次，连续5周灌胃，大鼠肾脏形态学发生了明显改变，但肾脏均未见尿酸盐结晶。血尿指标检测亦出现相应改变，但三者无明显差异。结论：①氧嗪酸750mg／kg，是非沉积性高尿酸血症肾脏模型给药的阚值剂量，且肾脏内无尿酸盐沉积。②非沉积性高尿酸血症可导致肾脏的损伤。CXCR4在胃癌中的表达及其意义
摘要：目的：研究趋化因子受体CXCR4在胃癌中的表达，探讨其与淋巴结、肝转移及预后的关系。方法：免痰组化法检测胃癌原发灶、正常胃黏膜组织、淋巴结转移癌组织以及肝转移组织CXCR4表达情况。RT～PCR检测其CXCR4mRNA在4株胃癌细胞株中的表达。结果：正常胃黏膜组织、胃癌组织、淋巴结转移癌组织以及肝转移组织中CXCR4阳性率分别为15．5％、51．5％、72．2％、73．5％；转移组织阳性表达率明显高于原发肿瘤。CXCR4mRNA高表达于2株人胃癌细胞株。胃癌组织CX—CR4阳性表达率与TNM临床分期、淋巴结转移、肝转移密切相关（P〈0．05），而与患者年龄、性别、肿瘤所在部位及病理分化程度无关。CXCR4阳性表达组3年生存率明显低于阴性表达组（P〈0．05）。结论：CXCR4阳性表达与胃癌的淋巴结、肝转移有关，有助于预后判断。冬虫夏草含药血清诱导神经干细胞分化的研究
摘要：目的：研究神经干细胞具有自我更新、未分化和多向分化潜能，冬虫夏草中的氨基酸，核苷和糖蛋白等能诱导神经干细胞的定向分化。方法：取新生24h内的Wistar仔鼠海马区分离培养神经干细胞三代后，加入低，中，高浓度冬虫夏草含药血清与对照血清进行培养，观察其对神经干细胞影响，免疫组化法检测神经干细胞向神经元分化的情况。结果：新生大鼠海马分离培养的神经克隆球，经免疫细胞化学染色检测为Nestin阳性细胞。NSC贴壁分化的细胞呈NSE、GFAP阳性。冬虫夏草低，中药物实验组诱导神经干细胞分化为神经元的阳性细胞明显高于对照组，且呈量效依赖关系，高浓度药物实验组与对照组没有明显差别。结论：冬虫夏草药物血清可体外诱导神经干细胞向神经元方向分化，在一定范围内存在量效依赖关系。30例中晚期胃癌胃动脉栓塞灌注化疗治疗结果分析
摘要：目的：分析胃动脉栓塞灌注治疗中晚期胃癌的疗效。方法：分析30例中晚期胃癌患者胃动脉灌注化疗后的结果。包括胃动脉造影表现，临床疗效，胃动脉栓塞灌注治疗后的临床表现等。结果：随机选中30例患者一年的生存率为22．4％，有效率44％。黑便、贫血等症状得到有效控制。3年的生存率为11％。结论：中晚期胃癌做胃动脉灌注化疗治疗，是比较有疗效的一种治疗方法，能有效提高患者的一年存活率，并且能提高生存质量。MMP-7和HGF在白血病中的表达及其相关性研究
摘要：目的：探讨基质金属蛋白酶-7（MMP-7）和肝细胞生长因子（HGF）在白血病患者中的表达及两者的相关性。方法：采用酶联免疫法（ELISA）检测了50例白血病患者和40例健康对照组外周血中MMP-7和HGF的表达。及经两个疗程标准化疗后50例白血病患者中HGF及MMP-7的表达。结果：HGF和MMP-7在白血病组的表达水平高于对照组，且差异有显著性（P均〈0．05），两者之间呈正相关性（r=0．303，P〈0．05）。HGF与MMP-7在白血病各分型中的表达无差异（P〉0．05），初治组与复发组之间HGF与MMP-7的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。HGF与MMP-7在白血病完全缓解组（CR）的表达水平明显低于未完全缓解组（PR）（P〈0．05）。结论：HGF与MMP-7的高表达可能与白血病的发生发展发病相关。HGF和MMP-7在白血病的早期诊断与治疗中也起到了重要的作用。新生儿听力筛查初筛时间探讨
摘要：目的：探讨新生儿听力初筛的最佳时间。方法：用美国GSI～70全自动便携式耳声发射仪对1861名新生儿出生后24、48、72、96h进行跟踪听力筛查。结果：出生后24、48、72、96h听力筛查通过率分别为56．8％、87．4％、95．2％、95．7％。结论：用美国GSI-70全自动便携式耳声发射仪进行新生儿听力筛查的最佳时间为生后72h。
