斜纹夜蛾ppie基因的克隆及表达载体构建

作者:俞丹; 张潘; 胡艳; 许翠仙; 张斌月; 李明

摘要:肽基脯氨酰基顺反异构酶E(Peptidyl-prolyl cis-trans isomeraseE,PPIE)是亲环蛋白家族的成员之一,具有肽基脯氨酰基顺反异构酶(Peptidyl-prolylcis-trans isomerase,PPIase)活性,能与亲环蛋白抑制剂CsA特异性结合。PPIE具有两个结构域:N-端的RNA识别域(RNA Recognition Motif,RRM)和C-端的PPIase活性域。PPIE和其他亲环蛋白一样,具有蛋白质折叠功能。研究表明,哺乳动物细胞中的PPIE能抑制流感病毒复制,能与MLLPHD3相互结合。但昆虫细胞中PPIE的功能研究较少。本文以斜纹夜蛾Spodoptera litura为研究对象,克隆得到ppie基因,通过生物信息学分析发现,斜纹夜蛾ppie基因ORF全长876bp,共编码291个氨基酸,具有亲环蛋白家族标签:YQGSlFHRIIPDFMCQGG。构建了真核表达载体pIZT/V5-His-ppie,结果证明,构建的真核表达载体能在昆虫细胞中表达,融合蛋白大小为36kDa左右,与预测大小一致。还通过免疫荧光实验确定,PPIE定位于细胞核中,与前人研究报道一致。本文研究内容将为进一步研究斜纹夜蛾PPIE功能奠定基础。

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关键词:
  • 亲环蛋白
  • 斜纹夜蛾
  • 肽基脯氨酰基顺反异构酶
  • ppie
  • 克隆

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期刊名称:环境昆虫学报

期刊级别:北大期刊

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杂志介绍:
主管单位:广东省科学技术协会
主办单位:广东省昆虫学会;中国昆虫学会
出版地方:广东
快捷分类:生物
国际刊号:1674-0858
国内刊号:44-1640/Q
邮发代号:46-18
创刊时间:1979
发行周期:双月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
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